计算溶液所需的质量、体积或浓度。
EnzymoPure™ 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
-20°C储存。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
产品组成
| 货号 | 组分 | 规格 |
| M346745A-50μl | M-MLV RNase H- Reverse Transcriptase(200U/μl) | 50μl |
| M346745B-500μl | 5× M-MLV First Strand Buffer | 500μl |
| M346745C-100μl | 0.1 M DTT | 100μl |
产品简介
M-MLV RNase H- Reverse Transcriptase 是通过基因修饰 和重组技术克隆表达的 RNase H 活性缺失型莫洛尼氏鼠白血病毒 (Moloney Murine Leukemia Virus, M-MLV)逆转录酶。经过基因 工程改造,本酶的最适反应温度提升至 42℃,延伸能力更强,可用于 较长的 cDNA 合成。
活性定义
37℃条件下,以 Poly(A)-Oligo(dT) 为模板 / 引物,在 10 min 内, 掺入 1 nmol 的 [ 3 H] dTTP 所需要的酶量定义为 1 个活性单位(U)。
使用方法
第一链 cDNA 合成步骤
1. 于冰上配制如下反应体系:

a. 推荐使用试剂盒提取的已去除基因组DNA 污染的高质量 RNA 作为模板。
2. 将以上混合液在 65℃温育 5 min,迅速取出置于冰上冷却 1 min;
3. 向反应混合液中继续加入:

4. 轻柔吸打混匀后,瞬离;
5. 若使用 Oligo(dT)20 或基因特异性引物,42℃温育 30 min;若使用随机引物,先 25℃温育 5 min,之后 42℃温育 30 min;
6. 反应结束后,85℃温育 5 min 以终止反应;
7. 将获得的 cDNA 溶液置于冰上,用于后续实验。
注:cDNA 溶液置于 -20℃可保存半年;置于 -80℃可长期储存。
质量控制
宿主原性DNA检测:无宿主 DNA 污染
核酸内切酶残留检测:将酶液与超螺旋质粒 DNA 在 37℃温育 4 h,通过 DNA 电泳检测质粒无变化。
核酸外切酶残留检测:将酶液与双链 DNA 底物在 37℃温育 16 h,通过 DNA 电泳检测双链DNA底物无变化。