胆固醇酯酶 (CHE)

CAS: 9026-00-0 货号: C1523690 EC号: 232-808-6
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级别和纯度: 生物活性 ? 生物活性级(Bioactive)—— 经验证在功能检测中保持生物活性。当分子须具有功能活性而不仅是纯度时使用。 重组 ? 重组(Recombinant)—— 通过重组表达生产,序列确定、批次稳定。适用于来源明确、无动物源的可重现蛋白。 EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 冻干粉 ? 冻干粉 —— 温和冷冻干燥以保持活性、便于储存。适用于使用前复溶的敏感生物制品。 ≥90%(SDS-PAGE) ≥30 U/mg enzyme powder
生物活性
≥30 U/mg enzyme powder
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2KU
C1523690-2KU
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为什么选择此级别

EnzymoPure™,冻干粉,生物活性,重组 级 提供 ≥90%(SDS-PAGE) 纯度,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 5 篇同行评审文献引用。

概述

胆固醇酯酶是一种催化胆固醇酯水解为游离胆固醇和脂肪酸的酶,可加速肠道胆固醇吸收。可用于与胆固醇氧化酶 (Cholesterol oxidase) 联合测定胆固醇含量。

酶学性质

来源微生物-
分类EC 3.1.1.13-
分子量52 kDa-
等电点5.5-
Km值1.9×10⁻⁵ M(Cholesterol linoleate)-
抑制剂不受叠氮钠抑制-
最适pH5.0 ~ 8.5图1
最适温度45°C图2
pH稳定性4.0 - 9.0图3
热稳定性50°C以下稳定图4

用途

用于高、低密度脂蛋白胆固醇试剂的研发和大量配制。

活性测定方法 

原理

反应生成的醌亚胺(Quinoneimine dye)的量可用分光光度计在 505 nm 检测。 

酶活定义

单位酶活定义为在下述条件下,每分钟催化生成 1 μmol H₂O₂所需的酶量。 

试剂准备:

试剂 I:在 800ml 去离子水中,加入 14g 的磷酸二氢钾,用 KOH 溶液粗调至 pH=7.0,加 入 0.961g 的 4 氨基安替吡啉,15KU 的过氧化物酶,30KU 的胆固醇氧化酶,1g 的叠氮钠。 用 KOH 严格调节 pH=7.0(25℃),然后将溶液定容至 1000ml。 

试剂 II:在 800 ml 去离子水中,加入 14g 的 磷酸二氢钾,搅拌溶解,用 KOH 溶液粗调溶液粗 pH=7.0,加入 6g 的苯酚、2g 的叠氮钠搅拌溶解,用KOH溶液调pH值到7.0(25 ℃), 然后将溶液定容至 1 升。 

试剂 III:在 80ml 去离子水中,加入 1g 的 Triton X-100,水浴加热到 70℃。量 39mg 的胆固醇亚油酸酯至 10ml 小烧杯,加入 2ml 异丙醇溶解后,缓缓加入到水浴的溶液中,用 水浴的 Triton X-100 溶液洗小烧杯 2-3 次。 70℃水浴下搅拌溶液,3-5 分钟后溶液变清, 停止水浴加热,温度降到 60℃后加入 0.6g 的 胆酸钠,完全溶解后降到室温后定容至 100ml。 

酶稀释液:在 800ml 去离子水中,加入 2.72g 的磷酸二氢钾,NaOH 粗调 pH=7.5,加入 0.19g 的氯化镁,0.186g 的 EDTA·2Na,2g 的牛血清白蛋白,1g 的叠氮钠。用 KOH 严格调节 pH=7.0(25℃),然后将溶液体积定容至 1000ml。 

待测样品的配制:检测前用卧氏称量管称量所需酶,酶称量时,应至少称量 10mg 的酶,以保证称量的准确性。用酶稀释液溶解,定容到配制体积。 

操作步骤 

按比例依次加入以下试剂:0.3ml 的试剂 I, 0.45ml 试剂 II,0.45ml 试剂 III,37℃预热 180 秒后加入 0.04ml 的酶液,混合均匀,反应 2 分钟后,在 505nm 测定反应 1 分钟内吸光度的变化率。此法酶的线性为 100-300 U/L。

活力计算

Vt:反应液总体积(ml) 

Vs:待测酶液的体积(ml) 

ε:摩尔吸光系数 13.78(cm²/micromole) 

d:比色皿光径(cm) 

D:稀释倍数 

0.5:1 摩尔 H₂O₂ 产生 0.5 摩尔的醌染料 

△A/min:△A/min(待检样品)-△A/min(空白)

Cholesterol esterase is an enzyme that catalyzes the hydrolysis of cholesterol esters into free cholesterol and fatty acids, facilitating the absorption of cholesterol in the intestine. Cholesterol esterase commune can be used in combination with cholesterol oxidase to measure cholesterol content​.


Enzymatic Properties 

SourceMicroorganism-
EC NumberEC 3.1.1.13-
Molecular Weight52 kDa-
pI5.5-
Km Value1.9×10⁻⁵ M (Cholesterol linoleate)-
InhibitorsNot inhibited by sodium azide-
Optimal pH5.0 ~ 8.5Figure 1
Optimal Temperature45°CFigure 2
pH Stability4.0 - 9.0Figure 3
Thermal StabilityStable below 50°CFigure 4

附件 Figure 1-Figure 4 放这里


Applications

Used for research and bulk formulation of high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) and low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) detection reagents.


Activity Assay Method

Principle


规格

产品名称
胆固醇酯酶 (CHE)
规格或纯度
生物活性, 重组, EnzymoPure™, 冻干粉, ≥90%(SDS-PAGE), ≥30 U/mg enzyme powder
生物活性
≥30 U/mg enzyme powder
预测分子量
52 kDa
CAS编号和信息
9026-00-0
酶学委员会编号
EC 3.1.1.13
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
物理形态
冻干(Lyophilized)
浓度
≥30 U/mg enzyme powder
复溶
Reconstitute in pure water.
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
长期储存-20℃(18个月);复溶后建议分装,避免反复冻融。
单位定义
在下述条件下,每分钟催化生 成 1 μmol H₂O₂所需的酶量。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

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📊 产品数据表

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🔬 规格说明书

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ26F1040082 分析证书 C1523690
ZJ26F1040081 分析证书 C1523690
技术文档和文章
此产品的引用文献
溶液计算器

常见问题

什么是「生物活性」?
「生物活性」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
什么是「生物活性」?
「生物活性」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
什么是「重组」?
「重组」是一个明确定义的分析纯度级别,适用于需要特定验证属性的工作流程。它规定了最低含量百分比、对常见杂质(水分、重金属、灼烧残渣)的受控限值,以及批间一致性。「重组」是几个纯度级别之一——请根据方法的灵敏度和监管要求进行选择。
本产品的纯度是多少?如何测定?
本产品的纯度为 ≥90%,采用SDS-PAGE测定。批次的具体数值以分析证书(COA)为准。
本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。
本产品如何运输?
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
本产品的 CAS 号、分子式和分子量是多少?
本产品的 CAS 号为 9026-00-0。
如何获取批次专用COA?
每个订单都会随附分析证书(COA),您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA,请联系您的客户代表,或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。