TE/LiAc水溶液 (1.1×)

货号: T1524606
有货
级别和纯度: BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 适用于微生物学 ? 适用于微生物学 —— 适合培养和检测微生物。适用于微生物培养基、鉴定和药敏工作。 无菌 ? 无菌级 —— 经处理并验证无活微生物。可直接用于无菌操作和细胞培养,无需再灭菌。
别名
醋酸锂转化液
储存条件
2-8°C储存
运输条件
低温运输
应用
Microbial culture
★
规格
库存
价格
数量
100ml
T1524606-100ml
现货 Stock Image
¥149.90
500ml
T1524606-500ml
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为什么选择此级别

BioReagent,无菌,适用于微生物学 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

2-8°C储存。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

TE/LiAc水溶液 (1.1×) 是一种制作酿酒酵母感受态的buffer。TE起缓冲液的作用,提供稳定的PH值环境;LiAc 可使酵母细胞处于一种短暂的感受状态,此时酵母能够摄取外源 DNA。使用阿拉丁的 TE醋酸锂混合液 (1.1×) 制作酵母感受态细胞,用 pGADT7 质粒检测转化效率可达 10⁴-10⁶ cfu/μg DNA 。

产品组分与配方:

产品组分 分子式/CAS 号 配方(ml/L)       含量 (500ml)    
TE (10×)           C₄H₁₁NO₃/77-86-1 
C₁₀H₁₆N₂O₈/60-00-4
110ml55ml
1 M LiAcLiAc /546-89-4110ml55ml
ddH₂OH₂O/7732-18-5                780ml390ml

使用方法:

一,感受态制作方法

1、酵母菌种在 YPDA 平板上划线,挑新鲜的单菌落到3ml YPDA(用 50ml 离心管)中 30℃,250rpm 摇菌 12h,取 50ul,到 50ml YPDA (用250ml三角瓶)中,250rpm 摇菌到 OD600 约0.15-0.3,不要超过。

2、室温 700g,5min 离心收集菌体,弃上清,用 100ml YPDA 重悬,30℃,250rpm 摇菌到 OD600=0.4-0.5。

3、室温 700g,5min 离心收集菌体,弃上清,用 50ml 无菌 ddH₂O 重悬。

4、室温 700g,5min 离心收集菌体,弃上清,用 15ml 4℃ 预冷的 TE/LiAc Solution (1.1×) 。1500g,30s 离心,弃上清,用 0.6ml TE/liAC(1.1×) 重悬,此时可以用来转化酵母文库;也可以分装10 支感受态用来转化普通酵母质粒 (最好立即使用,也可放冰中保存不超过 3h)。

二,感受态转化方法

酵母转化实验操作对比表(文库质粒 vs 普通质粒)

步骤操作项目酵母文库质粒(大体系)普通酵母质粒(小体系)
1Carrier DNA 变性(共用)95℃水浴/金属浴 3 min → 冰浴 3 min → 重复(95℃ 3 min)→ 冰浴 ≥ 3 min操作完全相同
2离心管规格15 mL 离心管1.5 mL 离心管

目的质粒用量5 – 15 μg0.1 – 2 μg

Carrier DNA 用量40 μL5 μL

酵母感受态细胞600 μL50 – 100 μL

PEG/LiAc 溶液2.5 mL500 μL

30℃ 水浴孵育45 min30 min

孵育期间混匀频率每隔 15 min 翻转混匀 6–8 次每隔 10 min 翻转混匀 6–8 次
3加入无菌 DMSO160 μL20 μL
442℃ 热激处理20 min15 min

热激期间混匀频率每隔 10 min 翻转混匀 6–8 次每隔 7.5 min 翻转混匀 6–8 次
5弃上清,加入 2×YPDA / YPD Plus 重悬3 mL1 mL
6摇菌复苏30℃,200 rpm,1.5 h(共用)条件相同
70.9% NaCl 重悬体积5 – 15 mL(用于涂大板)0.05 – 1 mL(涂小板)

培养条件30℃ 培养 48 – 120 h(共用)条件相同

注意事项:

1、制作不同数量的感受态,按比例使用TE/LiAc 溶液 (1.1×),此种方法制作的酵母感受态不可 -80℃ 保存。

2、不开封的TE/LiAc 溶液 (1.1×)可在 4℃ 保存 2 年,开封后若发现染菌,停止使用。

3、本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途,请勿存放于普通住宅区。 

4、本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

TE/LiAc Aqueous Solution (1.1×) is a buffer for preparing competent cells of Saccharomyces cerevisiae. TE functions as a buffer to maintain a stable pH environment; lithium acetate (LiAc) transiently renders yeast cells competent, enabling the uptake of exogenous DNA. Competent yeast cells prepared using TE/LiAc Solution (1.1×) from Aladdin exhibit a transformation efficiency of 10⁴-10⁶ cfu/μg DNA when assayed with pGADT7 plasmid.  

Product Components and Formulation:

Product Components                                               Molecular Formula / CAS No.                           Formulation (mL/L)                                         Content (500 mL)                                         
10× TEC₄H₁₁NO₃/ 77-86-1
C₁₀H₁₆N₂O₈/ 60-00-4
110 mL55 mL
1 M LiAcLiAc/546-89-4110 mL55 mL
ddH₂OH₂O/7732-18-5780 mL390 mL

Usage Protocol

I. Preparation of Competent Yeast Cells

1. Streak yeast strain on YPDA agar plate, pick a fresh single colony and inoculate into 3 mL YPDA medium in a 50 mL centrifuge tube. Incubate at 30 °C with shaking at 250 rpm for 12h. Transfer 50 μL of the overnight culture into 50 mL YPDA medium in a 250 mL Erlenmeyer flask, shake at 250 rpm until OD600 reaches approximately 0.15–0.3 (do not exceed this range).

2. Harvest cells by centrifugation at 700 g for 5 min at room temperature, discard supernatant, resuspend pellet in 100 mL YPDA medium, and shake at 30°C, 250 rpm until OD600 = 0.4–0.5.

3. Collect cells via centrifugation at 700 g for 5 min at room temperature, remove supernatant, and resuspend pellet in 50 mL sterile ddH₂O.

4. Centrifuge at 700 g for 5 min at room temperature, discard supernatant, and resuspend pellet in 15 mL pre-chilled (4°C) TE/LiAc Solution (1.1×). Centrifuge at 1500 g for 30 s and discard supernatant, then resuspend cells in 0.6 mL TE/LiAc Solution (1.1×).The competent cells can be used directly for yeast library transformation; alternatively, aliquot into 10 portions for routine yeast plasmid transformation. For optimal results, use immediately. If temporary storage is needed, keep on ice for no more than 3h.

II. Transformation Protocol for Competent Yeast Cells

Yeast Transformation Protocol – Library vs. Regular Plasmid (Comparative Table)

StepParameter / OperationLibrary Plasmid (Large Scale)Regular Plasmid (Small Scale)
1Carrier DNA denaturation (common)95 °C water/metal bath 3 min → ice bath 3 min → repeat (95 °C 3 min) → ice bath ≥3 minSame procedure
2Centrifuge tube size15‑mL tube1.5‑mL tube

Plasmid of interest5 – 15 μg0.1 – 2 μg

Carrier DNA40 μL5 μL

Yeast competent cells600 μL50 – 100 μL

PEG/LiAc solution2.5 mL500 μL

Incubation at 30 °C (water bath)45 min30 min

Mixing during incubationInvert 6–8 times every 15 minInvert 6–8 times every 10 min
3Add sterile DMSO160 μL20 μL
4Heat shock at 42 °C20 min15 min

Mixing during heat shockInvert 6–8 times every 10 minInvert 6–8 times every 7.5 min
5Discard supernatant; resuspend in 2×YPDA or YPD Plus3 mL1 mL
6Recovery shaking30 °C, 200 rpm, 1.5 h (common)Same conditions
7Resuspend in 0.9% (w/v) NaCl for plating5 – 15 mL (for large plates)0.05 – 1 mL (for small plates)

Incubation after plating30 °C, 48 – 120 h (common)Same conditions

Precautions

1. When preparing different quantities of competent cells, use 1.1× TE/LiAc Solution proportionally. Yeast competent cells prepared by this method cannot be stored at -80 °C.

2. Unopened 1.1× TE/LiAc Solution can be stored at 4 °C for 2 years. Discontinue use if microbial contamination is observed after opening.

3. This product is for research use only. It shall not be used for medical treatment, clinical diagnosis, food, cosmetics or other related applications. Do not store it in residential areas.

4. Our company shall not be liable for any accidents arising from improper use of this product.

规格

别名
醋酸锂转化液
英文别名
TE/LiAc Buffer | TE-LiAc Solution
规格或纯度
BioReagent, 适用于微生物学, 无菌
稳定性与储存
Store at 2-8℃ long term (24 months).
英文名称
TE/LiAc Aqueous Solution (1.1×)
储存条件
2-8°C储存
运输条件
低温运输
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
生物试剂/缓冲液

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

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✅ 分析证书 (COA)

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📊 产品数据表

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🔬 规格说明书

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ26F0838469 分析证书 T1524606
ZJ26F0838468 分析证书 T1524606
技术文档和文章
溶液计算器

常见问题

本产品如何运输?
本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
什么是「适用于微生物学」?
「适用于微生物学」表示该产品经过加工和检测,适用于提取工作流程和微生物学。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
什么是「适用于微生物学」?
「适用于微生物学」表示该产品经过加工和检测,适用于提取工作流程和微生物学。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
什么是「BioReagent」?
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。