实验动物个体识别、分组与除毛是动物实验质量控制的基础环节。规范的编号与标记可保障全过程可追溯性并降低差错；合理的分组策略可提升组间可比性与统计效能；适宜的除毛方案可满足手术暴露、取样与成像等操作需求，同时降低皮肤刺激及对实验终点的潜在干扰。本文系统归纳常用编号/标记方法、小鼠分组策略与除毛操作要点，并给出典型应用场景的组合建议及相关产品货号信息。

        关键词：实验动物；个体识别；编号；标记；小鼠分组；随机化；配对；除毛；染色标记液；脱毛剂

一、总则：编号、标记与除毛的质量控制原则

1.1 可追溯性与差错防控

（1）个体识别应实现研究全周期内的唯一性与稳定性，确保笼卡信息、个体标记、操作记录、样本标签与数据文件命名一致。

（2）应建立结构化编号规则（例如批次-组别-序号），并在研究启动前完成编号方案固化与人员培训。

（3）关键节点应执行双人核对或双通道核对（笼卡-个体标记-记录表三方一致），将错配风险控制在可接受范围内。

1.2 动物福利与实验终点相容性

（1）标记与除毛方法的选择应综合评估疼痛与应激、皮肤/组织损伤风险、感染风险以及对主要终点（炎症、免疫、代谢、行为学、影像等）的潜在影响。

（2）涉及组织损伤或侵入性操作的标记方式，应在机构SOP与伦理审批框架下实施，确保操作者资质与操作一致性。

（3）除毛操作应遵循最小刺激原则，避免引入额外变量影响终点判读。

二、实验动物的编号与标记方法

2.1 长期或永久性识别方法

（1）挂牌法

        将号码烙压于金属牌，或将号码按分组编码固定于项圈/皮带等载体并佩戴于颈部，适用于犬等大型动物。

【优点】可读性较高，远距离识别效率高，维护便捷。

【局限】存在摩擦、缠绕与脱落风险；不适用于啮齿类。

【使用要点】

        ①项圈松紧度应满足正常吞咽与运动需求，避免长期摩擦损伤；

        ②定期检查佩戴状态并记录维护情况；

        ③编号应与笼卡与原始记录一致，避免多体系并行。

（2）打号法（耳号钳/刺数针）

        使用刺数针将号码标记于耳廓，必要时配合显色液提高可读性，适用于耳廓较大的动物（如兔、犬等）。

【优点】号码清晰、持续时间较长，日常查验便捷。

【局限】需规范操作以控制出血与感染风险；对耳廓较小个体可读性受限。

【使用要点】

        ①打号前清洁耳廓并选择避开明显血管的区域；

        ②操作后观察出血与局部炎症，并记录编号与位置；

        ③同一研究内应固定打号位置与编码规则。

（3）打孔或剪缺口法

        在耳部固定位置打孔或剪缺口以表示号码，常用于规模化饲养与终身编号管理。

【优点】成本较低，稳定性较高，适合大批量管理。

【局限】属于组织损伤型标记；缺口愈合或定位偏差可能影响判读。

【使用要点】

        ①研究启动前制定孔位/缺口编码表并统一培训；

        ②固定定位模板，确保操作者间一致性；

        ③术后关注愈合与感染，必要时进行局部护理并留存记录。

（4）纹身与电子芯片（补充）

        纹身（尾部/足底等）与电子芯片（RFID/UID）用于长期追踪与高可靠身份识别。

【优点】纹身可读性较强；芯片唯一性高并支持自动化读取。

【局限】需要设备与培训；芯片成本较高且需评估植入对局部组织与终点的影响。

【使用要点】

        ①在研究方案阶段评估与影像、炎症等终点的相容性；

        ②明确植入部位、麻醉/镇痛与术后观察要求；

        ③建立扫码读取与数据对接流程，确保记录闭环。

2.2 短期或辅助性标记方法

（1）针刺法

        用细针蘸取少量碳素墨水，在耳部、四肢或尾部等处刺入皮下形成点位标记，适用于大小鼠、豚鼠等。

【优点】操作快速，耗材简单，适用于短期区分。

【局限】点位规则复杂时易误读；局部刺激可能影响皮肤相关终点。

【使用要点】

        ①点位规则应尽量简化并形成图示标准；

        ②避开拟取样、拟建模或拟成像关键区域；

        ③建立点位-编号对照表并与笼卡同步更新。

（2）化学涂染被毛法（常用）

        通过在被毛表面进行颜色标记以区分个体或分组，适用于短周期核对与同笼多只快速区分。

【优点】非侵入性，效率较高，适用于高频次操作流程。

【局限】颜色可能随被毛生长、清洁或摩擦而衰减；在皮肤模型或光学成像中可能引入背景干扰。

【使用要点】

        ①避免接触眼口鼻等黏膜及破损皮肤；

        ②避免涂布于拟成像ROI、拟评分与局部给药区域；

        ③建议采用专用动物染色标记液以提高稳定性与一致性。

（3）剪毛造号法

        在动物背部或体侧剪出数字/符号以实现短期识别，适用于犬、兔等大中型动物。

【优点】可视化程度高，现场核对效率较高。

【局限】随被毛生长迅速模糊，不适用于长期研究；操作者差异可降低一致性。

【使用要点】

        ①统一号码位置、大小与字体样式；

        ②与笼卡及记录表同步更新并设置复核；

        ③避免在拟手术区或拟观察关键皮肤区域剪裁。

三、小鼠常用分组方法与实施要点

3.1 随机分组法

（1）简单随机分组

        利用随机数表或随机数生成器将小鼠以等概率分配至不同组别，适用于样本量较小且无显著分层特征的群体。

【优点】可有效降低人为选择偏倚，实施流程相对简洁。

【局限】在样本量较小或个体差异较大时，可能出现组间性别、体重或基线指标不均衡。

【使用要点】

        ①随机化前完成个体编号与基础信息采集；

        ②保存随机化方法、工具与参数（必要时含随机种子），确保可追溯；

        ③随机化后进行基线均衡性核查，并在记录中留存结果。

（2）区组随机化分组

        当性别、年龄、体重、基线血糖等特征对终点影响显著时，先将小鼠按关键特征分成同质区组，再在区组内进行随机分配。

【优点】提升组间均衡性，降低已知混杂因素影响，通常可提高统计效能。

【局限】前期测量与管理成本较高；区组划分过细可能导致区组过小、执行复杂。

【使用要点】

        ①区组变量应聚焦关键混杂因素，避免过度分层；

        ②区组内严格随机化并完整记录区组信息；

        ③研究过程中保持区组定义不变，避免中途调整规则。

3.2 配对与适应性分组法

（1）配对分组（基于特定指标）

        根据体重、基线血糖、肿瘤体积等指标将相近个体配成对子，再将对子内个体随机分配到实验组与对照组。

【优点】降低个体差异引起的方差，提高检测处理效应的能力，尤其适用于样本量有限的研究。

【局限】个体脱落可能破坏配对结构并增加统计处理复杂度；配对指标选择不当会降低控制效果。

【使用要点】

        ①配对指标应与主要终点具有明确相关性且测量稳定；

        ②预先定义脱落处理与统计分析策略（配对分析或转为非配对）；

        ③配对规则与随机分配过程需可审计并记录留存。

（2）嵌套设计配对

        在多层因素下进行配对，例如先按性别配对，再在性别内按体重进一步配对。

【优点】对多重混杂因素控制更精细，组间可比性更强。

【局限】执行复杂度高，对样本量与数据管理要求较高；层级过多会导致配对困难。

【使用要点】

        ①嵌套层级应围绕核心假设设置，避免过度设计；

        ②明确每层配对的优先级与冲突处理规则；

        ③强化数据管理与质控，确保匹配关系可追溯。

（3）适应性分组

        依据实验过程中的反应或表现进行动态分层或调整分组，例如按药物早期反应分为敏感组与耐受组。

【优点】可用于刻画生物学异质性，有利于机制探索与人群分层策略研究。

【局限】若规则不预先定义，易引入选择偏倚并削弱结论可靠性；对实时监测与统计设计要求高。

【使用要点】

        ①预先定义分层阈值、调整时点与统计分析方法；

        ②保持执行一致性，避免事后基于结果调整规则；

        ③完整记录调整过程与依据，确保伦理与方案一致。

四、实验动物的除毛

4.1 常用除毛方式与适用场景

（1）剪毛法

        将被毛浸湿后紧贴皮肤剪除，剪下毛发集中收集以减少污染。

【优点】皮肤刺激相对较小，适用于对皮肤屏障敏感的实验；亦可作为剃毛/脱毛前预处理。

【局限】毛根残留较多，不利于对皮肤表面清洁度要求较高的成像或贴敷。

【使用要点】

        ①避免提起被毛后再剪以防误剪破皮肤；

        ②毛发集中收集并规范处置；

        ③与后续消毒或成像需求联动评估是否需要进一步除毛。

（2）拔毛法

        用手指拔除小范围被毛，常用于快速暴露静脉区域。

【优点】无需器械，操作简便。

【局限】刺激性较强，可能引起短期充血；不适用于炎症敏感终点或大面积处理。

【使用要点】

        ①限定适用范围并避免反复处理同一区域；

        ②如需重复操作，应改用刺激更低的方法；

        ③关注局部皮肤反应并记录。

（3）剃毛法

        先剪短长毛，再以温肥皂水软化后剃除，适用于手术区暴露与较大面积操作区。

【优点】效率较高，适用范围广，化学刺激相对较低。

【局限】可能造成微小皮肤划伤；毛根残留可能影响高敏感光学成像。

【使用要点】

        ①刀头/刀片应清洁锐利并按需更换；

        ②控制压力与方向，减少划伤；

        ③剃毛后检查皮肤完整性并与消毒流程衔接。

4.2 化学脱毛的关键控制点与配方说明

（1）化学脱毛操作要点

【优点】除毛更彻底，毛根残留少，适用于成像、贴敷、经皮给药及精细手术视野需求。

【局限】对时间控制与残留清除要求高，操作不当可能导致刺激或皮肤损伤。

【使用要点】

        ①先剪短被毛，目标区域薄涂，避免接触黏膜与破损皮肤；

        ②严格控制接触时间，达到规定时间立即冲洗并擦除残留；

        ③除毛后评估红斑、破损等反应，必要时调整方案并记录全过程。

（2）传统自配脱毛剂配方

        犬等大动物：硫化钠10 g，生石灰15 g，溶于100 ml水中。

        兔、鼠等小动物：

        ①硫化钠3 g，肥皂粉1 g，淀粉7 g，加适量水调成糊状；

        ②硫化钠8 g，淀粉7 g，糖4 g，甘油5 g，硼砂1 g，加水75 ml；

        ③硫化钠8 g溶于100 ml水中。

【说明】硫化物体系通常呈碱性且刺激性控制难度较高，批间差异亦较明显。动物实验中宜优先采用专用实验动物脱毛剂，并在机构SOP与安全防护要求下按说明书执行，以降低皮肤刺激与对终点的潜在干扰。

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        实验动物研究的可重复性与可解释性依赖于基础流程的标准化控制。建议在研究启动阶段即固化个体编号与标记体系，选择与主要终点相容的分组策略，并将除毛方法、接触时间、部位与皮肤反应纳入可审计记录。通过建立统一SOP、强化人员培训与关键节点核对，可显著降低错配与偏倚风险，提高数据质量，为获得可靠、可复现的实验结论提供坚实保障。

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[1] 实验动物分组、标记与染毒实验

[2] 实验动物标记实验