实验方案(Protocols)

结合磁珠实验

简介

这一步仅为基因表达的系列分析 cDNA 合成中实验方案 A 的一部分,在实验方案 B 中,cDNA 已经结合到链霉抗生物素包被的 PCR 试管上,因此不必用磁珠结合。

现代神经科学研究技术

作者:U.Windhorst & H. Johansson 翻译:赵志奇 陈军

操作方法

结合磁珠实验

材料与仪器

磁珠
Dynabead M-280链霉抗生物素
磁设备

步骤

实验方案 A

  1. 振荡 lmin 以使 Dynabead M-280 链霉抗生物素重新成为混悬液。
  2. 将 2X 的 100 ul Dynabeads 转移至 U—个 1.5 ml 的 Eppendorf 试管中。
  3. 用磁设备固定磁珠,移去上清液。
  4. 用 200 ul 的 IX 结合及冲洗缓冲液重悬磁珠冲洗 3 次,固定磁珠,移去冲洗液。
  5. 将 NlaIII 酶消化后的 cDNA 分成两份各 10ul,每份中加入 90ul 的重蒸水和 100ul 的 2X 结合及冲洗缓冲液;混合后加入一份冲洗过的磁珠。
  6. 混合后,在室温下 W 育 30 min(每 IOmin 混合 1 次)。
  7. 用磁设备固定磁珠,弃去上清液。
  8. 用 200ul 的 IX 结合及冲洗缓冲液冲洗固定的磁珠 3 次,然后再用 200ul 的 LoTE 冲洗 1 次。
  9. 在冲洗完最后 1 次后,固定磁珠并移去 LoTE。
  10. 继续进行第 5 步
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探索主题: DNA 实验

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《结合磁珠实验》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/combined-with-magnetic-bead-experiments.html
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