SP6 RNA 聚合酶

Name: SP6 RNA 聚合酶
SKU: S750679
Availability: InStock

货号: S750679

COA

有货

级别和纯度: 无动物源 ? 无载体 ? 生物活性 ? ActiBioPure™ ? EnzymoPure™ ? 无RNA酶 ? 无菌 ? 20 U/µL

Accession #

Q7Y5N4

表达系统

E. coli

生物活性

One unit of enzyme incorporates 1nmol of AMP into polynucleotide in 1 hour at 37°C under the following activity assay conditions.

规格

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数量

1KU

S750679-1KU

现货

¥209.90

5×1KU

S750679-5×1KU

现货

¥619.90

25×1KU

S750679-25×1KU

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S750679-100×1KU

现货

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概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器

🧪

为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,无RNA酶,无动物源,无菌,无载体,生物活性级，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

🌡

储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

📋

质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

📚

文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

本公司生产的 SP6 RNA 聚合酶即 SP6 RNA Polymerase 是一种高度特异识别 SP6 启动子序列的 DNA 依赖的 5'→3' RNA 聚合酶。SP6RNA Polymerase 可以催化单链或双链 DNA SP6 启动子下游 NTP 的掺入，合成与 SP6 启动子下游的模板 DNA 互补的 RNA。
纯度（Purity）：不含 DNA 内切酶和外切酶，不含 RNA 酶。
活性检测条件（ Activity assayconditions）：40mM Tris-HCl, 6mM MgCl², 10mM DTT，2mM spermidine, 0.5mM NTP, 0.6MBq/ml[3H]-ATP, pH8.0, 20μg/ml plasmid DNA containing the specific SP6 RNA Polymerase promoter sequence。
组分和说明

S750679	Component	1KU	5*1KU	25*1KU	100*1KU	Storage
S750679A	SP6 RNA Polymerase(20U/μl)	50µl	5*50µl	25*50µl	100*50µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
S750679B	10X SP6 Transcription Buffer	100µl	5*100µl	25*100µl	100*100µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

产品应用
用于 RNA 合成，合成的 RNA 可以用于或用作：杂交探针，基因组 DNA 序列分析，核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay)，反义 RNA 合成，作为体外翻译的 RNA 模板，RNA 剪接研究的底物，RNA 二级结构和 RNA-蛋白质相互作用，核酸扩增分析，siRNA、miRNA 等小 RNA。
产品优势
SP6 RNA Polymerase 不仅可以进行常规的 RNA 合成，还可以识别修饰的 NTP，例如生物素标记、地高辛标记、荧光素标记的 NTP，可以用于各种标记 RNA 的合成。同时对于 SP6 启动子有高度的特异性。
使用说明
1.RNA 合成：
a.DNA 模板经限制性核酸内切酶酶切线性化。
b.酚/氯仿抽提 DNA，用乙醇沉淀后，溶于适量的无菌去离子水中。本步骤也可以使用适当的 DNA 纯化试剂盒，例如用 DNA 纯化试剂盒，直接进行纯化，从而免去了酚氯仿抽提和乙醇沉淀这些步骤。
c.参考如下表格设置反应体系：

10X SP6 Transcription Buffer	2µl
NTP Mixture (10mM each)	4µl
线性 DNA 模板	0.4-1µg
Ribonuclease Inhibitor (40U/µl)	0.5µl
SP6 RNA Polymerase (20U/µl)	0.8-2µl
补充经 DEPC 处理的去离子水	至 20µl

d.按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex 在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
e.37℃孵育 1~2 个小时。
f.加入 2µl 0.5M EDTA (pH 8.0)到反应体系中混匀或-20℃冷却终止反应。
g.电泳分析转录产物，或通过其他适当方法鉴定转录的效率。
注意：
a)转录需在无 RNA 酶条件下进行。
b)反应体系需在室温条件下配置，4℃有亚精胺(spermidine)存在时 DNA 可发生沉淀。
c)按以上反应条件，每 1µg 模板 DNA 可合成超过 10µg 的 RNA。
d)如果模板 DNA 的线形化不太完全，会导致转录出比预期长度更长的 RNA，同时使预期长度的转录本比例下降。
e)可根据实际情况按照比例放大或缩小上述反应体系。
2.放射标记 RNA 的合成：
a.DNA 模板经限制性核酸内切酶酶切线性化。
b.酚/氯仿抽提 DNA，用乙醇沉淀后，溶于适量的无菌去离子水中。本步骤也可以使用适当的 DNA 纯化试剂盒，例如 DNA 纯化试剂盒，直接进行纯化，从而免去了酚氯仿抽提和乙醇沉淀这些步骤。
c.参考如下表格设置反应体系：

10X SP6 Transcription Buffer	2µl
3 NTP Mixture (10mM each , without CTP)	1µl
100µM CTP	2.4µl
[α-32P]-CTP, ~30TBq/mmol(800Ci/mmol)	1.85MBq(50µCi)
线性 DNA 模板	0.2~1µg
Ribonuclease Inhibitor (40U/µl)	0.5µl
SP6 RNA Polymerase (20U/µl)	1-2µl
补充经 DEPC 处理的去离子水	至 20µl

d.37℃孵育 1~2 个小时。
e.-20℃冷却终止反应。
f.分析和检测 RNA 的标记效率。
注意：
a)按以上方法合成的 RNA 活性一般为 3-5 x10⁸ dpm/µg。
b)上述标记反应中也可以使用[32 P]、[35 S]或[3H]标记的其他 NTP。使用其他放射性标记的 NTP 时，其他的 NTP 需作相应调整。20µl 反应体系各成分推荐使用剂量分别为：1.85MBq (50µCi) 5'-[α-32P]-CTP, ~30TBq/mmol(800Ci/mmol)；11.1MBq (300µCi) 5'-[α -35S]-UTP, >37TBq/mmol (>1000Ci/mmol)；0.925MBq (25µCi) 5,6-[3H]-UTP, 1.1-2.2TBq/mmol (30-60Ci/mmol)。 c)放射性标记 NTP 浓度低于 12µM 时，全长转录本合成效率也会下降。
保存条件： -20℃保存，≤0℃运输
注意事项：
（1）酶使用时宜放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
（2）本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
（3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

规格

产品名称

SP6 RNA 聚合酶

别名

SP6 RNA聚合酶

规格或纯度

无动物源, 无载体, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, 无RNA酶, 无菌, 20 U/µL

生物活性

One unit of enzyme incorporates 1nmol of AMP into polynucleotide in 1 hour at 37°C under the following activity assay conditions.

表达系统

E. coli

种属

肠杆菌噬菌体SP6(Enterobacteria phage SP6)

无载体

Yes

无动物源

Yes

来源

重组表达

分子类型

酶

产品线

生物产品

储存与运输

物理形态

液体

储存缓冲液

50mM Tris-HCl, 100mM NaCl, 5mM DTT, 1mM EDTA, 50% (v/v) Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH7.9

浓度

20 U/µL

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

长期储存-20℃（24个月）；避免反复冻融。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA，每批产品都进行了严格的验证，您可放心使用！

找到3个结果

批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ25F0723803	分析证书	S750679
ZJ25F0723804	分析证书	S750679
ZJ25F0723805	分析证书	S750679

技术文档和文章

s750679 sp6 rna 聚合酶中文说明书.pdf

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