实验方案(Protocols)

IgG2 from Normal Human Plasma: Preparation & Use Protocol

Immunoglobulin G2 (IgG2) from Normal Human Plasma is 一种高纯度人IgG亚类蛋白,原料血浆来自美国FDA认证采血中心,并依据现行FDA供体筛查及病毒检测法规制备,是免疫学研究中可靠的参考标准品和同型对照。

产品名称
正常人血浆来源免疫球蛋白G2(IgG2)
Athens货源参考编号
16-16-090707-2
原料来源
来自美国FDA认证采血中心采集的正常人血浆
法规符合性
供体筛查及病毒检测均按现行FDA法规执行
IgG亚类
IgG2(四种人IgG亚类之一)
产品编号
np001060

产品概述与背景

免疫球蛋白G2(IgG2)是人类IgG四种亚类(IgG1、IgG2、IgG3和IgG4)之一。在健康成人血清中,IgG2约占总IgG的20–25%,其特征为铰链区较短,结构刚性较强,从而影响其效应功能。IgG2抗体主要在胸腺非依赖性多糖抗原刺激下产生,因此在抗菌免疫及疫苗研发研究中具有重要意义。

本产品(货号:np001060;Athens参考编号:16-16-090707-2)由汇集的正常人血浆纯化制备,原料血浆全部来自美国FDA认证采血中心。所有原料血浆均按照现行美国FDA法规进行严格的供体筛查和病毒检测,确保高度安全性和批次一致性,适用于科学研究。

所需材料与仪器设备

在使用正常人血浆来源IgG2开展实验之前,请确保已备齐以下材料与仪器设备:

  • 正常人血浆来源IgG2(np001060,Aladdin Scientific)
  • 无菌磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4),用于复溶和稀释
  • 微量离心管(1.5 mL或2.0 mL,建议使用低蛋白结合型)
  • 经校准的微量移液器及无菌吸头
  • 冷冻微量离心机
  • 紫外-可见分光光度计或BCA/Bradford蛋白定量试剂盒(用于浓度验证)
  • SDS-PAGE凝胶系统及Western印迹装置(如需纯度验证)
  • 适合下游检测的二抗试剂(如抗人IgG辣根过氧化物酶偶联物)
  • 个人防护装备(PPE):实验服、手套、护目镜

所有人源材料应按照潜在传染性物质处理,须遵守所在机构的生物安全规定。

分步操作方案

第1步 – 复溶(如为冻干品)
开瓶前,将小瓶在室温下平衡10–15分钟。按产品说明书规定的体积,用无菌超纯水或PBS(pH 7.4)复溶冻干蛋白。轻轻缓慢颠倒混合或用移液器吹打,切勿涡旋振荡,以免引起蛋白聚集或变性。静置5–10分钟至完全溶解。

第2步 – 浓度验证
使用280 nm紫外吸光度(参照说明书提供的消光系数)或比色法(BCA或Bradford法)测定蛋白质浓度。将实测值与标注批次浓度对比,确认收货时产品的完整性。

第3步 – 分装与储存
制备单次用量分装,以减少反复冻融次数(反复冻融会降低蛋白完整性)。短期使用时于–20 °C保存,长期储存于–80 °C。建议最多冻融次数不超过3次。请勿使用无霜冰箱储存。

第4步 – 工作液配制
根据具体应用需求(如ELISA、流式细胞术、Western印迹、同型对照等),用无菌PBS或适合该检测的缓冲液将储液稀释至所需工作浓度。用于同型对照时,应与实验抗体浓度严格一致。

第5步 – 使用前质量检查
每次使用前目视检查溶液是否出现聚集颗粒或浑浊。如怀疑有聚集,在4 °C条件下以10,000 × g短暂离心5分钟,仅使用澄清上清液。

应用场景与实验指导

正常人血浆来源IgG2适用于多种免疫学研究应用,包括但不限于:

  • 同型对照:用作流式细胞术、免疫组织化学(IHC)、免疫荧光(IF)和ELISA中的阴性同型对照,以区分特异性抗体结合与非特异性背景信号。
  • 免疫检测校准与标准化:作为参考标准品,用于建立IgG2特异性ELISA或比浊法检测的定量曲线。
  • 结构与生物物理学研究:适用于研究IgG亚类特异性铰链区柔性、糖基化模式及Fc受体相互作用。
  • 补体激活研究:与IgG1和IgG3相比,IgG2激活经典补体途径的能力有限;本产品可用于亚类效应功能的比较研究。
  • 疫苗研究:可作为参考蛋白,用于研究多糖抗原诱导的体液免疫应答。

最佳使用浓度和实验条件应针对每种具体应用和仪器平台通过实验摸索确定。

安全性、储存及法规说明

生物安全:本产品来源于正常人血浆。尽管供体筛查和病毒检测均按照现行FDA法规执行,但任何检测方法均不能保证完全排除所有传染性病原体。所有人源材料至少应在生物安全二级(BSL-2)条件下操作,并遵守所在机构的生物安全规定及适用的当地法规。

储存条件:按产品说明书规定储存。纯化免疫球蛋白的典型储存条件为–20 °C至–80 °C。避免反复冻融。工作液可在2–8 °C短期储存(一般不超过1周);在特定检测缓冲液条件下的稳定性应另行验证。

法规声明:原料血浆来自美国FDA认证采血中心,供应商按现行FDA要求对供体进行筛查和病毒检测。本产品仅供科学研究使用(RUO),不用于人体或动物的诊断、治疗或临床用途。

废弃物处理:所有人源生物材料的废弃处理须符合所在机构、地方及国家有关生物危害废物处置的法规要求。

常见问题

该IgG2产品的来源及法规符合情况如何?

本IgG2(np001060;Athens参考编号16-16-090707-2)由来自美国FDA认证采血中心采集的正常人血浆纯化制备。供应商严格按照现行FDA法规进行供体筛查和病毒检测,为研究应用提供高标准的质量保证和可溯源性。

正常人血浆来源IgG2能否用作流式细胞术中的同型对照?

可以。人IgG2常用作流式细胞术、IHC、IF和ELISA实验中的阴性同型对照。用作同型对照时,必须将IgG2对照的浓度与目标一抗浓度严格匹配,以确保非特异性背景信号比较的有效性。

正常人血浆来源IgG2应如何储存以保持蛋白完整性?

产品应按说明书规定条件储存,通常短期于–20 °C、长期于–80 °C保存。为保持蛋白完整性,建议制备单次用量分装以避免反复冻融(反复冻融可导致聚集和活性丧失)。用PBS配制的工作液应及时使用,或于2–8 °C储存,保存时间不超过一周。

该产品在标准实验室环境中操作是否安全?

所有人血浆来源材料均存在固有的(尽管受到监管的)生物危害风险。尽管本产品原料血浆已经过符合FDA要求的供体筛查和病毒检测,仍应视为潜在传染性物质处理。至少应在BSL-2条件下操作,佩戴适当个人防护装备(实验服、手套、护目镜),并按照所在机构和监管机构的生物危害废物处理规定处置废弃物。

在免疫学研究中,IgG2与其他IgG亚类有何区别?

IgG2的特征是具有较短的刚性铰链区,限制了Fab区域与Fc区域之间的柔性,从而影响其激活补体和与Fc受体相互作用的能力。与IgG1和IgG3不同,IgG2激活经典补体途径的能力有限。在功能上,IgG2抗体主要由胸腺非依赖性多糖抗原诱导产生,使其在抗荚膜抗体应答及肺炎球菌或脑膜炎球菌疫苗免疫原性研究中尤为重要。

参考文献

  1. Jefferis R, Kumararatne DS. Selective IgG subclass deficiency: quantification and clinical relevance. Clin Exp Immunol. 1990;81(3):357-367.
  2. Vidarsson G, Dekkers G, Rispens T. IgG subclasses and allotypes: from structure to effector functions. Front Immunol. 2014;5:520.
  3. Schur PH. IgG subclasses: a review. Ann Allergy. 1987;58(2):89-96, 99.
  4. Athens Research & Technology. Product Reference 16-16-090707-2: Immunoglobulin G2 (IgG2) from Normal Human Plasma. Supplier documentation.

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

目录: 实验方案(Protocols)

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《IgG2 from Normal Human Plasma: Preparation & Use Protocol》. 阿拉丁知识库,更新于 2026年9月21日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/igg2-normal-human-plasma-protocol.html
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