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高斯萤光素酶报告基因检测试剂盒（闪光型）
有货
为什么选择此级别
BioReagent,用于化学发光 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
避光,-20°C储存。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
Gaussia萤光素酶报告基因检测试剂盒（闪光型）提供一种高灵敏度的检测系统。高斯荧光素酶（Gaussia Luciferase，185 AA，19.9 kDa）是一种分泌型萤光素酶，Gaussia Luciferase质粒转染细胞后，大部分 Gaussia Luciferase 可以分泌到细胞外，所以本试剂盒既可以用于细胞培养上清样品的检测，也可以用于细胞裂解样品或纯化的酶的检测，特别适用于酶活性的实时研究。
Gaussia Luciferase 产生的生物发光信号原理是腔肠素（Coelenterazine）的氧化反应， 该反应不需要ATP或其他辅助因子。
反应原理如下：
组分表
| G1375704 | Component | 100T | 1000T | Storage |
| G1375704A | Gaussia Flash Assay Buffer | 5 mL | 50 mL | -20℃. Store in the dark. |
| G1375704B | Gaussia Flash Assay Substrate (100×) | 50 μL | 500 μL | -20℃. Store in the dark. |
| G1375704C | Cell Lysis Buffer (5×) | 5 mL | 50 mL | -20℃. Store in the dark. |
使用说明：
一、自备材料
PBS；多道排枪；白色或黑色不透光细胞培养板；化学发光仪或带发光检测功能的酶标仪。
二、检测前准备
1、预先将Gaussia Flash Assay Buffer 放置于室温融化。
2、取出 Gaussia Flash Assay Substrate (100×)，每次开盖前需进行短暂涡旋、低速离心。
3、Working Solution 的配制：按照检测每个样品需要50μL Working Solution的量，根据实际使用量，以100:1的比例将适量的Gaussia Flash Assay Buffer 与 Gaussia Flash Assay Substrate (100×) 混匀，平衡至室温，避光备用。例如：如果需要5mL Working Solution，则需要在5mL Gaussia Glow-Bright Assay Buffer 中加入50μL Gaussia Flash Assay Substrate。
注：
① 建议现配现用，剩余Working Solution在当次实验结束后直接舍弃，不要留存。
② 为得到最佳检测结果，Working Solution配制后在1小时内进行检测。
三、检测方法
1、细胞上清样品的检测
(1) 细胞上清样品的准备：根据具体情况，收集转染含Gaussia质粒的细胞上清，平衡至室温。将样品加入到不透光培养板中用于检测，如果不能立即检测，可以将收集好的细胞上清放于-20℃保存，至少可保存一个月。
(2) 取恢复至室温的5~20μL细胞上清样品加入96孔白板或黑板。
注：
① 对于同一批样品检测，检测样品体积需统一，这样的检测数据具有更好的可比性，因为样品体积对于最终的化学发光值会产生影响。
② 优先推荐使用20μL样品，样品体积大化学发光信号更高。
③ 使用白色或黑色不透光的细胞培养板，减少孔间的信号干扰。
(3) 使用多道排枪向每个细胞孔中加入 50μL Working Solution。
(4) 立即检测。
2、细胞裂解样品的检测
(1) 细胞裂解样品的准备：
① 1×Cell Lysis Buffer 配制：每次使用前以 1: 4 比例将 Cell Lysis Buffer(5×) 与 ddH2O 充分混合，置于冰上备用。配制体积根据实验需求，建议现配现用。
② 去除细胞培养液，加入PBS清洗细胞，去除PBS后按照下表推荐加入适量的 1× Cell Lysis Buffer，室温下静置或振动摇晃裂解15min，吹打并收集全部细胞裂解产物用于后续检测。在光学显微镜下检查细胞是否完全溶解，如果溶解不完全，继续裂解15分钟。如果不能立即检测，可以将裂解液样品放于-20℃保存，至少可保存一个月。
| Cell Culture Plate | 6-well | 12-well | 24-well | 48-well | 96-well |
| 1×Cell Lysis Buffer | 500μL | 200μL | 100μL | 50μL | 20μL |
(2) 取恢复至室温的5~20μL细胞裂解样品加入96孔白板或黑板。
注：
① 对于同一批样品检测，检测样品体积需统一，这样的检测数据具有更好的可比性， 因为样品体积对于最终的化学发光值会产生影响。
② 优先推荐使用20μL样品，样品体积大化学发光信号更高。
③ 使用白色或黑色不透光的细胞培养板，减少孔间的信号干扰。
(3) 使用多道排枪向每个细胞孔中加入 50μL Working Solution。
(4) 立即检测。
注意事项：
1、检测仪器选择：能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测，但是针对相同的样品，不同检测器本底信号值和测量值均可能不同；且对于同一样本检测，不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰，推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。
2、由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，所以应确保同组内不同样本检测条件一致。
3、酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将Working Solution以及细胞培养板平 衡至室温。
4、Gaussia萤光素酶报告基因检测试剂盒（闪光型）具有高发光信号特点，发光强度最大可达 100万以上。但当酶表达量过低时，发光信号会降低。建议根据实际情况优化实验设计方案 （如增加质粒转染量），避免萤光素酶表达量过低。
5、Gaussia Flash Assay Substrate (100×) 配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于包装规格的情况，此时用无水乙醇把体积补足至 包装规格，并混匀后即可使用。
规格
别名
高斯萤光素酶报告基因检测试剂盒 (闪光型) | 荧光素酶报告基因
英文别名
Gaussia Luciferase Assay Kit | Gaussia Luciferase Flash Assay Kit
规格或纯度
BioReagent, 用于化学发光
英文名称
Gaussia Luciferase Reporter Gene Assay Kit (Flash)
应用
报告基因检测, 生物发光
敏感性
Light sensitive
储存与运输
储存条件
避光,-20°C储存
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
-20℃储存（12个月），避光。
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ25F0927012 |
分析证书 | G1375704 |
技术文档和文章
溶液计算器
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