细胞复苏是将冻存在液氮中的细胞解冻之后重新培养，细胞恢复生长的过程。

原理

细胞复苏的基本原理是复苏时融解细胞速度要快，让细胞迅速通过最易受损的-5 - 0℃，防止细胞内形成冰晶引起细胞死亡。

操作方法

细胞复苏

材料与仪器

器材：37℃ 水浴箱、离心机、无菌试管以及培养瓶。
试剂：
① 含 20％ 血清 RPMI 1640 培养液；

步骤

细胞复苏的基本过程可分为如下几步： A 从液氮中取出细胞安瓿或冻存管，置 37℃ 水浴中迅速融化，一旦冰块消失即将冻存管从水浴中取出。 B 用 70％ 乙醇擦洗冻存管外部以减少污染机会。 C 吸取冻存管内容物缓慢加入含 4-5 ml 培养液的 T-25 细胞培养瓶中，置 5％CO₂、37℃ 细胞培养箱培养，次日换液。也可通过离心去除细胞保护剂，再进行细胞培养。

注意事项

冻存细胞并非能达到 100％ 复苏成功。复苏失败可能与以下因素有关，冻存时细胞数量少或生长状态不良；细胞受细菌或支原体污染；液氮罐保管不善；复苏时培养条件改变，如将胎牛血清换成小牛血清；复苏方法不得当等。

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