T4 RNA 连接酶 2，截短型

Name: T4 RNA 连接酶 2，截短型
SKU: T750874
Availability: InStock

货号: T750874

COA

有货

级别和纯度: 无动物源 ? 无载体 ? 生物活性 ? 无DNA酶和RNA酶 ? ActiBioPure™ ? EnzymoPure™ ? 无蛋白酶 ? 无菌 ? ≥95%(SDS-PAGE) 200 U/µL

Accession #

P32277.1

表达系统

E. coli

生物活性

200 units is defined as the amount of enzyme required to give 80% ligation of a 31-mer RNA to the pre-adenylated end of a 17-mer DNA (Universal miRNA Cloning Linker) in a total reaction volume of 10 µl in 1 hour at 25℃.

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数量

5KU

T750874-5KU

现货

¥867.90

4×5KU

T750874-4×5KU

现货

¥2,639.90

20×5KU

T750874-20×5KU

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概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器常见问题

🧪

为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,无DNA酶和RNA酶,无动物源,无菌,无蛋白酶,无载体,生物活性级提供 ≥95%(SDS-PAGE) 纯度，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

🌡

储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

📋

质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

📚

文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

本公司生产的T4RNA连接酶2截短型(T4Rnl2,truncated或Rnl2(1-249))，该酶仅包含T4RNA连接酶2N端249个氨基酸，可特异性地将5'端预腺苷酰化的DNA或RNA(App-DNA或App-RNA)连接到RNA的3'羟基。T4RNALigase2,truncated与T4RNALigase2的酶活性完全不同，后者是一种ATP依赖的dsRNAligase，而前者是一种不依赖于ATP的，依赖于5'端预腺苷酰化的单链核酸连接酶。T4RNALigase2,truncated常用于microRNA(miRNA)等3'端为羟基的单链RNA在克隆、高通量测序建库或PCR检测等时，在3'羟基端添加5'端预腺苷酰化的DNA或RNA接头。T4RNALigase2,truncated只能利用5'端预腺苷酰化的单链DNA或RNA作为3'端接头，因此可以大大降低连接反应的背景，通常是小RNA等建库时的优先选择。T4RNALigase2,truncated连接时不需要ATP，但需要5'端预腺苷酰化(也称预腺苷化、腺苷酰化或腺苷化)底物。即使在有ATP存在的情况下，T4RNALigase2,truncated也不能催化连接单链DNA或RNA5'-P末端与3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。而T4RNALigase1可以在ATP存在的情况下，催化连接单链DNA或RNA5'-P末端与3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。因此T4RNALigase2,truncated特别适用于smallRNAlibrary的制备，不管是进行miRNA的测序还是进行directionalmRNA-Seq，该酶都可以提高建库的质量，并有效降低连接反应的背景。

纯度（Purity）：无 DNA 内切酶和外切酶活性，无 RNA 酶活性，无蛋白酶活性。
组分和说明

T750874	Component	5KU	4*5KU	20*5KU	Storage
T750874A	T4 RNA Ligase 2, truncated (200U/µl)	25µl	4*25µl	20*25µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
T750874B	10X T4 Rnl2, truncated Buffer	75µl	4*75µl	20*75µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
T750874C	PEG8000 (50%, RNase free)	400µl	4*400µl	20*400µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

产品应用

5'末端预腺苷酰化的单链 DNA 或者 RNA 与单链 RNA 的 3'羟基末端连接；cDNA 文库构建中连接 5'末端预腺苷酰化单链寡核苷酸和小 RNA；链特异性的 cDNA 文库(strand-specific cDNA library)构建中连接 5'末端预腺苷酰化单链寡核苷酸和 RNA；二代测序中，miRNA 文库构建中 RNA 的 3'末端与接头之间的连接；cDNA 文库的构建以进行小 RNA 转录组分析(small-RNA transcriptome analysis)。

产品优势

T4 RNA Ligase 2, truncated 常用于 microRNA (miRNA)等 3'端为羟基的单链 RNA 在克隆、高通量测序建库或 PCR 检测等时，在 3'羟基端添加 5' 端预腺苷酰化的 DNA 或 RNA 接头。

使用说明

1.用于连接 5'端腺苷酰化并且 3'端不是羟基的(例如为氨基)单链 DNA (AppDNA-NH2)和 3'端为羟基的单链 RNA (ssRNA)的使用说明具体如下。需要提前准备好待连接的样品，以及 Universal miRNA Cloning Linker 或自备的适当接头。

2.参考下表在冰浴中配制如下反应体系：

Reagent	Volume	Final Concentration
ssRNA	xµl	0.5 or 1µM
DEPC-treated Water	(4-x-y)µl	-
Universal miRNA Cloning Linker	yµl	1 or 0.5, or 2 or 1µM
PEG8000 (50%, RNase Free)	12µl	0.3
10X T4 Rnl2, truncated Buffer	2µl	1 X
RNase Inhibitor (40U/μl)	1µl	2U/μl
T4 RNA Ligase2, truncated (200U/µl)	1µl	10U/µl
Total Volume	20µl	-

注意：

a.由于涉及 RNA 操作，需要严格按照 RNA 操作的规范进行，避免 RNase 污染，相关试剂和耗材需要经过 DEPC 处理去除 RNase 或者确保是 RNase free 的。推荐在连接体系中添加 RNase Inhibitor，以避免 ssRNA 或其连接产物的降解，尽管经测试我们发现在严格操作的情况下，不加 RNase Inhibitor 也不会导致 ssRNA 或其连接产物发生明显降解。

b.进行连接反应时，如果样品 RNA 比较珍贵，希望充分被连接，可以按照接头和样品 RNA 的摩尔比为 2:1 的比例进行连接；如果样品 RNA 比较充裕，同时感觉接头的成本偏高时，可以按照接头和样品 RNA 的摩尔比摩尔比 1:1 甚至 1:2 的比例进行连接反应，这样可以很好地节省接头。ssRNA 的用量可以根据实际的样品量进行适当调节，相应的接头的用量也按照比例进行适当调整即可。

c.如果同时进行多个连接反应，可以把上表中除 ssRNA 之外的所有溶液和酶提前预混合，然后再分装到各反应管内。

3.连接反应：25℃, 孵育 60min。为了使连接反应更加充分，可以适当延长连接反应时间。

4. 终止反应：65℃，孵育 20min。

保存条件： -20℃保存，≤0℃运输

注意事项：

（1）本产品提供的试剂均用不含 DNA 酶和 RNA 酶的水配制，可直接用于 3'端为羟基的单链 RNA 和 5'端腺苷酰化的 DNA 或 RNA 之间的连接反应。

（2）可根据具体应用选择合适的操作方法，可能需准备额外的试剂，如 RNase inhibitor、DEPC 水等。

（3）使用本产品连接 ssRNA 和 AppDNA 时，建议使用的 PEG8000 的浓度为 10%-30%，适当提高 PEG8000 的浓度，会显著提高 T4 Rnl2, truncated 的催化的连接效率，而不改变其反应特性。

（4）本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

（5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

规格

产品名称

T4 RNA 连接酶 2，截短型

别名

T4 RNA 连接酶 2，截短型 | 截短型T4RNA连接酶2 | RNA连接酶2

英文别名

T4 Rnl2, truncated | Rnl2 (1-249） | RNA ligase 2 | rnlB

规格或纯度

生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, 无动物源, 无载体, 无菌, 无DNA酶和RNA酶, 无蛋白酶, ≥95%(SDS-PAGE), 200 U/µL

生物活性

表达系统

E. coli

种属

肠杆菌噬菌体T4(Enterobacteria phage T4)

氨基酸

1-249 aa

无载体

Yes

无动物源

Yes

来源

重组表达

分子类型

酶

产品线

生物产品

储存与运输

物理形态

液体

储存缓冲液

10 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 0.1 mM DTT, 50% (v/v)Glycerol, pH 7.5

浓度

200 U/µL

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

长期储存-20℃（24个月）；避免反复冻融。

单位定义

200 units is defined as the amount of enzyme required to give 80% ligation of a 31-mer RNA to the pre-adenylated end of a 17-mer DNA in a total reaction volume of 10 μl in 1 hour at 25℃.

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA，每批产品都进行了严格的验证，您可放心使用！

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批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ25F0723645	分析证书	T750874
ZJ25F0723644	分析证书	T750874

技术文档和文章

t750874_t4 rna 连接酶 2 截短型产品说明书.pdf

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溶液计算器

摩尔浓度计算器

计算溶液所需的质量、体积或浓度。

质量

浓度

体积

分子量

g/mol

稀释计算器

计算配制储备溶液所需的稀释度。

浓度1（C1）

体积 1 (V1)

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体积 2 (V2)

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体积（添加到小瓶中）

质量（小瓶）

所需的复溶浓度

常见问题

本产品如何运输？

本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。

本产品的纯度是多少？如何测定？

本产品的纯度为 ≥95%，采用SDS-PAGE测定。批次的具体数值以分析证书（COA）为准。

什么是「无动物源」？

「无动物源」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。

什么是「无载体」？

「无载体」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。

本产品应如何储存？

请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。

如何获取批次专用COA？

每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。

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