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Recombinant Taq DNA Polymerase Protein (A156186) - PCR
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EnzymoPure™,His标签 级 提供 ≥95% 纯度,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
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在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
Taq DNA Polymerase简称Taq酶,是最常用的DNA聚合酶之一。
Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶,分子量是94 kDa ,是将Thermus aquaticus DNA Polymerase 的基因重组表达后,分离提取而得到的。
产品内容:
1. Taq DNA Polymerase ( 5 U/μL )
2. 10×Taq Buffer(Mg2+Plus):200mM Tris-HCl,500mM KCl,20mM MgCl2,1mM DTT,pH9.3
活性定义:
一个单位的 Taq DNA 聚合酶是在74° C 下30分钟内将10nmol 脱氧核苷酸掺入 DNA 中所需的酶量 。
使用方法:
1. PCR反应体系
试剂 | 体积 |
10×Taq Buffer(Mg2+ Plus) | 5μL |
dNTP Mixture(2.5mM each) | 4μL |
Template DNA | <500 ng |
Primer F | 0.2-1.0 μM |
Primer R | 0.2-1.0 μM |
Taq DNA Polymerase(5U/μL) | 0.2μL |
ddH2O | Up to 50μL |
2. PCR反应参数的设置以扩增 1Kb 目的片段为例
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2.1 PCR 反应的设置需根据模板、引物、PCR 产物的长度和 GC 含量等条件的不同设定不同的 PCR 反应条件包括温度、时间和循环数等。
2.2 STEP4(延伸)的时间设置需根据 PCR 产物的长度进行设置,通常每 kb 产物的延伸时间为 1min。例如PCR 产物的长度为 1kb,则延伸时间可以设置为 1min,PCR 产物的长度为 2kb,则延伸时间可以设置为 2min,以此类推。
2.3 对于初次进行的 PCR,为尽量确保可以扩增出预期的 PCR 产物,可以把循环数设置为 35。对于需进行半定量或定量的 PCR 反应循环数一定要进行适当优化,使 PCR 反应没有达到平台期。
Purity:
>95%, by SDS-PAGE visualized with Coomassie® Blue Staining.
Taq DNA Polymerase is a thermostable enzyme that synthesizes DNA from single-stranded templates in the presence of dNTPs and a primer. The enzyme consists of a single polypeptide with a molecular weight of 94 kDa. It has a 5´→3´ DNA polymerase activity and a 5´→3´ exonuclease activity.
Source:
Recombinant enzyme is purified from the cloned Thermus aquaticus DNA polymerase gene expressed in E. coli.
Unit definition
One unit of Taq DNA Polymerase is the amount of enzyme required to incorporate 10 nmoles of deoxyribonucleotide into DNA in 30 min at 74°C.
Product content:
1. Taq DNA Polymerase ( 5 U/μL )
2. 10×Taq Buffer(Mg2+Plus):200mM Tris-HCl,500mM KCl,20mM MgCl2,1mM DTT,pH9.3
PCR Reaction Setup:
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Incubate reactions in a thermal cycler:
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Optimization Strategies:
Different PCR reaction conditions, including temperature, time and number of cycles, should be set according to different template, primer, length of PCR product and GC content.
The time setting of STEP4(extension) should be set according to the length of PCR products, usually the extension time of each kb product is 1min.
For initial PCR, the number of cycles can be set to 35 to ensure that the expected PCR product can be amplified as much as possible. The number of PCR reaction cycles that need to be semi-quantitative or quantitative must be properly optimized so that the PCR reaction does not reach a plateau.
Recombinant Taq DNA Polymerase Protein (A156186) - PCR
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
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| 分析证书 | A156186 |