T7 RNA 聚合酶 (高浓度)

Name: T7 RNA 聚合酶 (高浓度)
SKU: T1372515
Availability: InStock

CAS: 9014-24-8 货号: T1372515

COA

有货

级别和纯度: 无载体 ? 生物活性 ? ActiBioPure™ ? EnzymoPure™ ? 1KU/μL

Accession #

2PI4_A

表达系统

E. coli

规格

库存

价格

数量

25KU

T1372515-25KU

现货

¥1,999.90

4×25KU

T1372515-4×25KU

现货

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概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器常见问题

🧪

为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,无载体,生物活性级，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

🌡

储存与运输

-20°C储存,干燥,避免反复冻融。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

📋

质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

📚

文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

本公司生产的 T7 RNA 聚合酶(高浓度)，即 T7 RNA Polymerase 是一种高度特异识别 T7 启动子序列的 DNA 依赖的 5'→3' RNA 聚合酶。T7 RNA Polymerase 可以催化单链或双链 DNA T7 启动子下游 NTP 的掺入，合成与 T7 启动子下游的模板 DNA 互补的 RNA。T7 RNA Polymerase 不仅可以进行常规的 RNA合成，还可以识别修饰的 NTP，例如生物素标记、地高辛标记、荧光素标记的 NTP，可以用于各种标记 RNA 的合成。同时对于 T7 启动子有高度的特异性。

来源（Source）	大肠杆菌重组表达
外观（Appearance）	无菌液体
保存液（Storage Buffer）	50mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃), 100mM NaCl, 1mM DTT, 1mM EDTA, 50% (v/v)Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100.
酶浓度（Enzyme Concentration）	1kU/µl
纯度（Purity）	不含 DNA 内切酶和外切酶，不含 RNA 酶。
活性定义（Activity Definition）	37℃ 60 分钟内，催化 1 nmol AMP 掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为 1 个活性单位。

组分

T1372515	Component	25KU	4*25KU	20*25KU	Storage
T1372515A	T7 RNA Polymerase (1kU/µl)	25µl	4*25µl	20*25µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
T1372515B	10X T7 Transcription Buffer	600µl	4*600µl	20*600µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

产品应用

用于 RNA 合成，合成的 RNA 可以用于或用作：杂交探针，基因组 DNA 序列分析，核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay)，反义 RNA 合成，作为体外翻译的 RNA 模板，RNA 剪接研究的底物，RNA 二级结构和 RNA-蛋白质相互作用，核酸扩增分析，siRNA、miRNA 等小 RNA。

产品优势

T7 RNA Polymerase 不仅可以进行常规的 RNA 合成，还可以识别修饰的 NTP。

使用说明

1.RNA 合成：

a.DNA 模板经限制性核酸内切酶酶切线性化。

b.酚/氯仿抽提 DNA，用乙醇沉淀后，溶于适量的无菌去离子水中。本步骤也可以使用适当的 DNA 纯化试剂盒，例如 DNA 纯化试剂盒，直

接进行纯化，从而免去了酚氯仿抽提和乙醇沉淀这些步骤。

c.参考如下表格设置反应体系。如有必要，可以把 T7 RNA Polymerase (1kU/µl)适当稀释后使用。

10X T7 Transcription Buffer	2µl
NTP Mixture (10mM each)	4µl
线性 DNA 模板	0.4-1µg
Ribonuclease Inhibitor (40U/µl)	0.5µl
T7 RNA Polymerase (1kU/µl)	0.04-0.1µl
补充经 DEPC 处理的去离子水	至 20µl

d.按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex 在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。

e.37℃孵育 1~2 个小时。

f.加入 2µl 0.5M EDTA (pH 8.0)到反应体系中混匀或-20℃冷却终止反应。

g.电泳分析转录产物，或通过其他适当方法鉴定转录的效率。

注意：

a)转录需在无 RNA 酶条件下进行。

b)反应体系需在室温条件下配制，4℃有亚精胺(spermidine)存在时 DNA 可发生沉淀。

c)按以上反应条件，每 1µg 模板 DNA 可合成超过 10µg 的 RNA。

d)如果模板 DNA 的线形化不太完全，会导致转录出比预期长度更长的 RNA，同时使预期长度的转录本比例下降。

e)可根据实际情况按照比例放大或缩小上述反应体系。

2.放射标记 RNA 的合成：

a.DNA 模板经限制性核酸内切酶酶切线性化。

b.酚/氯仿抽提 DNA，用乙醇沉淀后，溶于适量的无菌去离子水中。本步骤也可以使用适当的 DNA 纯化试剂盒，例如 DNA 纯化试剂盒，直接进行纯化，从而免去了酚氯仿抽提和乙醇沉淀这些步骤。

c.参考如下表格设置反应体系。如有必要，可以把 T7 RNA Polymerase (1kU/µl)适当稀释后使用。

10X T7 Transcription Buffer	2µl
3 NTP Mixture (10mM each , without CTP)	1µl
100µM CTP	2.4µl
[α-32P]-CTP, ~30TBq/mmol(800Ci/mmol)	1.85MBq(50µCi)
线性 DNA 模板	0.2~1µg
Ribonuclease Inhibitor (40U/µl)	0.5µl
T7 RNA Polymerase (1kU/µl)	0.05µl
补充经 DEPC 处理的去离子水	至 20µl

d.37℃孵育 1~2 个小时。

e.-20℃冷却终止反应。

f.分析和检测 RNA 的标记效率。

注意：

a)按以上方法合成的 RNA 活性一般为 3-5 x10⁸ dpm/µg。

b)上述标记反应中也可以使用[32P]、[35S]或[3H]标记的其他 NTP。使用其他放射性标记的 NTP 时，其他的 NTP 需作相应调整。20µl 反应体系各成分推荐使用剂量分别为：1.85MBq (50µCi) 5'-[α-32P]-CTP, ~30TBq/mmol(800Ci/mmol)；11.1MBq (300µCi) 5'-[α-35S]-UTP, >37TBq/mmol (>1000Ci/mmol)；0.925MBq (25µCi) 5,6-[3H]-UTP, 1.1-2.2TBq/mmol (30-60Ci/mmol)。

c)放射性标记 NTP 浓度低于 12µM 时，全长转录本合成效率也会下降。

3. 生物素标记、地高辛标记等其它用途可以参考上述用途或相关文献资料进行。

保存条件：

-20℃保存，≤0℃运输

注意事项：

（1）酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

（2）本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

（3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

规格

产品名称

T7 RNA 聚合酶 (高浓度)

别名

T7 RNA 聚合酶

英文别名

T7 RNA Polymerase (High Concentration)

规格或纯度

ActiBioPure™, 无载体, 生物活性, EnzymoPure™, 1KU/μL

表达系统

E. coli

来源

重组表达

CAS编号和信息

9014-24-8

酶学委员会编号

2.7.7.6 (BRENDA, IUBMB)

分子类型

酶

产品线

生物产品

储存与运输

物理形态

液体

储存缓冲液

50mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃), 100mM NaCl, 1mM DTT, 1mM EDTA, 50% (v/v) Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100.

浓度

1KU/μL

储存条件

-20°C储存,干燥,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

-20℃储存（2年）；收货后建议分装，避免反复冻融，密封。

单位定义

37℃ 60 分钟内，催化 1 nmol AMP 掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为 1 个活性单位。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

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批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ25F1028735	分析证书	T1372515

技术文档和文章

t1372515 t7 rna 聚合酶高浓度中文说明书.pdf

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溶液计算器

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计算溶液所需的质量、体积或浓度。

质量

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体积

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浓度1（C1）

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体积（添加到小瓶中）

质量（小瓶）

所需的复溶浓度

常见问题

什么是「无载体」？

「无载体」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。

什么是「生物活性」？

「生物活性」表示该产品经过加工和检测，适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性，以及在相关情况下的生物活性验证。

本产品应如何储存？

请于?20 °C、干燥条件下保存。避免反复冻融。请与干燥剂一同密封保存，本品对湿气敏感。

本产品如何运输？

本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。

本产品的 CAS 号、分子式和分子量是多少？

本产品的 CAS 号为 9014-24-8。

如何获取批次专用COA？

每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。

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