计算溶液所需的质量、体积或浓度。
ActiBioPure™,EnzymoPure™,无DNA酶和RNA酶,无动物源,无菌,无载体,生物活性 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
本公司生产的 Bst DNA Polymerase, Large Fragment (powder)即嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus, Bst) DNA Polymerase I 大片段,具有 5'→3' DNA 聚合酶活性,不具有 3'→5'和 5'→3'的核酸外切酶活性。Bst DNA Polymerase, Large Fragment 具有很强的链置换(stranddisplacement)能力,可应用于核酸的等温扩增反应,如环介导的等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)和滚环扩增(Rolling-circle amplification, RCA)等。Bst DNA Polymerase, Large Fragment 介导的等温扩增温度一般在 50-68℃之间,通常为 65℃。与Bst DNA Polymerase 2.0 相比,本产品在进行等温扩增时不具有将 dUTP 掺入合成的 DNA 链的能力。Bst DNA Polymerase 具有 5'→3'的核酸外
切酶活性,而 Bst DNA Polymerase, Large Fragment 通过删除突变而缺失了 5'→3'核酸外切酶活性。
组分和说明
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产品应用
环介导等温扩增 LAMP、解旋酶等温基因扩增(HDA)等 DNA 等温扩增,多重置换扩增(MDA),全基因组扩增(WGA),高 GC 含量 DNA 的测序,纳克级 DNA 模板的快速测序,建库测序等。
产品优势
酶活性好,在进行等温扩增时不具有将 dUTP 掺入合成的 DNA 链的能力。强大的链置换能力、高灵敏度和高特异性、高保真性和热稳定性。
使用说明
1.以 LAMP 等温扩增为例,参考下表设置反应体系。
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注 1:在配制反应体系完成后,可每 25μl 体系的反应管管盖加适量高浓度的 SYBR Green I 1μl,待等温扩增反应结束后,8000g 离心 1min,
反应体系变荧光绿为阳性,保持无色或棕色为阴性。也可以无需添加指示剂,待反应程序结束后,可见反应液明显变浑浊为阳性,反应
液保持透明为阴性。
注 2:如需优化反应,可调整 Mg2+浓度(4-10mM),酶量(0.04-0.32U/μl)或改变反应温度(50-68℃)。
注 3:如果通过琼脂糖凝胶电泳或其它需要打开 LAMP 反应容器的方法进行分析,请设置辅助分析区域和设备,以避免污染。
注 4:由于反应比较迅速,为了确保实验的重现性,建议模板 DNA 最后加入。
注 5:强烈建议设置未加模板的阴性对照,以确保扩增的特异性。
注 6:为了防止在配置试剂时发生污染,请务必在超净工作台内进行操作。
注 7:试剂及模板 DNA 的配置操作尽量需要和 PCR 产物的电泳等分析在不同的区域进行,以免发生污染。
3.反应程序:65℃ 60min。
4.灭活:80℃ 20min。
5.如实验需要,可以用 1.5%的琼脂糖凝胶进行电泳分析,电泳图显示扩增产物为梯度条带为阳性,无梯度条带为阴性。
注意事项:
(1)本产品为冻干粉,使用前需要先溶解,请使用推荐的溶解储存液进行溶解,溶解后的酶需要分装后保存于-20℃,避免反复冻融。
(2)Bst DNA Polymerase, Large Fragment 不具有 3'→5'核酸外切酶活性。
(3)建议等温扩增反应温度不能高于 70ºC,否则会导致酶失活。
(4)Bst DNA Polymerase,Large Fragment 不能用于热循环测序和 PCR。
(5)每次等温扩增实验注意设置无模板 DNA 作为阴性对照。
(6)本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
(7)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | B744267 |
我们的级别选择指南涵盖了目录中所有的变体的纯度、稳定剂状态和应用适用性。
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