膜结构中的蛋白质和脂质具有相对侧向流动性；细胞膜是由磷脂双分子层和镶嵌、贯穿在其中及吸附在其表面的蛋白质组成的，磷脂双分子层疏水的尾部在内，亲水头部在外。

操作方法

荧光探针标记法

原理

常用于研究膜脂流动性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯（DPH）。DPH掺入到细胞膜脂烃链区后，介质粘度增加，顺反异构受到抑制，成为唯一能发光的全反构型。

材料与仪器

肿瘤细胞
磷酸盐缓冲液 DPH
荧光分光光度计 离心机

步骤

1.  取对数生长期的肿瘤细胞，以pH7.2，0.01 mol/l 磷酸盐缓冲液洗涤两次。

2.  取10⁷个细胞，离心，加入2×10⁶ mol/l DPH溶液2 ml。

3.  25℃振荡温育30 min，再以PBS洗涤1次。

4.  悬浮于4 ml PBS溶液中。

5.  测定仪器为荧光分光光度计，在激发波长362 nm，发射波长432 nm，狭缝10条件下测定荧光强度。

注意事项

由于DPH可进入细胞内部，后来又合成了其阳性离子衍生物1-（4-三甲胺苯基）-6-苯基-1,3,5-己三烯（TMDPH）。TMDPH不能透过细胞膜进入细胞，因此，理论上TMDPH标记法较DPH标记法更能准确的反映膜脂流动性。

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