计算溶液所需的质量、体积或浓度。
为什么选择此级别
，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
避光,-20°C储存。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
预期用途
用于抗原、抗体与辣根过氧化物酶的偶联，具有简便、快速的特点。
反应原理
试剂盒中冻干的辣根过氧化物酶经过过碘酸钠活化后，含有大量游离醛基，可以直接与抗原、抗体上的氨基在弱碱性条件（启动剂调节）下反应生成 Schiff 碱，其经过还原剂还原可以形成稳定的化学键。
储存条件及有效期
1. 试剂盒应避免强光照射，在 2~8℃储存有效期 6 个月，-20℃储存有效期 18 个月。
2. 冻干 HRP 瓶开启使用后，2~8℃保存可使用 2 天。
3. 试剂盒其他组分使用后要及时放回到 2~8℃条件，在试剂盒有效期内使用。
待标记物要求
1. 如果使用叠氮钠为防腐剂，则材料必须使用 0.01M PBS（pH7.4）透析。
2. 溶剂中含有尿素、甘氨酸、Tris、硫酸铵等含氨基的蛋白材料在标记前必须使用 0.01M PBS（pH7.4）透析。
3. 待标记物的纯度过低影响标记效率，建议对待标记物做进一步纯化。
4. 待标记物中如有沉淀物，可能会影响标记效率，建议高速离心或过滤去除，并确定未变质后方可使用。
标记方法
A．实验准备：
a) 将试剂盒从冷藏或冷冻环境中取出，放置室温（18~25℃）平衡 20~30 分钟，液体组分放置至完全融化并恢复室温后震荡混匀待用。
b) 推荐使用抗体的浓度为 0.5mg/ml~5.0mg/ml。
c) 若标记抗原，则需要优化选择最佳的标记比例。
B．实验操作：
a) 抗体准备：抗体使用前，需将抗体用 0.01M PBS 7.4 稀释（或浓缩）成附表中的指定浓度；
b) 偶联过程：将抗体加入冻干酶中，再加入对应量的启动剂，充分震荡混匀至冻干酶完全溶解后，室温避光反应 2 小时；
c) 还原剂准备：取 60ul 启动剂，加入 1400ul 的纯化水中，震荡混匀。后取 1ml 该稀释液，加入还原剂中，获得 10mg/ml 的还原剂溶液；
d) 还原过程：立即取用对应量的还原剂溶液加入至反应好的酶标记物溶液中，室温避光反应 2 小时；
e) 终止过程：加入对应量的终止液，混匀，室温避光反应 10 分钟；
f) 保存：加入等体积甘油，混匀后放-20℃储存。
操作程序（以抗体浓度 5mg/ml，标记 0.2mg 为例）：
【注意事项】
1. 操作前仔细阅读使用说明书，请严格按照试剂盒说明书进行试验操作。
2. 避免在恶劣的环境（如含有 84 消毒液、次氯酸钠、酸碱或乙醛等腐蚀性气体及灰尘的环境）条件下进行试验。
3. 还原剂必须现配现用，使用启动剂稀释液溶解后，请立即使用；还原剂使用完成后，立即开盖丢弃。
4. 处理试剂时需戴一次性手套，操作后应彻底洗手。
5. 试剂请在有效期内使用。
附表（以 2mg/瓶 冻干 HRP 为例）：
抗体浓度 （mg/ml） | 加入抗体量 （ml） | 启动剂加入量 （ml） | 还原液加入量 （ml） | 终止液加入量 （ml） | 加入甘油量 （ml） |
0.5 | 4.0 | 0.200 | 0.200 | 0.600 | 5.00 |
1.0 | 2.0 | 0.115 | 0.150 | 0.450 | 2.715 |
2.0 | 1.0 | 0.075 | 0.100 | 0.300 | 1.475 |
3.0 | 0.7 | 0.062 | 0.100 | 0.300 | 1.162 |
4.0 | 0.5 | 0.055 | 0.100 | 0.300 | 0.955 |
5.0 | 0.4 | 0.050 | 0.100 | 0.300 | 0.850 |
备注：根据冻干 HRP 的量，等比增减各组分用量即可。
Intended Use
For the conjugation of antigens and antibodies with horseradish peroxidase (HRP), featuring simplicity and rapidity.
Reaction Principle
The lyophilized horseradish peroxidase in the kit is activated by sodium periodate, resulting in a large number of free aldehyde groups. These aldehyde groups can directly react with amino groups on antigens and antibodies under weakly alkaline conditions (adjusted by the initiator) to form Schiff bases, which can be reduced by a reducing agent to form stable chemical bonds.
Storage Conditions and Shelf Life
1、The kit shall be protected from strong light. It is valid for 6 months when stored at 2–8℃, and 18 months when stored at -20℃.
2、Once opened, the lyophilized HRP vial can be used for 2 days if stored at 2–8℃.
3、Other components of the kit shall be promptly returned to 2–8℃ after use, and must be used within the kit’s shelf life.
Requirements for Analytes to Be Labeled
1、If sodium azide is used as a preservative, the material must be dialyzed against 0.01 M PBS (pH 7.4).
2、Protein materials containing amino groups such as urea, glycine, Tris, and ammonium sulfate in the solvent must be dialyzed against 0.01 M PBS (pH 7.4) prior to labeling.
3、Low purity of the analyte will compromise labeling efficiency; further purification of the analyte is recommended.
4、Precipitates in the analyte may affect labeling efficiency. It is recommended to remove them by high-speed centrifugation or filtration, and use only after confirming no deterioration.
Labeling Protocol
A. Experimental Preparation
a) Remove the kit from refrigerated or frozen storage, equilibrate at room temperature (18–25℃) for 20–30 minutes. Allow liquid components to fully thaw and reach room temperature, then vortex to mix before use.b) The recommended antibody concentration is 0.5 mg/mL–5.0 mg/mL.c) For antigen labeling, optimization of the optimal labeling ratio is required.
B. Experimental Procedure
a) Antibody Preparation: Before use, dilute (or concentrate) the antibody with 0.01 M PBS (pH 7.4) to the specified concentration listed in the appendix.
b) Conjugation: Add the antibody to the lyophilized enzyme, followed by the corresponding volume of initiator. Vortex thoroughly until the lyophilized enzyme is completely dissolved, then incubate at room temperature in the dark for 2 hours.
c) Reductant Preparation: Add 60 μL of initiator to 1400 μL of purified water and vortex to mix. Pipette 1 mL of this diluted solution into the reductant to obtain a 10 mg/mL reductant solution.
d) Reduction: Immediately add the corresponding volume of reductant solution to the reacted enzyme-labeled conjugate, and incubate at room temperature in the dark for 2 hours.
e) Termination: Add the corresponding volume of stop solution, mix well, and incubate at room temperature in the dark for 10 minutes.f) Storage: Add an equal volume of glycerol, mix thoroughly, and store at -20℃.
Operating Procedure (Example: Labeling 0.2 mg of antibody at a concentration of 5 mg/mL)
Precautions
1、Carefully read the instruction manual before operation, and perform the test strictly in accordance with the kit instructions.
2、Avoid conducting tests in harsh environments (such as environments containing corrosive gases and dust like 84 disinfectant, sodium hypochlorite, acid-base, or acetaldehyde).
3、The reducing agent must be prepared freshly for immediate use; dissolve it with the initiator dilution and use promptly. Discard the reducing agent immediately with the cap open after use.
4、Wear disposable gloves when handling reagents, and wash hands thoroughly after operation.
5、Please use the reagents within their validity period.
Appendix (Taking 2 mg/vial lyophilized HRP as an example):
antibody concentration（mg/ml） | Amount of antibody（ml） | Amount of initiator （ml） | Amount of reducing solution（ml） | Amount of stop solution （ml） | Amount of glycerol（ml） |
0.5 | 4.0 | 0.200 | 0.200 | 0.600 | 5.00 |
1.0 | 2.0 | 0.115 | 0.150 | 0.450 | 2.715 |
2.0 | 1.0 | 0.075 | 0.100 | 0.300 | 1.475 |
3.0 | 0.7 | 0.062 | 0.100 | 0.300 | 1.162 |
4.0 | 0.5 | 0.055 | 0.100 | 0.300 | 0.955 |
5.0 | 0.4 | 0.050 | 0.100 | 0.300 | 0.850 |
Note: Based on the amount of lyophilized HRP, the dosage of each component can be increased or decreased proportionally.
规格
英文名称
Rapid Labeling Kit (HRP)
储存与运输
储存条件
避光,-20°C储存
运输条件
超低温运输
组分与储存
A1519981 | 名称 | 小包装 | 大包装 |
A1519981A | 冻干的辣根过氧化物酶（冻干 HRP） | 0.2mg×5 | 1mg×5 |
A1519981B | 启动剂 | 1ml×1 | 1ml×1 |
A1519981C | 还原剂 | 10mg×5 | 10mg×5 |
A1519981D | 终止液 | 0.5ml ×1 | 1ml ×1 |
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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技术文档和文章
溶液计算器
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