实验方案(Protocols)

极限培养基配制实验

简介

极限培养基是指仅含碳水化合物和提供氮、磷、微量元素的无机盐的培养基。内容来源:精编分子生物学指南第五版。

操作方法

极限培养基配制实验

材料与仪器

水 Na2HPO4 KH2PO4 NH4Cl 抗生素
玻璃瓶 烧瓶

步骤

1.  在一个2L烧瓶中,将如下配方中的各成分加入水中, 加热搅拌直至其溶解。

(1)5 X M9培养基,每升    
                          
30 g Na2HPO4   

15 g KH2PO4   
            
5 g NH4Cl    
                     
2.5 g NaCl    
                    
15 mg CaCl2 (可加可不加)    

(2) 5 X M63培养基,每升

10 g (NH4)2SO4

68 g KH2PO4

2.5 mg FeSO4 • 7H2O

用KOH调pH至7. 0  (3) 5 X A培养基,每升

5 g (NH4)2SO4

20.5 gKH2PO4

52. 5 g K2 HPO4

2.5 g 二水柠檬酸

(4) 1 X 培养基

用无菌水稀释5X培养基,并且每升加人以下无菌溶液

1 ml 1 mol/L MgSO4 • 7H20

10 ml  20%碳源(糖或甘油)
2.  倒入玻璃瓶中,拧松盖子,于15 lb/in2 高压灭菌15 min。

3.  待培养基冷却至50°C以下(在这个温度时,手持瓶子可感觉热但能握得住),再加人其他补充成分和抗生素,玻璃瓶冷却至40°C以下,盖紧盖子。

4.  可于室温无限期保存。 




常见问题

1.   如果需要还可加入以下溶液
 
0. 1 ml 0.5%维生素B1(硫胺素)

5 ml 20% 酪蛋白水解物(casami­no acid)(Difco)或L-氨基酸至40 μg/ml或 DL-氨基酸至80 μg/ml


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Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《极限培养基配制实验》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/extreme-media-preparation-experiment.html
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