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ActiBioPure™,EnzymoPure™,无动物源,无菌,无载体,生物活性 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
本公司生产的蛋白 AG-微球菌核酸酶(pAG-MNase),英文名为 Protein AG-MNase,简称 pAG-MNase,是 Protein A/G 与微球菌核酸酶 MNase (Micrococcal Nuclease)的融合表达产物,同时具有 Protein A/G 的抗体结合活性和 MNase 的核酸内切酶活性,常用于蛋白质-DNA 相互作用研 究的 ChIC (Chromatin Immunocleavage)和 CUT&RUN (Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease)。Protein A 是一种发现于金黄 色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的细胞壁表面蛋白,分子量为 42kDa;Protein G 是 C 型或 G 型链球菌(Streptococcal bacteria)表达的免疫 球蛋白结合蛋白。Protein A 和 Protein G 功能相似,能特异性地与哺乳动物免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)结合,结合的部位通常为免疫球蛋 白的 Fc 区,但有资料显示 Protein A 也会和人 VH3 家族的 Fab 区结合,而 Protein G 有时与 Fab 区也有一定结合。本产品是 Protein A 或 G 与 MNase 的融合表达产物的 1:1 混合物,同时具有 Protein A/G 结合抗体和 MNase 核酸内切酶的双重活性。
来源(Source) :蛋白 A/ G 与金黄色葡萄球菌(MNase)融合蛋白
组分和说明
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产品应用
常用于蛋白质 -DNA 相 互 作 用 研 究 的 ChIC (Chromatin Immunocleavage) 和 CUT&RUN (Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease)。
产品优势
蛋白 AG-微球菌核酸酶同时具备 ProteinG 的抗体结合能力和 MNase 的核酸内切酶活性,特异性结合抗体,广泛的应用领域。
使用说明
染色质片段化
反应体系: 反应缓冲液(10X):50 mM Tris-HCl (pH 7.9),5 mM CaCl₂。(建议添加 100 µg/ml 重组白蛋白(BSA)以提高稳定性。)
操作步骤:
按每 4×10⁶个细胞加入 0.5-1 µl MNase(2000 gel units/µl),在 37℃孵育 15-30 分钟。通过琼脂糖凝胶电泳检测片段化效果,目标片段长度为 150-900 bp。加入适量 0.5 M EDTA(pH 8.0)终止反应。
染色质免疫沉淀(ChIP)
染色质片段化:参考上述染色质片段化步骤。
免疫沉淀:使用蛋白 A-微球菌核酸酶结合抗体,捕获 DNA-蛋白质复合物。
洗脱与纯化:根据具体实验方案进行洗脱和 DNA 纯化。
CUT&RUN 和 CUT&Tag
固定细胞:使用甲醛交联细胞。
抗体结合:加入目标抗体,孵育过夜。
MNase 消化:加入蛋白 A-微球菌核酸酶,37℃孵育 15-30 分钟,释放 DNA。
DNA 纯化与测序:提取 DNA 并进行高通量测序。
保存条件: -20℃保存,≤0℃运输
注意事项:
(1)本品含 50%甘油,-20℃保存不会冻结。须避免-80℃保存,否则会冻结,反复冻融可能会影响酶的活性。
(2)本品较为粘稠,吸取时注意取样量准确,加样后请注意充分吹打混匀,避免产生气泡。
(3)Ca2+是 MNase 的关键催化辅助因子,反应缓冲液含有 1-5mM Ca2+对 MNase 的酶活性是必须的,反应溶液中如有 EDTA、EGTA 等金属离 子螯合剂会影响酶活性。
(4)反应溶液中盐离子浓度须低于 100mM,过高的盐浓度会影响 MNase 的酶活性。
(5)本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
(6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | P752085 |
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