WB DNA聚合酶

货号: W292915
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级别和纯度: EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 1.25U/μl
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50μL
W292915-50μl
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250μL
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1ml
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为什么选择此级别

EnzymoPure™ 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

产品说明

Whole Blood polymerase是一种高性能血液直扩PCR产品,抵抗较高浓度的血液(EDTA、肝素、柠檬酸钠)、SDS、NaCl等的抑制作用。 即使在PCR增强剂不存在的情况下以及在其他商业酶失效的某些浓度的血液样品中,其通常仍然在40%全血(50μl体系)PCR中起作用。在PCR增强剂的存在下扩增效果会更好。 它能够在PCR之前直接从全血扩增,而无需DNA纯化,可热启动,产量高。来自菲鹏的这种新型热启动酶制剂配有5× WB buffer(with Mg2+),这是一种专有反应buffer,组分中含有2×Enhancer,初次实验建议先不加Enhancer,若扩增效果较差,再加入Enhancer进行调试。

产品内容

Whole Blood polymerase ( 5U/μl )

5×WB buffer

Enhancer(2×)

来源 : 来源于重组E.coli 菌株,携带有突变后的Taq酶基因,该基因去除了5´→3´ 核酸外切酶结构域。

热失活:75℃热处理 20min。


注意事项

需要注意的是,Whole Blood polymerase 含有一定的校正活性,扩增后的产物为平末端,用于 TA 克隆前,需要将扩增产物进行纯化后加 A 尾。

 
体系配制(25μl)

组分

体积

终浓度

5×WB buffer(with Mg2+)

5μl

1×

25mM dNTP

0.2μl

0.2mM

Forward primer(10μM)

0.5μl

0.2μM

reversed primer(10μM)

0.5μl

0.2μM

Whole Blood polymerase

0.25-2μl

 

Enhancer(2×,可选)

12.5μl

 

全血

最高至 5μl

—

超纯水

—

—

体积

25μl

—


质量控制分析

1)单位特性分析:单位活性是用2倍连续稀释法测定。稀释的酶液用含Whole Blood polymerase 的50%甘油的储存液制备,添加到包含小牛胸腺DNA,1×Whole Blood polymerase, 3H-dTTP和100 µM dNTPs的50μl反应体系中,37℃温育10min,放置冰上进行测定。

2)蛋白质浓度(OD280 )测定:用 OD280 吸光法测定。

3)物理纯度测定:用浓缩和稀释的酶溶液进行SDS-PAGE 凝胶电泳之后,用银染色法检测,通过浓缩样品聚集的杂质条带和稀释样品蛋白的目的条带来评定蛋白纯度。

 

污染测试

1) 单链核酸外切酶活性:50μl 反应体系中加入放射性标记的单链 DNA 底物和 10μl 酶溶液,37℃温育 4 小时测定,释放 TCA-可溶数量大于 50.0%。

2) 双链核酸外切酶活性:50μl 反应体系中加入放射性标记的双链 DNA 底物和 10μl 酶溶液,37℃温育 4 小时测定,释放 TCA-可溶数量大于 50.0%。

3) 双链核酸内切酶活性:50μl 反应体系中加入 0.5ug Pbr322 质粒 DNA 和 10μl 酶溶液,37℃温育 4 小时进行琼脂糖凝胶电泳,无明显可见的带缺口的环状 DNA。

4) E.coli 16S rDNA  污染测定:用 5μl 经过变性和筛选的复制样品酶溶液和用与 16S rRNA 位点一致的寡核苷酸引物进行TaqMan qPCR 来检测污染的大肠杆菌基因组。

产品说明

检测

SDS 纯

活性

SS 核酸外切

DS 核酸外切

DS 核酸内切

E.coli DNA 污染

测试单位

n/a

n/a

50

50

50

50

说明

>99%

5,000

无检出

无检出

无检出

<10 个拷贝

 


规格

产品名称
WB DNA聚合酶
规格或纯度
EnzymoPure™, 1.25U/μl
分子类型
酶
产品线
biological_products
储存与运输
浓度
1.25U/μl
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
单位定义
1单位指 37℃条件下,30min 内能催化 10nmol 的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

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✅ 分析证书 (COA)

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📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

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🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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