磷酸果糖激酶 (PFK)

Name: 磷酸果糖激酶 (PFK)
SKU: P1433724
Availability: InStock

CAS: 9001-80-3 货号: P1433724

COA

有货

级别和纯度: 生物活性 ? 重组 ? ActiBioPure™ ? 高性能 ? EnzymoPure™ ? ≥150 U/mg enzyme powder

Accession #

P00512

生物活性

≥150 U/mg enzyme powder

规格

库存

价格

数量

50U

P1433724-50U

现货

¥699.90

250U

P1433724-250U

现货

¥2,199.90

1KU

P1433724-1KU

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概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器

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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,生物活性,重组,高性能级，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

🌡

储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

📋

质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

📚

文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

Phosphofructokinase from Bacillus stearothermophilus is a key enzyme in sugar metabolism that catalyzes the conversion of fructose-6-phosphate to fructose-1,6-bisphosphate during glycolysis. The enzyme's ability to bind fructose-6-phosphate can be inhibited by phosphoenolpyruvate (PEP), thereby regulating the rate of glycolysis. Phosphofructokinase from Bacillus stearothermophilus can be used for the measurement of fructose-6-phosphate levels.

Preparation and Specification

Appearance: White to pale yellowish amorphous powder, lyophilized

Specific activity: More than 150 U/mg solid

Contaminants:

ATPase: Less than 0.005% (U/U)

NADPHox: Less than 0.010% (U/U)

Properties

Molecular weight: 72 kDa (gel filtration); 35 kDa (SDS-PAGE)

Isoelectric point: pH 5.9

Michaelis constants: D-Fructose-6-phosphate (D-F-6-P): 5.8 mM (at 37℃); ATP: 0.07 mM (at 37℃)

Optimum pH: 9.0 Figure 1

pH stability: 6.0–10.0 (37℃, 1 hr.) Figure 2

Thermal stability: Stable at 55℃ and below (pH8.5, 30min) Figure 3

Activators: Mg²⁺

Applications

This enzyme is useful for enzymatic determination of F-6-P.

Assay

Principle

The assay is based on the decrease in absorbance at 340 nm of NADH in the following reaction:

Unit definition

One unit is defined as the amount of enzyme which converts 1 μmol of fructose-6-phosphate to Fructose-1,6-bisphosphate per minute at 37℃ under the conditions specified in the assay procedure.

Reagents

1. Reaction mixture (10test)

0.1M Tris-HCl Buffer pH9.0	27.36 ml
0.5M Fructose-6-P (Fructose-6-phosphate·2Na) solution	0.30 ml
0.1M ATP (Adenosine triphosphate·2Na·3H₂O) solution	0.39 ml
56mM PEP [Phospho(enol)pyruvic acid tri(cyclohexylammonium) salt] solution	0.60 ml
13.1mM NADH·(2Na·3H₂O·Reduced form) solution	0.60 ml
2.5M KCl solution	0.06 ml
0.1M MgSO₄ solution	0.60 ml
5,000U/ml PK (Pyruvate kinase) /Ammonium sulfate suspension	0.03 ml
550U/ml LDH (Lactate dehydrogenase) /Ammonium sulfate suspension	0.06 ml

2. Enzyme dilution buffer: 50mM KH₂PO₄ – NaOH buffer pH8.0 (25℃)

Enzyme solution

Accurately weigh about 10 mg of the sample and add enzyme dilution buffer to make a total of 10 ml. Dilute it with enzyme dilution buffer to adjust the concentration to 5.0–10.0 U/ml.

Procedure

1. Pipette accurately 3.0 ml of reaction mixture into a small test tube and preincubate at 30℃.

2. After 5 min add accurately 10 μl of enzyme solution and mix to start the reaction at 30℃.

※ In the case of a test blank, add 10 μl of enzyme dilution buffer in place of enzyme solution.

3. After starting the reaction, measure the rate of decrease per minutes in absorbance at 340 nm. The rate must be measured within the linear portion of the absorbance curve. (Ex. Linear range from 2 min to 5 min)

Absorbance

sample : As/min

blank : Ab/min

△A/min=(As/min−Ab/min)≤0.25 Abs/min

Calculation

Activity (U/mg of powder) = {(△ A/min)/6.22} × 3.01/0.01 × 1/x

= △ A/min. × 48.39 ÷ X

6.22: millimolar extinction coefficient of NADPH at 340nm (cm²/μmol)

3.01: final volume (ml)

0.01: volume of enzyme solution (ml)

X: concentration of the sample in enzyme solution (mg/ml)

规格

产品名称

磷酸果糖激酶 (PFK)

别名

果糖6-磷酸激酶来源于嗜热脂肪芽胞杆菌 | 磷酸果糖激酶, 来源于嗜热脂肪芽孢杆菌 | 6-磷酸果糖激酶 | ATP：D-果糖6-磷酸1-磷酸转移酶

英文别名

规格或纯度

生物活性, 重组, ActiBioPure™, 高性能, EnzymoPure™, ≥150 U/mg enzyme powder

生化机理

Catalyzes the phosphorylation of D-fructose 6-phosphate to fructose 1,6-bisphosphate by ATP, the first committing step of glycolysis.

生物活性

≥150 U/mg enzyme powder

种属

嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)

来源

重组表达

预测分子量

72 kDa (gel filtration)

SDS-PAGE

35 kDa

CAS编号和信息

9001-80-3

酶学委员会编号

EC 2.7.1.11

分子类型

酶

产品线

生物产品

储存与运输

物理形态

冻干(Lyophilized)

浓度

≥150 U/mg enzyme powder

复溶

Reconstitute in 50mM KH₂PO₄−NaOH buffer pH8.0 (25℃) to a concentration of 1mg/ml.

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

长期储存-20℃（12个月）；复溶后建议分装，避免反复冻融。

单位定义

One unit is defined as the amount of enzyme which converts 1 μmole of fructose–6–phosphate to Fructose–1,6 – bisphosphate per minute at 37℃ under the conditions specified in the assay procedure.

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

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批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ26F0838833	分析证书	P1433724
ZJ26F0838832	分析证书	P1433724
ZJ26F0838831	分析证书	P1433724

技术文档和文章

p1433724 phosphofructokinase pfk manual.pdf

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浓度

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