IgG1 Fc Fragment from Human Myeloma Plasma: Uses & Properties
IgG1 Fc Fragment from Human Myeloma Plasma: Uses & Properties
Immunoglobulin G1 (IgG1), FC Fragment from Human Myeloma Plasma 是一种从骨髓瘤血浆中分离的人源IgG1高纯度Fc区片段,广泛用于免疫学研究、Fc受体结合研究以及抗体工程应用的参考标准。
- 产品货号
- np001063
- 来源材料
- 人骨髓瘤血浆(Athens Research 来源:16-16-090707-1M-FC)
- 片段类型
- IgG1重链恒定区Fc片段(CH2–CH3结构域)
- 免疫球蛋白类别
- IgG1(人源)
- 主要应用
- Fc受体结合实验、同型对照、补体激活研究、抗体工程参考标准
- 储存建议
- 遵照供应商规定条件;长期储存通常为-20°C(请以产品说明书为准)
IgG1 Fc片段是什么?它来源于哪里?
免疫球蛋白G1(IgG1)是人血清中含量最丰富的IgG亚类,在体液免疫中发挥核心作用。Fc(可结晶片段)区域由IgG重链的CH2和CH3恒定结构域组成,负责效应功能,包括与免疫细胞上的Fc gamma受体(FcγR)结合,以及通过C1q激活经典补体途径。
Aladdin Scientific提供的IgG1 Fc片段(货号:np001063)从人骨髓瘤血浆中分离,这是获取均一单克隆免疫球蛋白材料的成熟来源。骨髓瘤来源确保了批次间的高度一致性,以及代表天然人IgG1的确定糖基化谱。该产品参照Athens Research原料(目录参考号16-16-090707-1M-FC),为质量保证提供可追溯性。
由于Fc片段已与抗原结合Fab区域分离,它保留了所有与效应功能相关的结构特征,同时消除了抗原特异性这一干扰变量,使其成为机制研究的理想生化工具。
主要结构与生化特性
人IgG1的Fc片段具有若干重要的结构和生化特性,研究人员在设计实验时应充分了解:
- 结构域组成:Fc由两条相同的重链多肽(每条含CH2和CH3结构域)组成,通过非共价相互作用以及铰链区近端的一个或多个二硫键连接在一起。
- 分子量:IgG1 Fc片段作为二聚体的近似分子量约为50 kDa(具体数值因糖基化差异而有所变化,请以产品说明书为准)。
- 糖基化:人IgG1 Fc的CH2结构域中存在保守的N连接糖基化位点(Asn297,EU编号)。骨髓瘤来源的材料保留了天然人类糖型,这对FcγR和C1q的结合亲和力至关重要。
- Fc受体结合:人IgG1 Fc与激活型受体FcγRI(CD64)、FcγRIIIa(CD16a)高亲和力结合,并在一定程度上与FcγRIIa(CD32a)结合,可用于调理作用和ADCC实验模型研究。
- 补体激活:IgG1 Fc通过与C1q结合激活经典补体途径,支持补体依赖性细胞毒性(CDC)的机制研究。
研究人员应查阅当前产品说明书以获取批次特异性的纯度、浓度和配方详情。
研究应用
来源于人骨髓瘤血浆的IgG1 Fc片段是一种多功能试剂,可应用于多个研究领域:
- Fc受体结合与竞争实验:用于表征FcγR亚型、定位结合表位以及开发竞争抑制实验。骨髓瘤来源Fc的天然糖基化特征,使其在此类研究中优于在非人表达系统中产生的重组Fc。
- 同型对照与封闭试剂:用于在免疫实验(ELISA、流式细胞术、免疫荧光)中封闭非特异性Fc受体介导的结合,降低背景信号,提高实验特异性。
- 补体途径研究:作为明确的底物,用于研究C1q结合、C1复合物组装以及下游补体激活步骤,同时避免了完整抗体的复杂性干扰。
- 抗体工程与生物医药开发:为Fc融合蛋白、Fc改造抗体及生物类似药开发项目提供人IgG1 Fc参考标准。
- 结构生物学:用于Fc–FcγR或Fc–FcRn复合物的晶体学和冷冻电镜研究,作为来源于人类血浆的结构特征明确的片段。
每次实验前,请通过适当的对照验证每个批次是否适合您的具体应用。
操作、储存及质量注意事项
正确操作和储存IgG1 Fc片段对于维持生物活性和实验重现性至关重要:
- 储存温度:冻干或浓缩蛋白制品通常建议在-20°C长期储存。避免反复冻融循环,否则可能导致聚集和结构完整性丧失。请参阅产品说明书了解该批次的确切推荐条件。
- 复溶:如以冻干形式提供,请用说明书指定的缓冲液复溶,短暂在室温平衡后轻柔混匀,切勿涡旋振荡。
- 蛋白聚集:如需精确的单体Fc,可通过尺寸排阻色谱或动态光散射监测聚集情况。聚集的Fc可交联Fc受体,干扰实验结果。
- 内毒素水平:对于基于细胞的实验,请确认内毒素水平在可接受范围内(通常<1 EU/mg),以避免非特异性炎症反应。
- 批次可追溯性:该产品参照Athens Research原料(16-16-090707-1M-FC)。请保留批号文件以用于法规合规和重现性记录。
使用前请务必查阅安全数据表(SDS)和当前产品说明书。
常见问题
IgG1 Fc片段与完整IgG1有何区别?
完整的IgG1由两个Fab片段(负责结合抗原)通过铰链区与Fc区域相连组成。分离的Fc片段完全缺乏Fab区域,这意味着它不能结合抗原,但完全保留了所有Fc介导的效应功能,包括FcγR结合和补体激活。这使得Fc片段非常适合专门针对Fc生物学的研究,同时消除了抗原结合这一干扰变量。
为什么优先选择骨髓瘤血浆作为IgG1 Fc片段的来源?
与多克隆血清来源的IgG相比,骨髓瘤血浆提供单克隆来源的免疫球蛋白,确保了高度均一性和批次间一致性。此外,骨髓瘤来源的材料在Asn297处保留了真实的人类糖基化模式,这对Fc受体和补体相互作用至关重要。在非人细胞系中产生的重组Fc可能携带非人糖型,从而改变结合特性。
IgG1 Fc片段可用作免疫实验中的封闭试剂吗?
是的,IgG1 Fc片段常用于封闭免疫实验(如流式细胞术和免疫荧光)中非特异性Fc受体介导的结合,尤其是在表达FcγR的细胞上使用含Fc检测抗体时。Fc片段通过饱和可用的Fc受体来降低背景染色。最佳封闭浓度和孵育条件应针对每种实验系统通过实验确定。
收到IgG1 Fc片段后如何验证其完整性?
收货后,检查小瓶的物理完整性并确认运输过程中的储存条件。推荐的质量检查包括:在还原和非还原条件下进行SDS-PAGE以确认分子量和纯度,以及进行尺寸排阻HPLC或DLS以评估聚集状态。如对您的应用至关重要,可通过Fc受体结合ELISA或SPR进行功能验证。请始终将结果与该批次随附的分析证书进行对比。
参考文献
- Janeway CA Jr, et al. Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. 5th ed. New York: Garland Science; 2001. Chapter on antibody structure and function.
- Jefferis R. Glycosylation as a strategy to improve antibody-based therapeutics. Nat Rev Drug Discov. 2009;8(3):226-234. doi:10.1038/nrd2804
- Bruhns P, et al. Specificity and affinity of human Fc gamma receptors and their polymorphic variants for human IgG subclasses. Blood. 2009;113(16):3716-3725. doi:10.1182/blood-2008-09-179754
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)