实验方案(Protocols)
高地辛标记的 DNA 探针制备实验
高地辛标记的 DNA 探针制备实验
地高辛系统是过提供的另一种非同位素标记方法,其检测方法是通过偶联上一种或数种荧光染料或酶的抗地高辛抗体,或用间接免疫荧光来测定。
操作方法
基本方法
材料与仪器
DNA 步骤 1. 建立一个标准100 μl 反应体系,用10 μl,10×地高辛·11-dUTP/dTTP贮液,DNA酶Ⅰ酶量不变,15℃温育2 h。 2. 取小份在微型胶中进行电泳以检测探针大小。 3. 继续反应直到获得大小合适的DNA探针。 4. 加入2 μl 0.5mol/l EDTA和1 μl 10%SDS,68℃加热10 min 以终止反应。 5. 用G-50离心柱分离探针。 6. 用比色法或化学发光法测定地高辛标记的探针。 如需了解更多产品详情,请前往阿拉丁官网查询。
dTTP dUTP EDTA SDS
水浴锅 培养箱
7. 用碱性磷酸酶偶联的抗地高辛抗体代替链亲和素-碱性磷酸酶交联物。
8. 利用地高辛标记的标唯DNA或是标好的地高辛探针作为对照检测地高辛掺入效率。
危险品化学品经营许可证(带存储)