概述与原理

乙醇-甲醛（AF）固定液将乙醇的脱水作用与甲醛的交联化学反应相结合，实现有效的组织固定。乙醇作为凝固性固定剂，通过沉淀蛋白质并对组织进行脱水；而甲醛（福尔马林）则在蛋白质氨基之间形成亚甲基桥，从而稳定大分子结构。两种机制相辅相成，能够有效保存细胞形态，使AF固定液在某些软组织及特定染色方案中尤为适用，弥补了单独使用中性缓冲福尔马林（NBF）的不足。

AF固定液广泛应用于组织学、病理学及生物医学研究实验室，兼容常规苏木精-伊红（H&E）染色，以及部分免疫组织化学（IHC）技术（如需，应配合适当的抗原修复步骤）。

材料与安全注意事项

所需材料：

• 乙醇-甲醛（AF）固定液（货号：A1529422）
• 适用的组织包埋盒或标本容器
• 个人防护装备（PPE）：耐化学品手套、护目镜及实验室工作服
• 通风橱或充分通风的工作区域
• 符合当地危险废弃物法规要求的废液收集容器

安全注意事项：

• 甲醛为已知人类致癌物（IARC第1类）及呼吸道致敏剂，所有操作必须在经认证的通风橱内进行。
• 乙醇高度易燃，使用时应远离明火、火花及热源。
• 操作AF固定液时，全程须佩戴适当的个人防护装备。
• 使用前请查阅A1529422的安全数据表（SDS），获取完整的危害信息、急救措施及废弃处置说明。
• 按照机构及当地法规要求，将废弃固定液作为危险化学废物进行处置。

逐步固定操作规程

1. 组织采集与修整

组织切除后应立即采集，以尽量减少自溶。将组织修整至适当厚度（通常≤5 mm），以保证固定液充分渗透。将组织放入已标记的标本容器中。

2. 加入AF固定液

向标本容器中加入足量的乙醇-甲醛（AF）固定液（货号：A1529422）。一般建议固定液与组织的体积比不低于10:1，以确保组织完全浸没并充分固定。拧紧容器盖。

3. 固定时间与温度

在室温下固定适当时间。固定时间因组织类型和厚度而异，通常为数小时至过夜。请参阅机构组织学操作指南或产品SDS，获取针对您所处理组织类型的推荐固定时间。

4. 固定后处理

固定完成后，将组织依次经梯度乙醇脱水、透明，再按常规组织学处理流程进行石蜡包埋。应及时处理固定后的组织，避免过度固定产生人工假象。

5. 切片与染色

使用切片机将石蜡包埋组织块切至所需厚度（通常为3–7 µm）。在进行H&E染色、免疫组织化学（IHC）或其他下游染色方法前，先对切片进行脱蜡和复水处理。

故障排查

组织形态不佳/固定不完全：确保固定液与组织的体积比不低于10:1，且组织厚度不超过5 mm。如有必要可适当延长固定时间，但应避免过度固定。检查AF固定液是否存储得当且未过期。

组织过度硬化或收缩：过度固定或长时间暴露于高浓度乙醇中可导致组织硬化和收缩。请严格遵守推荐固定时间，并避免在固定后处理过程中进行过度脱水。

免疫组织化学（IHC）染色弱或失败：醛基固定可能导致抗原表位遮蔽。在施用一抗前，应优化抗原修复条件（热诱导或酶法修复）以恢复抗原性。请验证每种抗体与AF固定组织的兼容性。

操作过程中甲醛气味强烈：确保所有操作均在运行正常的通风橱内进行。不使用时确保容器密封良好。请参阅SDS获取更多通风建议。

储存、处置及法规说明

储存：乙醇-甲醛（AF）固定液应在室温下密封储存，远离热源、明火及不相容物质（如强氧化剂）。请置于通风良好的区域。完整储存要求请参阅产品SDS。

废弃处置：废弃AF固定液及受固定液污染的材料须作为危险化学废物处理。在确认符合当地废水排放法规之前，请勿将其倒入下水道。请咨询机构环境健康与安全（EHS）部门，获取经批准的废弃物处置程序。

法规说明：含甲醛产品受到OSHA（美国）、HSE（英国）及各国同等监管机构制定的职业接触限值（OEL）约束。用户有责任确保在使用、储存及处置含甲醛固定液方面符合所有适用的地方、国家及机构法规要求。