计算溶液所需的质量、体积或浓度。
EnzymoPure™,冻干粉,生物活性,重组 级 提供 ≥90%(SDS-PAGE) 纯度,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
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在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 5 篇同行评审文献引用。
胆固醇酯酶是一种催化胆固醇酯水解为游离胆固醇和脂肪酸的酶,可加速肠道胆固醇吸收。可用于与胆固醇氧化酶 (Cholesterol oxidase) 联合测定胆固醇含量。
酶学性质
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用途
用于高、低密度脂蛋白胆固醇试剂的研发和大量配制。
活性测定方法
原理

反应生成的醌亚胺(Quinoneimine dye)的量可用分光光度计在 505 nm 检测。
酶活定义
单位酶活定义为在下述条件下,每分钟催化生成 1 μmol H₂O₂所需的酶量。
试剂准备:
试剂 I:在 800ml 去离子水中,加入 14g 的磷酸二氢钾,用 KOH 溶液粗调至 pH=7.0,加 入 0.961g 的 4 氨基安替吡啉,15KU 的过氧化物酶,30KU 的胆固醇氧化酶,1g 的叠氮钠。 用 KOH 严格调节 pH=7.0(25℃),然后将溶液定容至 1000ml。
试剂 II:在 800 ml 去离子水中,加入 14g 的 磷酸二氢钾,搅拌溶解,用 KOH 溶液粗调溶液粗 pH=7.0,加入 6g 的苯酚、2g 的叠氮钠搅拌溶解,用KOH溶液调pH值到7.0(25 ℃), 然后将溶液定容至 1 升。
试剂 III:在 80ml 去离子水中,加入 1g 的 Triton X-100,水浴加热到 70℃。量 39mg 的胆固醇亚油酸酯至 10ml 小烧杯,加入 2ml 异丙醇溶解后,缓缓加入到水浴的溶液中,用 水浴的 Triton X-100 溶液洗小烧杯 2-3 次。 70℃水浴下搅拌溶液,3-5 分钟后溶液变清, 停止水浴加热,温度降到 60℃后加入 0.6g 的 胆酸钠,完全溶解后降到室温后定容至 100ml。
酶稀释液:在 800ml 去离子水中,加入 2.72g 的磷酸二氢钾,NaOH 粗调 pH=7.5,加入 0.19g 的氯化镁,0.186g 的 EDTA·2Na,2g 的牛血清白蛋白,1g 的叠氮钠。用 KOH 严格调节 pH=7.0(25℃),然后将溶液体积定容至 1000ml。
待测样品的配制:检测前用卧氏称量管称量所需酶,酶称量时,应至少称量 10mg 的酶,以保证称量的准确性。用酶稀释液溶解,定容到配制体积。
操作步骤
按比例依次加入以下试剂:0.3ml 的试剂 I, 0.45ml 试剂 II,0.45ml 试剂 III,37℃预热 180 秒后加入 0.04ml 的酶液,混合均匀,反应 2 分钟后,在 505nm 测定反应 1 分钟内吸光度的变化率。此法酶的线性为 100-300 U/L。
活力计算

Vt:反应液总体积(ml)
Vs:待测酶液的体积(ml)
ε:摩尔吸光系数 13.78(cm²/micromole)
d:比色皿光径(cm)
D:稀释倍数
0.5:1 摩尔 H₂O₂ 产生 0.5 摩尔的醌染料
△A/min:△A/min(待检样品)-△A/min(空白)
Cholesterol esterase is an enzyme that catalyzes the hydrolysis of cholesterol esters into free cholesterol and fatty acids, facilitating the absorption of cholesterol in the intestine. Cholesterol esterase commune can be used in combination with cholesterol oxidase to measure cholesterol content.
Enzymatic Properties
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附件 Figure 1-Figure 4 放这里
Applications
Activity Assay Method
Principle

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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | C1523690 | |
| 分析证书 | C1523690 |
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