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Vero无血清培养基 (含酚红, 不含谷氨酰胺)
有货
为什么选择此级别
BioReagent,无菌过滤,用于细胞培养 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
2-8°C储存,避免反复冻融。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
Vero无血清培养基，不含蛋白及任何动物来源的成分，专门为Vero细胞系开发，可用于Vero细胞贴壁静态培养以及微载体悬浮规模化培养，支持细胞高密度生长及活率维持，可用于流感疫苗等相关产品的研发和生产过程。
应用范围
Vero无血清培养基可应用于Vero 细胞的复苏、传代、贴壁静态培养以及微载体悬浮规模化培养。该基础培养基适用于科研和基于细胞培养的大规模生物制品的生产，但不可直接用于人体或作为药物使用。
细胞复苏
1. 37℃水浴中预热Vero无血清培养基;
2.使用75% 酒精喷洒培养基瓶，并置于生物安全柜；
3.复苏1 支细胞，并在37℃ 水浴中，轻轻晃动冻存管，解冻1 分钟；
4.将冻存管中的细胞轻轻移到含有10mL已预热Vero无血清培养基的离心管中；
5. 150g-300g（约800rpm ~ 1000rpm）离心5 分钟，丢弃上清液并将细胞重悬于10mL 新鲜预热的培养基中，调节活细胞密度至2-4×10⁴ cells/mL mL；
6.取0.5mL 细胞悬液，用细胞计数仪分析活细胞密度（×10⁶ cells /mL）和细胞活率（%）。
7.如果细胞活率 > 90%，将细胞置于规定的环境条件下进行细胞培养。
细胞传代
以T75培养瓶为例：
1.将Vero无血清培养基放入37℃ 条件下预热20-30 min；
2.取细胞活率 ≥ 90% 、处于对数生长期中期的细胞进行传代；
3.取待传代细胞，倒去培养基，用7 ~ 10mL DPBS 润洗一遍，弃掉，重复一次；
4.加入1mL 重组胰蛋白酶消化液，浸润所有培养表面，置室温消化3 ~ 5 分钟；
5.待细胞从瓶壁脱落，拍打瓶壁，加入已预热好的混合液（含有1mL 0.5% 胰蛋白酶抑制剂和9mL Vero无血清培养基，共10mL）吹打分散细胞，收集细胞，将细胞悬液室温300g 离心5-10分钟；
6.弃上清，将细胞沉淀用Vero无血清培养基重悬；
7.根据2-4×10⁴ cells/cm²的接种密度和传代体积，计算所需种子液量；
8.无菌转移所需量的种子液，添加至含所需体积的已预热Vero无血清培养基的T75瓶中；
9.每3 -5 天传代一次。
细胞适应
1.对于可以直接适应的细胞，可以从无血清培养基中直接接种到Vero无血清培养基中，接种密度参考传代步骤，并需要依据具体情况而定。
2.继续传代细胞，直到细胞稳定生长。
3.推荐细胞传代接种密度2-4×10⁴ cells/cm² ，每4-6 天传代一次，一般3 次传代细胞可完全适应。
细胞冻存
1.准备处于对数生长中期的、细胞活率 > 90% 、状态较好的细胞。
2.测定活细胞密度，计算所需的冻存培养基体积，最终活细胞密度 > 1×10⁷ cells/mL 。
3.准备所需的冻存培养基：90% Vero无血清培养基+10%DMSO，4℃ 冷藏保存。
4.按照细胞消化程序制备细胞悬液。
5. 300g离心5 分钟，弃去上清，用冻存培养基重新悬浮细胞。
6.根据项目具体需要，将悬浮液进行等分保存于适宜规格的冻存管中。
7.按照标准程序，对冻存管进行自动或手工操作降温（每分钟降1℃）。
8.将细胞转移到液氮罐中保存。
Vero Serum-Free Medium is a serum‑free basal medium that contains no proteins or any animal‑derived components. It is specifically developed for the Vero cell line and can be used for adherent static culture as well as microcarrier‑based suspension large‑scale culture of Vero cells. It supports high‑density cell growth and maintains high cell viability, and is suitable for the research, development and production of influenza vaccines and related products.
Applications
Vero Serum-Free Medium can be used for the recovery, subculture, adherent static culture, and microcarrier‑based suspension large‑scale culture of Vero cells. This basal medium is intended for research use and for cell‑culture‑based large‑scale production of biological products, but it is not for direct use in humans or as a drug.
Cell Recovery
1.Pre‑warm Vero Serum-Free Medium in a 37 °C water bath.
2.Spray the medium bottle with 75% alcohol and place it in a biological safety cabinet.
3.Thaw one vial of cells by gently shaking it in a 37 °C water bath for 1 minute.
4.Gently transfer the cells from the cryovial into a centrifuge tube containing 10 mL of pre‑warmed Vero Serum-Free Medium.
5.Centrifuge at 150–300 g (approximately 800–1000 rpm) for 5 minutes. Discard the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 mL of fresh pre‑warmed medium. Adjust the viable cell density to 2–4 × 10⁴ cells/mL.
6.Take 0.5 mL of the cell suspension and measure the viable cell density (×10⁶ cells/mL) and cell viability (%) using a cell counter.
7.If cell viability is > 90%, place the cells under the specified culture conditions for further culture.
Cell Subculture
(Using a T75 flask as an example)
1.Pre‑warm Vero Serum-Free Medium at 37 °C for 20–30 minutes.
2.Use cells in the mid‑logarithmic growth phase with a viability ≥ 90% for subculture.
3.Remove the medium from the flask to be subcultured, rinse the cell layer once with 7–10 mL of DPBS, discard the wash, and repeat once more.
4.Add 1 mL of recombinant trypsin digestion solution to cover the entire growth surface and incubate at room temperature for 3–5 minutes.
5.When the cells detach from the flask wall, tap the flask gently, then add the pre‑warmed mixture (1 mL of 0.5% trypsin inhibitor + 9 mL of Vero Serum-Free Medium, total 10 mL) to pipette and disperse the cells. Collect the cell suspension and centrifuge at 300 g for 5–10 minutes at room temperature.
6.Discard the supernatant and resuspend the cell pellet in Vero Serum-Free Medium.
7.Calculate the volume of seed cell suspension needed based on a seeding density of 2–4 × 10⁴ cells/cm² and the subculture volume.
8.Aseptically transfer the required volume of seed suspension into a T75 flask containing the required volume of pre‑warmed Vero Serum-Free Medium.
9.Subculture every 3–5 days.
Cell Adaptation
1.For cells that can be directly adapted, they may be inoculated directly from serum‑containing medium into Vero Serum-Free Medium. The seeding density should follow the subculture procedure, but may need to be adjusted according to the specific situation.
2.Continue subculturing the cells until they grow stably.
3.A recommended seeding density for subculture is 2–4 × 10⁴ cells/cm², with subculture every 4–6 days. Typically, cells become fully adapted after 3 passages.
Cell Cryopreservation
1.Prepare cells in the mid‑logarithmic growth phase with viability > 90% and in good condition.
2.Determine the viable cell density and calculate the required volume of cryopreservation medium so that the final viable cell density is > 1 × 10⁷ cells/mL.
3.Prepare the required cryopreservation medium: 90% Vero Serum-Free Medium + 10% DMSO, and store at 4 °C.
4.Prepare a single‑cell suspension following the cell digestion procedure.
5.Centrifuge at 300 g for 5 minutes, discard the supernatant, and resuspend the cells in the cryopreservation medium.
6.Aliquot the suspension into suitable cryovials according to project requirements.
7.Cool the cryovials using a standard controlled‑rate freezing protocol (automatic or manual, at approximately 1 °C per minute).
8.Transfer the cryovials to liquid nitrogen for long‑term storage.
规格
规格或纯度
无菌过滤, BioReagent, 用于细胞培养, 内毒素 ＜3 EU/mL; 渗透压 270-320 mOsm/kg
英文名称
Vero Serum-Free Medium (with phenol red, without glutamine)
储存条件
2-8°C储存,避免反复冻融
运输条件
低温运输
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
生物试剂/缓冲液
技术文档
高级数据
产品属性
| pH | 7.1-7.5 |
|---|
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ26F1039639 |
分析证书 | V1525347 |
技术文档和文章
细胞培养中的培养基和补充剂
目录： 技术文章
用于细胞培养
目录： 阿拉丁试剂的规格、级别和纯度
溶液计算器
常见问题
本产品应如何储存？
请于2–8 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。
本产品如何运输？
本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。
什么是「无菌过滤」？
「无菌过滤」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。
如何获取批次专用COA？
每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。
什么是「无菌过滤」？
「无菌过滤」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。
什么是「BioReagent」？
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测，适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性，以及在相关情况下的生物活性验证。
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