认识破伤风梭菌，产气荚膜梭菌，肉毒梭菌的形态和培养特点，通过“汹涌发酵“试验和动物试验，了解产气荚膜梭菌的致病性；了解常用的厌氧培养法，观察破伤风外毒素的致病作用。

操作方法

厌氧芽胞梭菌形态观察

原理

厌氧芽胞梭菌均为革兰染色阳性，都能形成芽胞，其形状大小及位置因菌种而异，可作为菌种鉴别的参考；营养要求不高，但需厌氧环境才能生长。常见致病菌有破伤风梭菌，气性坏疽病原菌和肉毒梭菌，破伤风和气性坏疽为严重的创伤传染病，在战时尤为重要。肉毒梭菌为食物中毒病原菌。

步骤

1.  观察破伤风梭菌，肉毒梭菌芽胞染色标本及产气荚膜梭菌的荚膜染色标本片。

2.  观察破伤风梭菌，产气荚膜梭菌在庖肉培养基中的生长特点和血平板上的菌落特点。

3.  观察产气荚膜梭菌及破伤风梭菌在葡萄糖高层琼脂培养基中的生长特点（注意产气特点），认识"汹涌发酵"现象。

产气荚膜梭菌在葡萄糖高层琼脂培养基中生长，分解葡萄糖产酸及大量气体。气体将半固体琼脂冲散（琼脂断裂成多节段），并将凡士林冲向试管口；破伤风梭菌在该培养基中生长，未见上述情况。

在牛奶培养基中产气荚膜梭菌分解乳糖产酸，使溴甲酚紫指示剂由紫色变为黄色，大量的酸使酪蛋白凝固，同时产生的大量气体又将凝固的酪蛋白冲散，将凡士林冲向试管口。此称\"汹涌发酵\"现象。

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