掌握用染色法测定种子生活力的原理和方法

操作方法

酸性靛兰染色检测种子活力实验

原理

活种子胚细胞的原生质膜具有半透性，具有选择吸收外界物质的能力，一般染料不能进入活细胞内，胚部不能被染色。而丧失生命力的种子，其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，染料可以自由进入细胞内而将死胚染色（如酸性靛兰 、红墨水等），故可根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。

材料与仪器

大麦 大豆
酸性靛兰水溶液
培养皿 刀片 镊子 烧杯

步骤

一、材料、设备及试剂

1. 材料：大麦、大豆等作物新种子和贮存三年以上的陈种子。

2. 设备：培养皿，刀片，镊子，烧杯。

3. 试剂：0.1％酸性靛兰水溶液（0.1g溶解在100 ml水中）。

二、实验步骤

1. 种子处理

先将大麦、大豆种子用水浸泡1～2 h ，待充分吸胀后，取出一部分在沸水中煮3～5min，作为死种子。选择浸水的新种子、陈种子和死种子各100粒，如为大豆，用镊子小心剥去种皮，如为小麦则用刀片沿胚部中线纵切成两半，用其中一半进行测定（需要有胚部）。

2. 染色

将处理好的种子均匀摊于培养皿内，加入0.1％酸性靛兰溶液，以浸没种子为度。

3. 冲洗种子

染色15～20分钟后，倾出溶液，用自来水反复冲洗种子，直到所染的颜色不再洗出为止。

三. 观察记载

对比观察冲洗后的新鲜种子，陈种子和死种子的胚部着色情况。凡生活力强的种子，胚完全不着色，或在子叶和胚根上面有不大的着色很淡的斑点，如果整个胚根全部着色或在胚根和子叶上有着色很浓的斑点，就是完全丧失或大部分丧失生活力的种子。统计出具有生活力的种子百分数，作为估计的发芽率，并与实际发芽率（事前用普通发芽实验法测定）作比较。

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