细胞浸润生长性检测实验
细胞浸润生长性检测实验
细胞浸润生长性检测实验可应用于:
(1)检测癌细胞性状;(2)研究细胞浸入或穿透方式。
操作方法
细胞浸润生长性检测实验
原理
浸润性生长是细胞浸入或穿透其它组织增殖生长能力,浸润生长性检测是检测癌性细胞的一项有意义的指标。检测方法需用其它正常组织和癌细胞共同培养,观察癌细胞向正常组织浸润生长的情况。
材料与仪器
鸡胚 步骤 常用鸡胚皮肤或心肌组织块,作为被浸润生长的对象;今以鸡胚皮肤为例,培养过程如下 1. 程序 (1)鸡胚浸出液制备 (2)琼脂层制备 1 %Bacto琼脂(用不含NaHCO3的Eagle缓冲液配)10 分 小牛血清 4 分 鸡胚浸出液 4 分 (3)鸡胚皮培养 无菌从10 天胚龄鸡胚背部取皮,切成6~8mm3小块;每皿中置2~3 块,贴在琼脂层表面; (4)取内径6 mm,厚2 mm的无菌小磁杯或玻璃圈(硅橡胶圈亦可),套在鸡皮小块上; (5)共培养 向每个小磁圈中加入25~30 ul 细胞悬液(含104个细胞的2 倍培养液),盖上平皿盖,置37 ℃CO2温箱中培养; (6)补液 次日再向每个环中补加2 倍培养液2.5 ul; (7)切片观察 第4 天挖取出鸡皮块,10%福尔马林固定,常规包埋、切片、染色、光学显微镜下观察细胞对鸡胚皮肤浸润的情况。 2. 结果 如癌性细胞已浸入鸡胚皮肤内,说明该细胞具有浸润生长能力。 注意事项 实验过程应避免细菌感染,如癌性细胞已浸入鸡胚皮肤内,说明该细胞具有浸润生长能力。 常见问题 鸡胚浸出液内含有生长因子、大分子核蛋白和小分子氨基酸等,有刺激细胞生长作用,为早年培养使用的培养用液,现已被合成培养液所代替,但在某些研究中仍有一定应用价值。 如需了解更多产品详情,请前往阿拉丁官网查询。
Bacto琼脂 Eagle 缓冲液 小牛血清 福尔马林 Hanks液 碘酒
玻璃圈 CO2温箱 培养皿 平皿盖 手术剪 手术钳 离心机 注射器 烧杯
来源《组织培养和分子细胞学技术》
危险品化学品经营许可证(带存储)