异硫氰酸胍(GITC) ——核酸提取与样本保护的关键试剂
异硫氰酸胍(GITC) ——核酸提取与样本保护的关键试剂

异硫氰酸胍(Guanidine isothiocyanate,简称GITC)是一种强变性剂和核酸酶抑制剂,常以高浓度溶液形式用于核酸提取、样本保存、病毒灭活、蛋白质变性和分子诊断前处理等生命科学研究。阿拉丁提供高质量的异硫氰酸胍试剂,本文将从化学性质出发,全面整理GITC的各类实验应用,并对关键实验流程进行技术展开,帮助科研人员准确选择和使用该试剂。
一、由化学性质决定的应用优势
GITC是一种白色结晶性固体,分子式 CH₅N₃·HSCN,分子量 118.16。其具有以下化学特性:
·极强的蛋白变性能力:能破坏蛋白质内部氢键,使蛋白质失活。
·高效RNA酶和DNA酶抑制活性:抑制核酸降解。
·兼具溶胞与裂解能力:破坏细胞膜/病毒衣壳,释放细胞内容物。
·良好的样本稳定性:与其他试剂配合时,可在室温下保护核酸不降解。
正是这些特性,使其在多种生命科学实验中具有不可替代的价值。
二、产品属性
分子式:CH5N3HSCN
分子量:118.160 g/mol
CAS:593-84-0
溶解性:可溶于水和乙醇
密度:1.103
敏感性:易吸潮,对光线敏感
熔点:118-122°C
生化机理:是一种强效蛋白质变性剂,可使内源性核糖核酸酶变性,在从核糖体中分离核糖体核糖核酸(rRNA)时发挥作用。
应用:离液剂(Chaotropic agent)和强变性剂,用于变性裂解细胞;提取RNA和DNA。
结构式:

三、异硫氰酸胍的主要实验应用分类汇总
1. 核酸提取领域
|
2. 样本裂解与核酸保护
|
3. 样本储存与运输
|
4. 核酸酶灭活与实验污染控制
|
5. 病毒灭活与临床前处理
|
6. 蛋白质研究与失活处理
|
7. PCR抑制研究与体系优化
|
四、重点实验详解
以下为几项高频使用实验的详细步骤和要点说明:
实验一:TRIzol法提取RNA
适用样本:细胞、动物组织、血液、唾液等
简要流程:
1.裂解样本:1 mL TRIzol加入样品,吹打或匀浆;
2.加氯仿振荡:加入200 μL氯仿(可用RNA Extraction Buffer 氯仿替代品),剧烈震荡;
3.离心分相:离心形成上层(RNA)、中层(DNA)、下层(蛋白);
5.洗涤与重溶:75%乙醇洗涤,干燥后重悬。
实验二:粪便样本DNA提取(宏基因组或16S)
步骤简述:
1.加入GITC裂解液 → 加入玻璃珠震荡裂解;
2.添加蛋白酶K,37℃孵育;
3.离心去除碎屑 → 上清提取DNA(可配合磁珠);
4.纯化后进行文库构建。
实验三:病毒样本提取与灭活
应用场景:鼻拭子、唾液样本采集后病毒失活。
操作要点:
1.病毒采集液中含有高浓度GITC;
2.样本加入后立即失活 → 减少传染风险;
3.后续磁珠/柱式提取高质量RNA → RT-qPCR分析。
五、推荐配方参考(常用GITC裂解液)
|
六、总结
异硫氰酸胍凭借其蛋白质变性能力、核酸酶抑制效果、广谱样本兼容性与稳定性保护等特性,几乎贯穿于核酸研究、分子诊断、微生物检测、临床样本处理的每一个关键环节。无论是科研人员在RNA测序中追求极限纯度,还是临床实验室在新冠样本处理中关注生物安全,GITC都能提供稳定可靠的支持。
阿拉丁(Aladdin Scientific)提供高品质的GITC产品,适用于从RNA提取到复杂样本处理的全流程需求,支持实验者在多样化应用中获得高质量数据。
危险品化学品经营许可证(带存储)