Recombinant Taq DNA Polymerase Protein

CAS: 9012-90-2 货号: A156186 分子量: 94 kDa EC号: 232-741-2
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级别和纯度: EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 His标签 ? 组氨酸(His) 标签级 —— 带有 His 标签的重组蛋白,供亲和纯化/检测。用于纯化、固定或检测带标签蛋白。 ≥95% 见COA
Accession #
P19821
蛋白标签
N-His
表达系统
E. coli
应用
PCR
生物活性
Taq DNA polymerase is a heat-resistant enzyme that synthesizes DNA from a single-stranded template in the presence of dNTP and primers, with 5´→3´ DNA polymerase activity and 5´→3´ exonuclease activity.
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A156186-1000U
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为什么选择此级别

EnzymoPure™,His标签 级 提供 ≥95% 纯度,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

Taq DNA Polymerase简称Taq酶,是最常用的DNA聚合酶之一。

Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶,分子量是94 kDa ,是将Thermus aquaticus DNA Polymerase 的基因重组表达后,分离提取而得到的。

产品内容:

1.     Taq DNA Polymerase ( 5 U/μL )

2.     10×Taq Buffer(Mg2+Plus):200mM Tris-HCl,500mM KCl,20mM MgCl2,1mM DTT,pH9.3

活性定义:

一个单位的 Taq DNA 聚合酶是在74° C 下30分钟内将10nmol 脱氧核苷酸掺入 DNA 中所需的酶量 。

使用方法:

1.     PCR反应体系

试剂

体积

10×Taq Buffer(Mg2+ Plus)

5μL

dNTP Mixture(2.5mM each)

4μL

Template DNA

<500 ng

Primer F

0.2-1.0 μM

Primer R

0.2-1.0 μM

Taq DNA Polymerase(5U/μL)

0.2μL

ddH2O

Up to 50μL

2.     PCR反应参数的设置以扩增 1Kb 目的片段为例

步骤

温度℃

时间

循环数

预变性

95

5min

1

变性

95

30s

25-35

退火

55~55(depending on primer Tm)

30s

延伸

72

1min/kb

最后延伸

72

10min

1

Hold

4

∞

1

 


2.1  PCR 反应的设置需根据模板、引物、PCR 产物的长度和 GC 含量等条件的不同设定不同的 PCR 反应条件包括温度、时间和循环数等。

2.2  STEP4(延伸)的时间设置需根据 PCR 产物的长度进行设置,通常每 kb 产物的延伸时间为 1min。例如PCR 产物的长度为 1kb,则延伸时间可以设置为 1min,PCR 产物的长度为 2kb,则延伸时间可以设置为 2min,以此类推。

2.3  对于初次进行的 PCR,为尽量确保可以扩增出预期的 PCR 产物,可以把循环数设置为 35。对于需进行半定量或定量的 PCR 反应循环数一定要进行适当优化,使 PCR 反应没有达到平台期。


Purity:

>95%, by SDS-PAGE visualized with Coomassie® Blue Staining.

Taq DNA Polymerase is a thermostable enzyme that synthesizes DNA from single-stranded templates in the presence of dNTPs and a primer. The enzyme consists of a single polypeptide with a molecular weight of 94 kDa. It has a 5´→3´ DNA polymerase activity and a 5´→3´ exonuclease activity.

Source:
Recombinant enzyme is purified from the cloned Thermus aquaticus DNA polymerase gene expressed in E. coli.

Unit definition

One unit of Taq DNA Polymerase is the amount of enzyme required to incorporate 10 nmoles of deoxyribonucleotide into DNA in 30 min at 74°C.

Product content:

1. Taq DNA Polymerase ( 5 U/μL )

2. 10×Taq Buffer(Mg2+Plus):200mM Tris-HCl,500mM KCl,20mM MgCl2,1mM DTT,pH9.3

PCR Reaction Setup:

Component

50-μL rxn

5×Taq Buffer(Mg2+ Plus)

10μL

dNTP Mixture(2.5mM each)

4μL

Template DNA

<500 ng

Primer F

0.2-1.0 μM

Primer R

0.2-1.0 μM

Taq DNA Polymerase(5U/μL)

0.2μL

ddH2O

Up to 50μL

Incubate reactions in a thermal cycler:

Step

Temperature(℃)

Time

Cycles

Initial Denaturation

95

5min

1

Denature

95

30s

25-35

Anneal

~55(depending on primer Tm)

30s

Extend

72

1min/kb

Final Extension

72

10min

1

Hold

4

indefinitely

1

Optimization Strategies:

Different PCR reaction conditions, including temperature, time and number of cycles, should be set according to different template, primer, length of PCR product and GC content.

The time setting of STEP4(extension) should be set according to the length of PCR products, usually the extension time of each kb product is 1min.

For initial PCR, the number of cycles can be set to 35 to ensure that the expected PCR product can be amplified as much as possible. The number of PCR reaction cycles that need to be semi-quantitative or quantitative must be properly optimized so that the PCR reaction does not reach a plateau.


规格

产品名称
Recombinant Taq DNA Polymerase Protein
别名
Taq DNA 聚合酶 | 不含DNA的Taq DNA 聚合酶 | 重组 Taq DNA 聚合酶蛋白
英文别名
DNA polymerase I | thermostable | DNA-directed DNA polymerase
规格或纯度
EnzymoPure™,His标签,≥95%,见COA
生物活性
Taq DNA polymerase is a heat-resistant enzyme that synthesizes DNA from a single-stranded template in the presence of dNTP and primers, with 5´→3´ DNA polymerase activity and 5´→3´ exonuclease activity.
表达系统
E. coli
氨基酸
1-832 aa
序列
MRGMLPLFEPKGRVLLVDGHHLAYRTFHALKGLTTSRGEPVQAVYGFAKSLLKALKEDGDAVIVVFDAKAPSFRHEAYGGYKAGRAPTPEDFPRQLALIKELVDLLGLARLEVPGYEADDVLASLAKKAEKEGYEVRILTADKDLYQLLSDRIHVLHPEGYLITPAWLWEKYGLRPDQWADYRALTGDESDNLPGVKGIGEKTARKLLEEWGSLEALLKNLDRLKPAIREKILAHMDDLKLSWDLAKVRTDLPLEVDFAKRREPDRERLRAFLERLEFGSLLHEFGLLESPKALEEAPWPPPEGAFVGFVLSRKEPMWADLLALAAARGGRVHRAPEPYKALRDLKEARGLLAKDLSVLALREGLGLPPGDDPMLLAYLLDPSNTTPEGVARRYGGEWTEEAGERAALSERLFANLWGRLEGEERLLWLYREVERPLSAVLAHMEATGVRLDVAYLRALSLEVAEEIARLEAEVFRLAGHPFNLNSRDQLERVLFDELGLPAIGKTEKTGKRSTSAAVLEALREAHPIVEKILQYRELTKLKSTYIDPLPDLIHPRTGRLHTRFNQTATATGRLSSSDPNLQNIPVRTPLGQRIRRAFIAEEGWLLVALDYSQIELRVLAHLSGDENLIRVFQEGRDIHTETASWMFGVPREAVDPLMRRAAKTINFGVLYGMSAHRLSQELAIPYEEAQAFIERYFQSFPKVRAWIEKTLEEGRRRGYVETLFGRRRYVPDLEARVKSVREAAERMAFNMPVQGTAADLMKLAMVKLFPRLEEMGARMLLQVHDELVLEAPKERAEAVARLAKEVMEGVYPLAVPLEVEVGIGEDWLSAKE
蛋白标签
N-His
蛋白长度
Protein fragments
来源
重组表达
预测分子量
96 kDa
SDS-PAGE
96 kDa
CAS编号和信息
9012-90-2
分子类型
蛋白质
产品线
生物产品
储存与运输
应用
PCR
储存缓冲液
20mM Tris-HCl, 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.5% Tween20, 0.5% Np40, 50% Glycerol, pH8.0
浓度
见COA
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
在 -20°C 下可稳定保存 1 年。避免冷冻/解冻循环。
图片

Recombinant Taq DNA Polymerase Protein (A156186) - PCR
Taq polymerase catalyzes oligonucleotide primer-driven, DNA template dependent incorporation of dNTPs into complimentary DNA strands. It displays both 5′ to 3′ polymerase and exonuclease activities. Use the measurements below to prepare your PCR experiment, or enter your own parameters in the column provided.

Component

50 μL rxn

5×Taq Buffer (Mg2+ Plus)

10 μL

dNTP Mixture (2.5 mM each)

4 μL

Template DNA

5 ng

Primer F

0.5 μM

Primer R

0.5 μM

Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.1 μL/0.2 μL

ddH2O

Up to 50 μL

Reaction condition: 95 ℃ 3 min; 95 ℃ 10 s, 55 ℃ 30 s, 72 ℃ 1 min, 30 cycle; 72 ℃ 5 min.


技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

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🔬 规格说明书

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ23F0800921 分析证书 A156186
技术文档和文章
CUT&RUN-seq实验方案
酶活性检测技术的原理、方法与应用实践
Principles, Methods, and Applied Practice of Enzyme Activity Assays
DNA聚合酶:结构功能特征、关键类型与应用技术指南
DNA Polymerases: Structural and Functional Features, Key Types, and Application Guidance
分子生物学实验中常用聚合酶的类型、特性与应用
Types, Properties, and Applications of Commonly Used Polymerases in Molecular Biology Experiments
CUT&RUN-seq protocol
等温扩增反应中的单链DNA结合蛋白:gp32、SSB与核酸扩增效率优化
Single-Stranded DNA-Binding Proteins in Isothermal Amplification: Optimization of gp32, SSB, and Nucleic Acid Amplification Efficiency
溶液计算器

常见问题

本产品如何运输?
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
本产品的 CAS 号、分子式和分子量是多少?
本产品的 CAS 号为 9012-90-2。
本产品的纯度是多少?
本产品的化学纯度(含量)为 ≥95%。批次的具体数值以分析证书(COA)为准。
「EnzymoPure?」是什么?
「EnzymoPure?」是阿拉丁科学的高端产品线之一,专为多个工作流程中的高纯度应用而设计。与同类工作流程中的标准级别相比,「EnzymoPure?」产品通常具有更严格的规格、更严谨的 QC 以及更强的批间一致性。
什么是「His标签」?
「His标签」指融合了亲和标签的重组蛋白产品,适用于重组蛋白表达和亲和纯化。该标签可实现一步亲和纯化、固定化或检测,在大多数情况下不影响下游活性。
本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。
如何获取批次专用COA?
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