Tth DNA 聚合酶

货号: T292976
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级别和纯度: 重组 ? 重组(Recombinant)—— 通过重组表达生产,序列确定、批次稳定。适用于来源明确、无动物源的可重现蛋白。 BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 PCR试剂 ? PCR 级 —— 无核酸酶、无抑制剂试剂,扩增可靠。适用于污染会阻断或偏倚扩增的 PCR/qPCR。 分子生物学级 ? 适用于分子生物学 —— 不含降解 DNA/RNA 的核酸酶和污染物。适用于克隆、PCR 和需要洁净试剂的核酸工作。 EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 for DNA and RNA applications ? DNA 和 RNA 应用级 —— 对两者均控制核酸酶。适用于同时处理 DNA 和 RNA 且存在降解风险的流程。 From Thermus thermophilus
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为什么选择此级别

BioReagent,EnzymoPure™,for DNA and RNA applications,PCR试剂,分子生物学级,重组 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

Tth DNA 聚合酶是一种热稳定性酶,分子量94kDa,用大肠杆菌重组表达从来源 Thermus thermophilus HB-8 的基因。该酶在74°C时可进行DNA复制,在95°C的半衰期为20min。Tth DNA 聚合酶在镁离子存在的条件下可催化核苷酸沿5`→3`方向发生聚合反应,形成双链DNA,也可在锰离子存在的条件下,以RNA为模板沿5`→3`方向发生核苷酸聚合反应。该酶也具有5`→3`外切酶活性。Tth DNA 聚合酶可用于PCR、RT-PCR、逆转录和较高温度条件下的引物延伸反应。

组分与储存:

组分货号组分名称物理外观50μL250μL1ml储存
T292976ATth DNA 聚合酶液体50μL250μL1ml-20℃.
T292976B2×Tth 一步法反转录‑PCR 缓冲液液体1.25ml6.25ml25ml-20℃.
T292976C锰离子溶液 (50×)液体50μL250μL1ml-20℃.
注意: 2×Tth 一步法反转录‑PCR 缓冲液含有Mg²⁺。 

适用范围:

PCR扩增、RT-qPCR扩增。

单位定义:

在 70°C 条件下,30min 内催化 10nmol dNTP 掺入到 TCA 不溶性物质所需的酶量为一个单位。

注意事项:

1. 引物设计室温/4°C溶解并混匀反应所需的各种溶液。并放置于冰浴上或冰盒内。

2. 建议反应液体分装使用,避免反复冻融。

3. 过多的模板DNA容易导致非特异性的PCR产物。

使用方法:

体系配置:

组分加入体积终浓度
2×Tth One Step RT-PCR Buffer25μl1×
RNasin (40U/μl)1μl/
Forward Primer (10μM)1μl0.5μM
Reverse Primer (10μM)1μl0.5μM
Probe (10μM)0.25μl0.5μM
Mn²⁺ (50×)1μl1×
Tth DNA Polymerase1μl0.1U/μ1
Template DNA5μl/
ddH₂O
To 50μl/
终体积50μl/

反应程序:

步骤名称 温度 时间 循环
热激 95℃ 20min 30s 1
退火 60℃ 30s 1
热激 95℃ 20min 30s 1
变性 94℃ 15s 40
退火 55℃ 40s
保存 4℃ ∞ 1


Tth DNA polymerase is a thermostable enzyme with a molecular weight of 94 kDa. It is recombinantly expressed in Escherichia coli from the gene of Thermus thermophilus HB‑8. The enzyme performs DNA replication at 74 °C and has a half‑life of 20 min at 95 °C. In the presence of magnesium ions, Tth DNA polymerase catalyzes the polymerization of nucleotides in the 5′→3′ direction to form double‑stranded DNA. In the presence of manganese ions, it can also carry out nucleotide polymerization in the 5′→3′ direction using RNA as a template. This enzyme also possesses 5′→3′ exonuclease activity. Tth DNA polymerase can be applied to PCR, RT‑PCR, reverse transcription, and primer‑extension reactions at elevated temperatures.

Contents & Storage:

Component No.Component NameAppearance50μL250μL1mlStorage
T292976ATth DNA PolymeraseLiquid50μL250μL1ml-20℃.
T292976B2×Tth One Step RT-PCR BufferLiquid1.25ml6.25ml25ml-20℃.
T292976CMn²⁺ (50×)Liquid50μL250μL1ml-20℃.
Note: 2×Tth One Step RT‑PCR Buffer contains Mg²⁺.

Scope of application:

PCR amplification, RT‑qPCR amplification.

Unit definition:

One unit is defined as the amount of enzyme required to catalyze the incorporation of 10 nmol dNTPs into TCA‑insoluble material within 30 min at 70 °C.

Precautions:

1. Dissolve and mix all reaction‑required solutions at room temperature or 4 °C, then place them on an ice bath or in an ice box.

2. It is recommended to aliquot the reaction mixture to avoid repeated freeze‑thaw cycles.

3. Excessive template DNA is liable to produce non‑specific PCR products.

Procedure:

Reaction System Setup:

Component
Volume Added
Final Concentration
2×Tth One Step RT-PCR Buffer25μl1×
RNasin (40U/μl)1μl/
Forward Primer (10μM)1μl0.5μM
Reverse Primer (10μM)1μl0.5μM
Probe (10μM)0.25μl0.5μM
Mn²⁺ (50×)1μl1×
Tth DNA Polymerase1μl0.1U/μ1
Template DNA5μl/
ddH₂O
To 50μl/
Final Volume
50μl/

Reaction procedure:

Step Name Temperature Time Cycles
Heat Activation 95℃ 20min 30s 1
Annealing 60℃ 30s 1
Heat Activation 95℃ 20min 30s 1
Denaturation 94℃ 15s 40
Annealing 55℃ 40s
Hold 4℃ ∞ 1


规格

别名
Tth DNA聚合酶
规格或纯度
重组, BioReagent, PCR试剂, 分子生物学级, EnzymoPure™, for DNA and RNA applications, From Thermus thermophilus
英文名称
Tth DNA Polymerase
单位定义
在70℃条件下,30min 内催化 10nmol dNTP 掺入到TCA不溶性物质所需的酶量为一个单位。
应用
PCR, RT-qPCR
定量&半定量
定量
储存与运输
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
Store at -20℃ long term (24 months). Avoid repeated freeze-thaw cycles.
组分与储存
Component No.组分名称物理外观50μL250μL1ml储存
T292976ATth DNA 聚合酶
液体
50μL250μL1ml-20℃.
T292976B
2×Tth 一步法反转录‑PCR 缓冲液
液体
1.25ml6.25ml25ml-20℃.
T292976C锰离子溶液 (50×)
液体
50μL250μL1ml-20℃.
注意: 2×Tth 一步法反转录‑PCR 缓冲液含有Mg²⁺。

技术文档

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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ26F0938877 分析证书 T292976
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