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视网膜单细胞制备试剂盒
有货
为什么选择此级别
BioReagent,无菌,用于细胞培养 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
-20°C储存。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
本产品适用于视网膜组织的细胞悬液的分离制备，本产品利用酶温和、快速有效地破坏细胞外基质，释放细胞，从而生成单细胞悬浮液。制备的单细胞悬液可用于单细胞测序、细胞培养或其他细胞相关检测。
组分与储存：
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自备产品：
基础培养基，血清+双抗，PBS，显微剪刀，离心管，培养板，培养皿，100μm 细胞筛网，1ml 吸头，巴氏吸管
准备工作：
1. 完全培养基配制；10ml血清+90ml基础培养基+1ml双抗
2. PBS缓冲液+双抗
3. 无菌剪刀和镊子
实验步骤 (仅参考)：
1. 取出眼球，在75%的酒精中浸泡3-5分钟。
2. 浸泡后眼球，放入培养皿中，分别去除角膜，晶状体等，取下视网膜。
3. 视网膜在无菌的pbs里洗2次。
4. 将视网膜转入无菌的皿或者板子中，加入500μl消化液Ⅰ，用显微剪将组织剪碎。放入37度培养箱中，每10分钟可以吹打一次。30分钟后，取出皿或者板子。
5. 将消化液转入离心管中，加入一定量的pbs，350g离心5分钟。
6. 取上清 (组织块继续保留，第7步需要用）。上清离心，转速1500g 3分钟，离心后弃上清，加入含10%血清的培养基，里面含有我们需要的细胞。
7. 在第6步中的沉淀，加入1ml消化液Ⅱ，使组织重悬。放入37℃培养箱，每10分钟可混匀1次，30分钟后取出。加入1ml终止液。
8. 用100μm或者75μm的细胞筛网，把细胞过滤到板子或者培养皿里。此过程可以用基础培养基多冲洗组织，也可以用细胞悬液反复冲洗。
9. 收集过滤的细胞悬液，合并前面第6步所得细胞，转速1500g 3分钟，弃上清，沉淀即我们需要的视网膜单个细胞。客户可根据自己实验加入对应液体稀释，如果需要培养RPE细胞，可以用含有10%血清的MDEM/F12稀释。
注意事项：
1. 以上所有产品均需要无菌，包括自备产品。
2. 如果需要做培养，所有操作都需要在超静台中完成。
3. 试剂盒在2-8℃下只能保存1个月左右，如果发现有絮状沉淀，建议不要使用，可能已经污染。
This product is suitable for the isolation and preparation of cell suspension from retinal tissue. It uses mild enzymes to rapidly and efficiently break down the extracellular matrix and release cells, so as to generate a single‑cell suspension. The prepared single‑cell suspension can be used for single‑cell sequencing, cell culture or other cell‑related assays.
Contents & Storage:
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Required Self‑supplied Materials:
Basal medium, serum + penicillin‑streptomycin, PBS, micro‑scissors, centrifuge tubes, culture plates, petri dishes, 100 μm cell strainer, 1 mL pipette tips, Pasteur pipettes
Pre‑experiment Preparation:
1. Prepare complete medium: mix 10 mL serum, 90 mL basal medium and 1 mL penicillin‑streptomycin solution.
2. Prepare PBS buffer supplemented with penicillin‑streptomycin.
3. Sterilize scissors and forceps.
Experimental Procedure (For Reference Only):
1. Enucleate the eyeball and soak it in 75 % ethanol for 3‑5 min.
2. Transfer the soaked eyeball to a petri dish. Remove the cornea, lens and other tissues, then dissect out the retina.
3. Wash the retina twice with sterile PBS.
4. Transfer the retina into a sterile dish or plate, add 500 μL Digestion Solution Ⅰ, and mince the tissue thoroughly with micro‑scissors. Place the dish in a 37 °C incubator and triturate once every 10 min. Take it out after 30 min.
5. Transfer the digested mixture into a centrifuge tube, add an appropriate volume of PBS, and centrifuge at 350 × g for 5 min.
6. Collect the supernatant (keep the tissue pellet for Step 7). Centrifuge the supernatant at 1500 × g for 3 min. Discard the supernatant and resuspend the pellet in medium containing 10 % serum, which contains the target cells.
7. Resuspend the pellet obtained in Step 6 with 1 mL Digestion Solution Ⅱ. Incubate at 37 °C, and mix once every 10 min. Remove the sample after 30 min and add 1 mL Stop Solution.
8. Filter the cell suspension through a 100 μm or 75 μm cell strainer into a culture plate or petri dish. Rinse the residual tissue repeatedly with basal medium or the cell suspension during filtration.
9. Collect the filtered cell suspension and combine it with the cell pellet from Step 6. Centrifuge at 1500 × g for 3 min and discard the supernatant. The resulting pellet is the desired retinal single‑cell suspension. Resuspend the pellet with suitable solution according to your experimental requirements. For RPE cell culture, DMEM/F12 medium supplemented with 10 % serum is recommended.
Precautions:
1. All reagents and self‑supplied materials must be sterile.
2. If cell culture will be performed, carry out all operations inside a biosafety cabinet.
3. This kit can only be stored for approximately one month at 2‑8 °C. Discard the kit if flocculent precipitate is observed, as this may indicate microbial contamination.
规格
规格或纯度
BioReagent, 用于细胞培养, 无菌
英文名称
Retina Single-Cell Preparation Kit
储存与运输
储存条件
-20°C储存
运输条件
超低温运输
组分与储存
| 组分货号 | 组分名称 | 物理外观 | 50T | 储存 |
| R1527999A | 消化液Ⅰ | 液体 | 25 ml | -20℃. |
| R1527999B | 消化液Ⅱ | 液体 | 50 ml | -20℃. |
| R1527999C | 终止液 | 液体 | 50 ml | -20℃. |
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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技术文档和文章
溶液计算器
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