三代M-MLV逆转录单酶

货号: M347674
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级别和纯度: EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。
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M347674-1kit
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为什么选择此级别

EnzymoPure™ 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

产品组成

货号组分
规格
M347674A-50μl
M-MLV GIII Reverse Transcriptase(200U/μl)
50μl
M347674B-500μl
5× M-MLV First Strand Buffer
500μl
M347674C-100μl
0.1 M DTT
100μl

产品简介

M-MLV GIII Reverse Transcriptase 是通过基因修饰和重组技术 获得的第三代 M-MLV 逆转录酶。该酶相对于野生型 M-MLV 逆转录 酶去除了 RNase H 活性,并大幅提高了热稳定性(最适反应温度为 50℃),从而大大提高了合成第一链 cDNA 时的特异性和长度(最长 可达 12 kb),增强了对 RNA 复杂二级结构的耐受性。


酶活单位定义

37℃条件下,以 Poly(A)-Oligo(dT) 为模板 / 引物,在 10 min 内, 掺入 1 nmol 的 [ 3 H] dTTP 所需要的酶量定义为 1 个活性单位(U)。

质量控制 宿主原性DNA检测 无宿主 DNA 污染。 核酸内切酶残留检测 将酶液与超螺旋质粒 DNA 在 37℃温育 4 h,通过 DNA 电泳检测 质粒无变化。核酸外切酶残留检测 将酶液与双链 DNA 底物在 37℃温育 16 h,通过 DNA 电泳检测 双链 DNA 底物无变化。


使用方法

质粒载体线性化与去磷酸化同步反应流程 1. 于冰上配制如下反应体系: 


a. 推荐使用试剂盒提取的已去除基因组 DNA 污染的高质量 RNA 作为模板。

2. 轻柔吸打混匀后,瞬离;

3. 若使用 Oligo(dT)20 或基因特异性引物,50℃温育 30 min;若使用随机引物,先 25℃温育 5 min,之后 50℃温育 30 min; 注:若目的 cDNA 小于 3 kb,温育时间可缩短为 15 min。

4. 反应结束后,85℃温育 5 min 以终止反应;

5. 将获得的 cDNA 溶液置于冰上,用于后续实验。 注:cDNA 溶液置于 -20℃可保存半年;置于 -80℃可长期储存。


规格

产品名称
三代M-MLV逆转录单酶
规格或纯度
EnzymoPure™
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
储存条件
-20°C储存
运输条件
超低温运输
单位定义
37℃条件下,以 Poly(A)-Oligo(dT) 为模板 / 引物,在 10 min 内, 掺入 1 nmol 的 [ 3 H] dTTP 所需要的酶量定义为 1 个活性单位(U)。

技术文档

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高级数据

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技术文档和文章
溶液计算器

常见问题

「EnzymoPure?」是什么?
「EnzymoPure?」是阿拉丁科学的高端产品线之一,专为多个工作流程中的高纯度应用而设计。与同类工作流程中的标准级别相比,「EnzymoPure?」产品通常具有更严格的规格、更严谨的 QC 以及更强的批间一致性。
本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。需冷冻保存以维持规定的有效期。
本产品如何运输?
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
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