实验方案(Protocols)

植物组织中酷类物质含量的测定

简介

植物组织中的酚类物质在多酚氧化酶的催化下被氧化为醍,醍可自动聚合成有 色物质,发生褐变。因此,对植物组织内酚类物质进行定量测定具有一定意义,是植物抗性生 理研究中经常用到的一个指标。本实验的目的在于学习测定酚类物质含量的原理及方法。

原理

酚类物质含量测定常采用 Folin-酚法。酚类物质在碱性条件下可与 Folin-酚试 剂中的磷鸨酸和磷钥酸反应生成鸨蓝和钥蓝化合物,该物质在 700 nm 处有最大光吸收,其吸 光度的大小与酚类物质的含量成正比。因此,通过测定吸光度的大小即可测定植物组织中酚 类物质的含量。

操作方法

植物组织中酷类物质含量的测定

原理

酚类物质含量测定常采用 Folin-酚法。酚类物质在碱性条件下可与 Folin-酚试 剂中的磷鸨酸和磷钥酸反应生成鸨蓝和钥蓝化合物,该物质在 700 nm 处有最大光吸收,其吸 光度的大小与酚类物质的含量成正比。因此,通过测定吸光度的大小即可测定植物组织中酚 类物质的含量。

材料与仪器

1. 材料:各种植物组织。
2. 试剂:
(1)Folin-酚试剂:称取鸨酸钠 25 g 和磷铝酸 5 g, 放入回流瓶中,加 12.5 mL 磷酸和 188 mL 蒸馋水,一起回流煮沸 2 h, 冷却后用蒸僭水定容至 1 000 mL。
(2)10% Na
2
CC)
3
:称取 10 g Na
2
CO
3
溶于 100 mL 蒸儒水中。
(3) 标准酚溶液:0.45 mmol - 邻苯二酚溶液。
3. 仪器: 分光光度计,离心机,研钵,试管,试管架,移液管等。

步骤

1 . 酚类物质的提取:称取 1 g 植物材料,加少量水研磨成匀浆,充分洗涤研钵,定容至 100 mL。用时可适当稀释。 2. 标准曲线的制作:按表 56」加入各种试剂,混匀,3 min 后加 10% Na2CO3 2 mL, 振 摇,室温下静置 1 h 后测定其在 700 nm 处的吸光度。以酚溶液浓度为横坐标,吸光度为纵坐 标,绘制标准曲线。 表 56-1 标准曲线制作加样表

试剂 试管编号
123456
标准酚溶液/mL00.20.40.60.81.0
蒸儒水/mL2.01.81.61.41.21.0
最终浓度/(卩 mol • mL-1)04590135180225
Folin-酚试剂/mL222222
3. 样品酚含量的测定:将提取液适当稀释,吸取 2 mL 置于试管中,加 2 mL Folin-酚试 剂,3 min 后加 10% Na2CO3 2 mL, 振摇,室温下静置 1 h 后测定其在 700 nm 处的吸光度,在 标准曲线上查出对应的酚浓度厂 4. 结果计算:c X V酚含量 (Mmol- g-,) = —式中:c 一为从标准曲线上查得的酚浓度,卩 mol・mL 1;V—为样品体积,mL;W —为样品质量»go

注意事项

酚类物质提取时避免被氧化。

常见问题

测定植物组织中酚类物质的含量有何意义?


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Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

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引用本文

阿拉丁科学.《植物组织中酷类物质含量的测定》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/determination-of-coolant-content-in-plan.html
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