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分子生物学实验中常用聚合酶的类型、特性与应用
分子生物学实验中常用聚合酶的类型、特性与应用
聚合酶是核酸复制、扩增、测序、标记、反转录和体外转录实验中的核心酶类。不同聚合酶在模板类型、耐热性、延伸速度、保真性、链置换能力、末端处理方式和反应体系兼容性方面存在明显差异，实验设计中应根据PCR扩增、RT-PCR、qPCR、等温扩增、测序建库、RNA合成或末端修复等应用目标进行选择。
关键词：聚合酶；DNA聚合酶；RNA聚合酶；反转录酶；PCR；qPCR；高保真扩增；等温扩增；体外转录
1 聚合酶的基本分类
1.1DNA依赖性DNA聚合酶
（1）基本功能
DNA依赖性DNA聚合酶以DNA为模板，按照碱基互补原则合成新的DNA链，是PCR扩增、分子克隆、基因分型、突变检测、测序建库和DNA末端修复中的常用酶类。该类聚合酶通常需要引物提供3′-OH末端，并以dNTP为底物完成链延伸。
（2）主要类型
常见类型包括Taq DNA聚合酶、热启动DNA聚合酶、高保真DNA聚合酶、长片段扩增聚合酶、链置换型DNA聚合酶以及末端处理聚合酶。不同类型之间的差异主要体现在扩增效率、错误率、模板适应性、末端产物形式和特殊样本耐受性。
（3）实验定位
普通片段验证可选择Taq类聚合酶；克隆、突变构建和测序前扩增通常优先选择高保真聚合酶；高GC模板、长片段模板、植物样本、血液样本和低拷贝模板则需要考虑专用缓冲体系或特殊类型聚合酶。
1.2RNA依赖性DNA聚合酶
（1）基本功能
RNA依赖性DNA聚合酶通常指反转录酶，可利用RNA模板合成互补DNA。该过程是RT-PCR、RT-qPCR、cDNA文库构建、转录组分析和RNA病毒检测的基础。
（2）模板适配性
不同反转录酶对RNA二级结构、模板长度、反应温度和样品抑制物的耐受性不同。对于高结构RNA、低丰度RNA或长片段cDNA合成，应优先选择热稳定性较好、持续合成能力较强或RNase H活性较低的反转录酶。
（3）实验定位
短片段RT-qPCR更关注灵敏度、重复性和抑制物耐受性；全长cDNA合成更关注持续延伸能力；病毒RNA、复杂组织样本和临床样本则需要兼顾反应温度、样本背景和RNA完整性。
1.3DNA依赖性RNA聚合酶
（1）基本功能
DNA依赖性RNA聚合酶以DNA为模板合成RNA，常用于体外转录、RNA探针制备、mRNA合成、sgRNA合成和RNA标准品制备。该类酶通常识别特定启动子序列，如T7、T3或SP6启动子。
（2）反应特征
RNA聚合酶不需要引物，一般从启动子下游起始转录。反应体系中需提供NTP、Mg²⁺、缓冲体系和线性化DNA模板。模板纯度、启动子完整性、线性化程度和RNA酶污染控制会直接影响RNA产量和长度一致性。
（3）实验定位
T7 RNA聚合酶应用最广，常用于高效体外转录；SP6和T3 RNA聚合酶常用于特定载体体系、方向性转录和RNA探针制备；Poly(A)聚合酶和Poly(U)聚合酶则用于RNA末端修饰和RNA稳定性研究。
2 常规PCR聚合酶
2.1Taq DNA聚合酶
（1）酶学特点
Taq DNA聚合酶来源于耐热菌，具有较强耐热性，可耐受PCR循环中的高温变性步骤。该酶延伸速度较快、体系成熟、成本较低，是常规PCR中使用最广泛的DNA聚合酶之一。
（2）末端特征
Taq DNA聚合酶通常具有非模板依赖性末端加A活性，扩增产物多带有3′-A突出端，适合TA克隆。但由于其缺乏3′→5′外切酶校正活性，扩增错误率高于高保真聚合酶。
（3）适用场景
Taq适合普通片段验证、菌落PCR、基因分型、常规模板扩增和对保真性要求不高的实验。若扩增产物用于蛋白表达、突变分析或测序验证，则应评估错误引入风险，必要时改用高保真聚合酶。
2.2增强型与快速型Taq聚合酶
（1）增强型体系
增强型Taq聚合酶通常通过酶工程改造或缓冲体系优化，提高对复杂模板、较低模板量或一定抑制物背景的适应能力。此类酶适合常规PCR体系优化和较难扩增模板的初步筛查。
（2）快速扩增体系
快速型DNA聚合酶更强调延伸速度和总反应时间缩短，适合高通量筛查、短片段扩增和快速结果确认。快速PCR对引物质量、退火温度和片段长度更敏感，不宜直接替代所有常规PCR体系。
（3）结果判读
增强型或快速型酶虽然可提高扩增效率，但并不必然提高保真性。若产物用于克隆、测序建库或突变分析，仍应根据产物用途选择高保真体系。
2.3特殊样本耐受型聚合酶
（1）血液样本
全血、血浆或血液提取物中可能含有血红素、免疫球蛋白、抗凝剂等PCR抑制物。血液耐受型聚合酶可提高此类样本中的扩增成功率，适合快速基因检测和样本预筛。
（2）植物样本
植物样本中常含多酚、多糖、叶绿素和次生代谢物，这些成分会抑制DNA聚合酶活性。植物样本专用或叶绿素耐受型聚合酶适合植物组织粗提模板扩增和高通量基因型筛查。
（3）复杂模板
对于抑制物较多、模板纯度较低或样品前处理受限的实验，应优先选择耐受性强的聚合酶，并同时优化模板稀释倍数、Mg²⁺浓度和循环条件。
3 热启动DNA聚合酶
3.1热启动机制
（1）低温抑制
热启动DNA聚合酶通过抗体、化学修饰或适配体等方式抑制低温下的酶活，只有在高温预变性或激活步骤后才恢复活性。该设计可减少非特异扩增和引物二聚体形成。
（2）扩增特异性
热启动体系在qPCR、多重PCR、低拷贝模板扩增和复杂模板检测中优势明显。低温阶段酶活被抑制后，引物错配延伸机会减少，目标条带或目标扩增曲线更稳定。
（3）激活条件
不同热启动聚合酶的激活温度和激活时间不同。若激活不足，可能导致扩增效率下降；若预变性过强，则可能影响模板完整性或某些长片段扩增效果。
3.2应用场景
（1）qPCR体系
qPCR对扩增特异性和重复性要求较高，热启动聚合酶可降低背景扩增和引物二聚体信号，有利于Ct值稳定和熔解曲线单一。
（2）多重PCR
多重PCR中引物组合复杂，非特异扩增风险较高。热启动聚合酶可降低引物间交叉反应，提高多个靶标同时扩增的稳定性。
（3）低拷贝模板
低拷贝模板扩增中，非特异产物容易竞争反应体系资源。热启动聚合酶有助于提高目标模板的优先扩增效率。
4 高保真与长片段DNA聚合酶
4.1高保真聚合酶
（1）校正活性
高保真DNA聚合酶通常具有3′→5′外切酶校正活性，可在延伸过程中识别并切除错误掺入的碱基，从而降低突变率。该特性对克隆、定点突变、测序建库和功能基因扩增尤为重要。
（2）产物末端
高保真聚合酶多产生平末端扩增产物，适合平末端克隆、无缝克隆、Gibson Assembly和同源重组克隆。若需要TA克隆，应额外进行加A处理或选择适配克隆体系。
（3）选型重点
高保真酶并非只看错误率，还应关注扩增速度、GC模板适应性、片段长度范围和缓冲体系兼容性。复杂模板、高GC模板和低输入量模板应优先选择经过优化的高保真体系。
4.2长片段聚合酶
（1）持续合成能力
长片段PCR要求聚合酶具有较强持续合成能力和较低停顿率。长片段聚合酶或复合酶体系常通过提高延伸稳定性和减少模板中断来提升大片段扩增成功率。
（2）模板质量要求
长片段扩增对模板完整性要求高。基因组DNA剪切、反复冻融、残留盐和蛋白污染均可能导致扩增失败。实验中应优先保证模板质量，而不是单纯增加循环数。
（3）延伸时间控制
长片段PCR需要根据目标片段长度设置足够延伸时间。延伸不足会导致截短产物，延伸过长则可能增加非特异背景或降低反应效率。
4.3测序建库相关聚合酶
（1）低错误率
测序建库扩增要求尽量减少碱基错误，以降低假突变、错误标签和测序偏差。高保真热启动聚合酶常用于NGS文库扩增和低输入量样本扩增。
（2）低偏好性
部分模板因GC含量、二级结构或片段长度不同而存在扩增偏好。建库聚合酶应尽量降低GC偏倚和片段长度偏倚。
（3）循环数优化
建库PCR应避免过度扩增。循环数过高会增加重复reads、扩增偏倚和嵌合产物，影响下游数据质量。
5 反转录酶
5.1M-MLV/M-MuLV类反转录酶
（1）常规cDNA合成
M-MLV/M-MuLV类反转录酶常用于cDNA第一链合成，适合多数RT-PCR和RT-qPCR实验。该类酶反应条件温和，对一般mRNA模板具有较好适配性。
（2）RNase H活性差异
RNase H活性较低或缺失的反转录酶可减少RNA模板降解，有利于较长cDNA合成和低丰度转录本检测。对于长片段扩增或全长cDNA构建，RNase H-版本通常更合适。
（3）应用范围
M-MLV类反转录酶适合基因表达分析、转录本检测、常规cDNA合成和RNA样本初筛。若RNA二级结构较强或需要较高反应温度，可考虑AMV或工程化高温反转录酶。
5.2AMV反转录酶
（1）温度适应性
AMV反转录酶可在相对较高温度下工作，对具有较强二级结构的RNA模板具有一定优势。较高反应温度有助于打开RNA结构，提高反转录效率。
（2）模板适用性
AMV反转录酶适合病毒RNA检测、结构复杂RNA模板和部分长片段cDNA合成实验。其反应体系设计需结合RNA质量、引物类型和下游扩增要求综合优化。
（3）实验注意点
对于RT-qPCR实验，应关注反转录效率、反应线性和低丰度转录本检测能力。不同反转录酶之间的cDNA产量和偏好性可能造成表达量比较差异。
5.3工程化反转录酶
（1）高效反转录
工程化反转录酶通常在热稳定性、持续合成能力或抑制物耐受性方面经过优化，适合复杂RNA模板、低丰度RNA和高灵敏检测。
（2）无甘油体系
无甘油反转录酶适合特殊制剂、冻干体系或对反应组分敏感的应用场景。此类酶在体外转录后处理、试剂盒开发和便携检测体系中具有应用价值。
（3）机制研究用途
HIV逆转录酶等重组反转录酶更适合酶学机制、抗病毒药物筛选和逆转录反应研究，不一定作为常规cDNA合成的首选。
6 RNA聚合酶与RNA末端修饰酶
6.1T7 RNA聚合酶
（1）高效体外转录
T7 RNA聚合酶可识别T7启动子并高效合成RNA，是mRNA制备、sgRNA合成、RNA探针和RNA标准品制备中的常用酶。
（2）模板要求
模板需包含完整T7启动子，并建议进行线性化处理，以获得长度明确的RNA产物。模板残留盐、酚、乙醇或蛋白污染均可能影响转录效率。
（3）体系控制
体外转录体系应严格控制RNA酶污染。若用于mRNA制备，还需进一步考虑加帽、加尾、修饰核苷酸掺入和纯化步骤。
6.2T3与SP6 RNA聚合酶
（1）启动子特异性
T3和SP6 RNA聚合酶分别识别特定启动子，常用于方向性体外转录和特定载体体系。不同启动子体系不可直接替换，必须根据载体设计和插入片段方向选择。
（2）RNA探针制备
在原位杂交、Northern blot和RNA结合实验中，T3或SP6 RNA聚合酶可用于制备方向明确的RNA探针。
（3）应用重点
选择T7、T3或SP6 RNA聚合酶时，应先确认启动子序列、插入片段方向和目标RNA链方向，再确定转录体系。
6.3RNA尾加聚合酶
（1）Poly(A)聚合酶
Poly(A)聚合酶可在RNA 3′端添加poly(A)尾，用于mRNA稳定性研究、mRNA制备、RNA末端修饰和RNA检测体系构建。
（2）Poly(U)聚合酶
Poly(U)聚合酶可在RNA 3′端添加U尾，适合RNA降解机制、RNA末端修饰和特定RNA功能研究。
（3）反应体系
RNA尾加反应对RNA纯度、缓冲体系和RNA酶污染非常敏感。反应后通常需要纯化，以去除酶、盐、游离NTP和短片段副产物。
7 等温扩增与末端处理聚合酶
7.1链置换型聚合酶
（1）Bst DNA聚合酶
Bst DNA聚合酶具有较强链置换活性，可在恒温条件下完成DNA扩增，是LAMP等温扩增中的核心酶。不同版本的Bst聚合酶在反应温度、扩增速度和体系稳定性方面存在差异。
（2）Bsu DNA聚合酶
Bsu DNA聚合酶大片段也具有链置换能力，可用于等温扩增和链置换反应。其应用需结合目标体系、引物设计和反应温度选择。
（3）Phi29 DNA聚合酶
Phi29 DNA聚合酶具有强链置换能力和高持续合成能力，可用于滚环扩增、多重置换扩增、单细胞基因组扩增和微量DNA预扩增。
7.2等温扩增实验控制
（1）引物设计
LAMP等体系对引物设计要求较高，多个引物之间容易形成非特异结构。设计时应关注靶序列保守性、引物间互补性和扩增区域长度。
（2）污染控制
等温扩增效率高，扩增产物污染会造成明显假阳性。实验中应设置阴性对照、分区操作，并尽量使用封闭式检测体系。
（3）结果确认
颜色变化、浊度变化或荧光信号可用于快速判读，但必要时仍需结合电泳、熔解曲线或特异性探针确认扩增结果。
7.3末端处理与修复聚合酶
（1）DNA Polymerase I与Klenow片段
E. coli DNA Polymerase I和Klenow片段常用于缺口填补、末端补平、DNA标记和引物延伸。Klenow片段适合克隆前处理、探针制备和文库构建中的特定步骤。
（2）T4 DNA聚合酶
T4 DNA聚合酶具有较强3′→5′外切酶活性，可用于DNA末端平滑化和突出端处理。反应时间需要严格控制，避免过度外切导致片段损失。
（3）文库构建应用
在测序文库构建中，末端修复酶可用于将不同末端形式的DNA片段处理为适合连接接头的状态。该步骤会影响建库效率和片段保留率。
8 常用聚合酶产品选型
8.1分子生物学实验常用聚合酶产品选型
产品模块 | 货号 | 产品名称 | 级别/规格 | 适用实验方向 |
常规PCR DNA聚合酶 | Taq DNA聚合酶 | 重组,分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,5 U/μL | 常规PCR、片段验证、菌落PCR | |
常规PCR DNA聚合酶 | Taq DNA聚合酶 | 重组,分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,≥99%(SDS-PAGE),5 U/μl | 常规PCR、模板扩增、基因分型 | |
常规PCR DNA聚合酶 | Recombinant Taq DNA Polymerase Protein | EnzymoPure™,His标签,≥95%,见COA | Taq酶学研究、PCR体系构建 | |
常规PCR DNA聚合酶 | 重组高热稳定DNA 聚合酶 | EnzymoPure™ | 高温循环PCR、常规DNA扩增 | |
常规PCR DNA聚合酶 | EnzymoPure™ DNA Polymerase | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。 | 常规PCR反应、基础扩增体系 | |
常规PCR DNA聚合酶 | EnzymoPure™ Plus DNA Polymerase | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。 | 常规PCR、复杂模板扩增优化 | |
常规PCR DNA聚合酶 | Enhanced Taq DNA polymerase | 增强型PCR扩增、常规模板检测 | ||
常规PCR DNA聚合酶 | Es Taq DNA Polymerase | EnzymoPure™, 500 U | 常规PCR、片段扩增 | |
常规PCR DNA聚合酶 | mTaq DNA Polymerase | EnzymoPure™ | 常规PCR、模板扩增 | |
常规PCR DNA聚合酶 | GoldStar DNA Polymerase | EnzymoPure™ | 常规PCR、较高稳定性扩增体系 | |
常规PCR DNA聚合酶 | Golden Taq DNA 聚合酶 | 常规PCR、基因片段扩增 | ||
常规PCR DNA聚合酶 | Epitech Taq DNA 聚合酶 | 重组,分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,5 U/μL | 常规PCR、分子克隆前片段验证 | |
常规PCR DNA聚合酶 | AK Taq DNA 聚合酶V2 | 分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,5 U/μL | 常规PCR、体系优化 | |
常规PCR DNA聚合酶 | ProPrime Taq DNA 聚合酶 | 分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,5 U/μL | 常规PCR、稳定扩增 | |
快速PCR DNA聚合酶 | FastPrime DNA Polymerase | EnzymoPure™ | 快速PCR、短片段扩增 | |
快速PCR DNA聚合酶 | FastStar DNA Polymerase | EnzymoPure™ | 快速扩增、快速筛查 | |
快速PCR DNA聚合酶 | FastTaq DNA 聚合酶(5'→3' exo-) | 快速PCR、降低5′→3′外切酶相关影响的体系 | ||
特殊样本PCR聚合酶 | WB DNA聚合酶 | EnzymoPure™, 1.25U/μl | 全血样本直接PCR、抑制物背景扩增 | |
特殊样本PCR聚合酶 | EnzymoPure™ plant DNA Polymerase (Chlorophyll-resistant) | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。 | 植物样本PCR、叶绿素干扰背景扩增 | |
特殊样本PCR聚合酶 | EnzymoPure™ HF DNA Polymerase (Blood-resistant) | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。 | 血液样本、高抑制物样本、高保真扩增 | |
热启动DNA聚合酶 | 热启动Taq DNA 聚合酶 | EnzymoPure™, 5U/μL | 热启动PCR、提高扩增特异性 | |
热启动DNA聚合酶 | 化学法热启动DNA 聚合酶 | EnzymoPure™ | 化学热启动PCR、减少非特异扩增 | |
热启动DNA聚合酶 | 抗体法热启动DNA 聚合酶 | EnzymoPure™ | 抗体热启动PCR、复杂模板扩增 | |
热启动DNA聚合酶 | Hotstart HiTaq DNA 聚合酶 | 重组,分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,5 U/μL | qPCR、多重PCR、低拷贝模板扩增 | |
热启动DNA聚合酶 | Hotstart HiTaq Ⅱ DNA 聚合酶 | 分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,5 U/μL | 高特异PCR、复杂模板扩增 | |
热启动DNA聚合酶 | Epitech HS Taq DNA聚合酶 | 重组,分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,5 U/μL | 热启动PCR、qPCR体系构建 | |
热启动DNA聚合酶 | Anstart Taq II DNA Polymerase | EnzymoPure™, 5U/μL | 热启动或高特异PCR扩增 | |
热启动DNA聚合酶 | 热启动Taq DNA聚合酶, 无甘油 | 无甘油热启动PCR、冻干或特殊制剂体系 | ||
高保真DNA聚合酶 | Pfu DNA聚合酶 | EnzymoPure™, 2.5U/μl | 高保真PCR、克隆、突变构建 | |
高保真DNA聚合酶 | EnzymoPure™ High-Fidelity DNA Polymerase | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶。 | 高保真扩增、ORF扩增、测序前扩增 | |
高保真DNA聚合酶 | Super Kfx DNA Polymerase | EnzymoPure™ | 高保真PCR、复杂模板扩增 | |
高保真DNA聚合酶 | Super Pfx DNA Polymerase | EnzymoPure™ | 高保真扩增、克隆片段制备 | |
高保真DNA聚合酶 | HiFi Seq DNA 聚合酶 | 1U/μL | 测序建库、高保真扩增 | |
高保真DNA聚合酶 | HiFi Seq Hotstart DNA 聚合酶 | 重组,分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,1 U/μL | NGS文库扩增、低错误率扩增 | |
长片段DNA聚合酶 | EnzymoPure™ Extra-long DNA Polymerase | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。 | 长片段PCR、大片段模板扩增 | |
长片段DNA聚合酶 | EnzymoPure™ Plus Extra-long DNA Polymerase | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。 | 长片段扩增、复杂模板长距离PCR | |
特殊DNA聚合酶 | Tth DNA Polymerase | EnzymoPure™, 5U/μl | 高温DNA扩增、特定RT-PCR或热稳定聚合酶研究 | |
等温扩增聚合酶 | Bst 6.0 DNA Polymerase | EnzymoPure™, 无DNA内切酶和外切酶活性。 | LAMP、等温扩增、链置换扩增 | |
等温扩增聚合酶 | Bst 8.0 DNA Polymerase | EnzymoPure™, 无DNA内切酶和外切酶活性。 | 高效等温扩增、快速核酸检测 | |
等温扩增聚合酶 | Bst DNA Polymerase, Large Fragment | EnzymoPure™, ActiBioPure™, 无动物源, 无载体, 生物活性, 无菌, 无DNA酶和RNA酶, 8.0 U/μL | LAMP、RPA辅助体系、链置换扩增 | |
等温扩增聚合酶 | Bst DNA Polymerase, Large Fragment (powder) | 无动物源,无载体,生物活性,无DNA酶和RNA酶,ActiBioPure™,EnzymoPure™,无菌,Store at -20℃ long term (24 months). Avoid freeze/thaw cycle. | 冻干型等温扩增体系、现场检测体系 | |
等温扩增聚合酶 | Bsu DNA Polymerase, Large Fragment | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶和外切酶，不含核糖核酸酶。 | 等温扩增、链置换反应 | |
等温扩增聚合酶 | Phi29 DNA Polymerase | EnzymoPure™ | MDA、RCA、单细胞基因组扩增、微量DNA扩增 | |
末端处理/修复聚合酶 | E.coli DNA Polymerase I | EnzymoPure™, 不含除E.coli DNA Polymerase I之外的其它种类的DNA外切酶，不含内切酶，不含RNase。 | 缺口填补、DNA修复、标记反应 | |
末端处理/修复聚合酶 | 大肠杆菌聚合酶 I 大片段 | 无载体, 无动物源, EnzymoPure™, 无菌, ActiBioPure™, 生物活性, 5 U/μL | Klenow补平、末端标记、引物延伸 | |
末端处理/修复聚合酶 | T4 DNA 聚合酶 | 分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,3 U/μL | DNA末端平滑化、突出端处理、文库构建 | |
末端处理/修复聚合酶 | T4 DNA 聚合酶 | EnzymoPure™, 无动物源, 无载体, 生物活性, ActiBioPure™, 无菌, 无RNA酶, 5.0 U/μL | 末端修复、克隆前处理、DNA片段加工 | |
反转录酶 | AMV逆转录酶 | EnzymoPure™, solution, ＞50 units/μg protein, suitable for RT-qPCR, suitable for RT-PCR | RT-PCR、RT-qPCR、结构较强RNA模板反转录 | |
反转录酶 | EnzymoPure™ M-MuLV反转录酶 | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含BeyoRT?M-MuLV反转录酶本身含有的RNaseH酶活力以外的RNA酶，满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。 | 常规cDNA第一链合成、RT-PCR | |
反转录酶 | EnzymoPure™ II M-MLV反转录酶(RNase H-) | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。 | 长片段cDNA合成、低RNA降解背景反转录 | |
反转录酶 | EnzymoPure™ M-MuLV反转录酶(RNase H-) | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。 | 常规反转录、cDNA第一链合成 | |
反转录酶 | EnzymoPure™ III M-MLV反转录酶 | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。 | 常规反转录、cDNA合成 | |
反转录酶 | EnzymoPure™ Q M-MLV反转录酶 | EnzymoPure™, 不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。 | RT-PCR、RT-qPCR、表达分析 | |
反转录酶 | 二代M-MLV逆转录单酶 | EnzymoPure™ | RNase H-反转录、长片段cDNA合成 | |
反转录酶 | 三代M-MLV逆转录单酶 | EnzymoPure™ | 高性能反转录、cDNA合成 | |
反转录酶 | Super MMLV Reverse Transcriptase | 200U/μL | 高效反转录、低丰度RNA检测 | |
反转录酶 | HiFi II M-MLV (H-) Reverse Transcriptase | 10000 U | 高保真/低RNase H背景反转录 | |
反转录酶 | MeloScript Ⅱ逆转录酶 | 无DNA酶和RNA酶,分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,200 U/μL | RT-PCR、RT-qPCR、cDNA第一链合成 | |
反转录酶 | MeloScript 逆转录酶 | 无DNA酶和RNA酶,分子生物学级,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,200U/μL | 常规反转录、表达检测 | |
反转录酶 | RTL 逆转录酶（无甘油） | BioReagent, PCR试剂, 用于DNA合成, 分子生物学级, EnzymoPure™, 无RNA酶, 用于体外转录, for DNA and RNA applications, 15 U/μL | 无甘油反转录体系、冻干或特殊配方RT体系 | |
反转录酶 | 重组HIV逆转录酶 | EnzymoPure™, ≥5,000 units/mg protein | 逆转录酶机制研究、抗病毒药物筛选、酶活评价 | |
RNA聚合酶 | T7 RNA Polymerase | BioReagent,通过内毒素测试,分子生物学级,EnzymoPure™,无RNA酶,重组,≥98.0%,50 U/μL | 体外转录、mRNA合成、sgRNA合成、RNA探针制备 | |
RNA聚合酶 | T7 RNA 聚合酶 (高浓度) | ActiBioPure™, 无载体, 生物活性, EnzymoPure™, 1KU/μL | 高产量体外转录、mRNA制备、RNA标准品制备 | |
RNA聚合酶 | Thermostable T7 RNA Polymerase | EnzymoPure™, 50U/μl | 高温体外转录、复杂模板转录 | |
RNA聚合酶 | T3 RNA 聚合酶 | EnzymoPure™, ActiBioPure™, 生物活性, 无动物源, 无载体, 无菌, 无RNA酶, 50 U/µL | T3启动子体外转录、方向性RNA探针制备 | |
RNA聚合酶 | SP6 RNA 聚合酶 | 无动物源, 无载体, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, 无RNA酶, 无菌, 20 U/µL | SP6启动子体外转录、RNA探针制备 | |
RNA尾加聚合酶 | 大肠杆菌 Poly(A) 聚合酶 | 医药级, PharmPure™ | RNA加poly(A)尾、mRNA修饰、RNA稳定性研究 | |
RNA尾加聚合酶 | 10×Poly(A) Polymerase Buffer | 医药级, PharmPure™, 10× | Poly(A)聚合酶配套反应缓冲体系、mRNA加尾反应 | |
RNA尾加聚合酶 | Poly(U)聚合酶 | ActiBioPure™, 生物活性, EnzymoPure™, 无动物源, 无载体, 无菌, 无DNA酶和RNA酶, 2.0 U/µL | RNA 3′端加U尾、RNA修饰与降解机制研究 | |
聚合酶机制研究蛋白 | Recombinant Human DNA Polymerase Beta Protein | 无载体,生物活性,ActiBioPure™,His标签,≥95%(SDS-PAGE),见COA | DNA修复机制研究、聚合酶β功能分析 |
聚合酶选择应围绕实验终点确定：常规验证强调扩增效率，克隆和建库强调保真性，qPCR强调特异性和重复性，反转录实验强调RNA模板适配性，体外转录则强调启动子匹配和RNA产量。合理匹配聚合酶类型、模板质量、反应体系和质控策略，可显著提高分子生物学实验结果的可靠性。
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[1] T4 DNA 聚合酶实验
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