技术文章

膜联蛋白V染色

产品描述

          膜联蛋白V(Annexin V)是一种钙离子依赖的磷脂结合蛋白,能够特异性结合暴露在细胞膜外侧的磷脂酰丝氨酸(PS)。在健康细胞中,PS局限于质膜内侧;当细胞进入凋亡过程时,PS会翻转至膜外侧,成为凋亡的重要标志。荧光或其他信号分子标记的Annexin V,在Ca²⁺存在条件下能够实现高灵敏度检测,适用于流式细胞术、荧光显微镜及多种凋亡分析方法。


图1. 细胞凋亡过程中磷脂酰丝氨酸(PS)外翻示意图

为什么使用膜联蛋白V检测细胞凋亡?

          Annexin V能在细胞形态学改变前,通过识别凋亡早期的磷脂酰丝氨酸(PS)外翻,实现早期检测。凭借对PS的纳摩尔级高亲和力,它可精准区分凋亡与存活细胞。Annexin V广泛适用于流式细胞术、显微成像等多种平台,同时兼顾定量分析与PS分布的可视化研究。

用于凋亡检测的膜联蛋白V偶联物

  • 灵敏检测,精准区分凋亡阶段:结合PI、7-AAD或DAPI,精确识别早期与晚期凋亡细胞。
  • 多种偶联物选择,广泛兼容性:提供AF405、AF488、FITC、PE、APC等多种标记物,适配多种激光系统。
  • 操作简便,应用灵活:可单独使用或与细胞核染料组合,支持流式细胞术和荧光显微镜分析。

产品列表

产品名称

偶联物

激发/发射波长(nm)

规格

货号

储存

Annexin V-Pacific Blue

Pacific Blue

410/455

25T/100T/300T

rp226004

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-AF 488

AF 488

490/525

25T/100T/300T

rp226057

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-FITC

FITC

498/517

25T/100T/300T

rp226053

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-PE

PE

565/575

25T/100T/300T

rp226055

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-AF 647

AF 647

650/668

25T/100T/300T

rp226060

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-APC

APC

650/660

25T/100T/300T

rp226054

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-AF 680

AF 680

681/704

25T/100T/300T

rp226002

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-Biotin

Biotin

NA

25T/100T/300T

rp226056

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-AF350

AF350

343/441

25T/100T/300T

rp225998

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-AF405

AF405

401/422

25T/100T/300T

rp225999

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-AF594

AF594

590/618

25T/100T/300T

rp226001

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-AF750

AF750

752/776

25T/100T/300T

rp226003

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-Cy5

Cy5

647/665

25T/100T/300T

rp226006

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-PE-Cy5

PE-Cy5

565/670

25T/100T/300T

rp226058

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

Annexin V-PE-Cy7

PE-Cy7

565/774

25T/100T/300T

rp226059

2-8°C储存,避光,禁止冷冻

膜联蛋白V染色实验条件

          Annexin V检测首选未固定的活细胞/组织。如果样品已被固定,需要特定条件以保持信号强度,先在含Ca²⁺条件下完成Annexin V染色,随后以1%多聚甲醛(PFA)在含Ca²⁺缓冲液中短时固定10–15 min,避免酒精及甲醇固定与任何表面活性剂和渗透步骤。为提高检测效果,我们提供了Annexin V结合缓冲液(A1372288),可优化膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸的结合。该缓冲液具有以下优点:

  • 促进特异性结合:缓冲液含有优化浓度的钙离子,可有效促进Annexin V与细胞表面磷脂酰丝氨酸(PS)的结合。
  • 适用于早期凋亡检测:为流式细胞术检测早期细胞凋亡提供关键条件,提高检测灵敏度和准确性。

膜联蛋白V染色的应用

Annexin V-FITC(rp226053)–流式细胞术

          U937细胞分别在未处理(左图)或用4 µM喜树碱(camptothecin,C111281)处理4小时(右图)后,采用Annexin V-FITC(rp226053)和碘化丙啶(PI,P1372285)在Annexin V结合缓冲液(A1372288)中染色10分钟,室温孵育。

Annexin V-PE(rp226055)–流式细胞术

           U937细胞在未处理(蓝色)或用5 µM喜树碱(camptothecin,C111281)处理4小时(红色)后,分别在Annexin V结合缓冲液(A1372288)中与Annexin V-PE(rp226055)共同染色,室温孵育10分钟。

细胞凋亡检测试剂盒

         在凋亡早期,由于细胞膜仍保持完整,活性染料(如碘化丙啶PI或7-AAD)无法进入细胞,因此此类细胞仅被Annexin V染色而不被活性染料标记,从而可识别早期凋亡细胞。随着凋亡进展至晚期,细胞膜完整性丧失,Annexin V可结合细胞内的磷脂酰丝氨酸(PS),同时活性染料也能够进入细胞。通过联合检测Annexin V和活性染料,可以将早期凋亡细胞(Annexin V阳性、活性染料阴性)与晚期凋亡或坏死细胞(Annexin V阳性、活性染料阳性)区分开来。

我们的试剂盒专为流式细胞术设计,可用于准确鉴定和计数死亡细胞(包括凋亡和坏死细胞)。

产品列表

名称

试剂盒组分

包装

货号

Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒

10× Annexin V Binding Buffer;Annexin V-FITC;Propidium iodide Staining Solution (PI)

20T/50T/

100T

A1372286

Annexin V-APC/PI细胞凋亡检测试剂盒

10× Annexin V Binding Buffer;Annexin V (APC);Propidium iodide Staining Solution (PI)

20T/50T/

100T

A1372287

Annexin V-APC/DAPI 细胞凋亡检测试剂盒

10× Annexin V Binding Buffer;Annexin V -APC;DAPI Staining Solution (25 μg/mL)

20T/50T/

100T/200T

A1456534

Annexin V-PE-Cy5/DAPI细胞凋亡检测试剂盒

10× Annexin V Binding Buffer;Annexin V -PE-Cy5;DAPI Staining Solution (25 μg/mL)

20T/50T/

100T/200T

A1456540

Annexin V-PE-Cy7/ DAPI细胞凋亡检测试剂盒

10× Annexin V Binding Buffer;Annexin V -PE-Cy7;DAPI Staining Solution (25 μg/mL)

20T/50T/

100T/200T

A1456541

Annexin V-FITC/7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒

10X Annexin V Binding Buffer;Annexin V-FITC;7-AAD Staining Solution

20T/50T/

100T/200T

A1456530

Annexin V-APC/7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒

10X Annexin V Binding Buffer;Annexin V-APC;7-AAD Staining Solution

20T/50T/

100T/200T

A1456533

Annexin V-AF647/7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒

10× Annexin V Binding Buffer;Annexin V -AF647;7-AAD Staining Solution

20T/50T/

100T/200T

A1456539

Annexin V-AF488/7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒

10X Annexin V Binding Buffer;Annexin V-AF488;7-AAD Staining Solution  

20T/50T/

100T

A1456536

Annexin V-PE-Cy7/7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒

10X Annexin V Binding Buffer;Annexin V-PE-Cy7;7-AAD Staining Solution

20T/50T/

100T

A1456542

Annexin V-PE/7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒

10X Annexin V Binding Buffer;Annexin V (PE);7-AAD Staining Solution

20T/50T/

100T/200T

A1372402

Annexin V-Biotin/PI细胞凋亡检测试剂盒

10x Annexin V Binding Buffer;Annexin V-Biotin;Propidium iodide Staining Solution (PI);Streptavidin protein (FITC)

20T/50T/

100T

A1373480

细胞凋亡检测试剂盒的应用

Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒(A1372286)–流式细胞术

           利用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒(A1372286)对U937细胞进行流式细胞术分析。细胞分别未处理(左图)或用4 µM喜树碱(camptothecin,C111281)处理4小时(右图)。

Annexin V-APC/PI凋亡检测试剂盒(A1372287)–流式细胞术

          利用Annexin V-APC/PI凋亡检测试剂盒(A1372287)对U937细胞进行流式细胞术分析。细胞分别未处理(左图)或用4 µM喜树碱(camptothecin,C111281)处理4小时(右图)。


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探索主题: 细胞凋亡 膜联蛋白V

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《膜联蛋白V染色》. 阿拉丁知识库,更新于 2025年8月26日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/annexin-v-staining.html
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