极限培养基配制实验
极限培养基配制实验
极限培养基是指仅含碳水化合物和提供氮、磷、微量元素的无机盐的培养基。内容来源:精编分子生物学指南第五版。
操作方法
极限培养基配制实验
材料与仪器
水 Na2HPO4 KH2PO4 NH4Cl 抗生素 步骤 1. 在一个2L烧瓶中,将如下配方中的各成分加入水中, 加热搅拌直至其溶解。 (1)5 X M9培养基,每升 15 g KH2PO4 10 g (NH4)2SO4 68 g KH2PO4 2.5 mg FeSO4 • 7H2O 用KOH调pH至7. 0 (3) 5 X A培养基,每升 5 g (NH4)2SO4 20.5 gKH2PO4 52. 5 g K2 HPO4 2.5 g 二水柠檬酸 (4) 1 X 培养基
玻璃瓶 烧瓶
30 g Na2HPO4
5 g NH4Cl
2.5 g NaCl
15 mg CaCl2 (可加可不加)
(2) 5 X M63培养基,每升
用无菌水稀释5X培养基,并且每升加人以下无菌溶液
1 ml 1 mol/L MgSO4 • 7H20
10 ml 20%碳源(糖或甘油)
2. 倒入玻璃瓶中,拧松盖子,于15 lb/in2 高压灭菌15 min。
3. 待培养基冷却至50°C以下(在这个温度时,手持瓶子可感觉热但能握得住),再加人其他补充成分和抗生素,玻璃瓶冷却至40°C以下,盖紧盖子。
4. 可于室温无限期保存。
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5 ml 20% 酪蛋白水解物(casamino acid)(Difco)或L-氨基酸至40 μg/ml或 DL-氨基酸至80 μg/ml
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