实验方案(Protocols)

DNA 污染的洗脱后去除实验

简介

下述方案是 Dilworth 和 Huang 方案的修改(DilworthandMcCarey1992;Huangetal.2000)。它可以用于从大多数商用试剂盒和试剂制备的 RNA 中去除 DNA 污染。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。

操作方法

DNA污染的洗脱后去除实验

材料与仪器

EDTA DNA 酶Ⅰ DNA 酶Ⅰ缓冲液 RNA 样品
水浴锅

步骤

一、材料

1. 缓冲液、溶液和试剂

用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水

EDTA,25 mmol/L

2. 酶和酶缓冲液

DNA 酶Ⅰ, 扩增级(无 RNA 酶)

DNA 酶Ⅰ缓冲液,10X

3. 核酸和寡核苷酸

RNA 样品

4. 特殊设备

水浴,预设为 65°C

二、方法

①向一无 RNA 酶的管中加下列成分。

RNA                                                 不多于 80ug

DNA 酶 I 缓冲液,10X                     1ul

DNA 酶 I(lU/ul)                                 1ul

用 DEPC 处理过的水将总体积调到 10ul。

②室温下温育 15 min。

③加 1ul25 mmol/L 的 EDTA 溶液,并于 65°C 加热 10min 以灭活 DNA 酶 I。

用这种方式处理的样品适合直接用于 RT-RCR。


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探索主题: PCR 技术

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《DNA 污染的洗脱后去除实验》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/dna-contamination-removal-assay-after-el.html
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