水中细菌总数测定是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌的总数。水中细菌总数可作为判定被检水样被有机物污染程度的标志，细菌数量越多，则水中有机质含量越大，一般是以平板菌落计数法测定水中细菌总数。本实验的目的是学习并掌握水样的采集和水样中细菌总数的测定方法并了解水质状况与细菌数量在饮水中的重要性。

操作方法

平板菌落计数法

原理

水中细菌总数测定是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌的总数。水中细菌总数可作为判定被检水样被有机物污染程度的标志，细菌数量越多，则水中有机质含量越大。本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。以1 ml水样在营养琼脂培养基中，于37 ℃培养24 h后所生长的细菌菌落的总数，作为水体受细菌污染程度的标志，我国规定1 ml自来水中细菌总数不得超过100个。

材料与仪器

水 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
牛肉膏 蛋白胨 氯化钠 琼脂 蒸馏水 盐酸 氢氧化钠
三角瓶 带玻璃塞瓶 培养皿 移液管 试管

步骤

一、水样的采集与保藏
自来水：先将自来水龙头用火焰烧灼 3 min灭菌，然后再放水5-10 min，最后用无菌容器接取水样，并速送回实验室检测。
二、水中细菌总数测定
自来水：用无菌移液管吸取1 ml水样，加入无菌培养皿中（每个水样重复3个培养皿），然后在每个上述培养皿内各加入约15 ml已融化并冷却至45-50 ℃的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，并轻轻旋转摇动，使水样与培养基充分混匀，冷凝后即成检测平板。然后将其倒置于37 ℃恒温箱内培养24 h。
三、计菌落数
将培养24 h的平板取出，用肉眼观察，计平板上的细菌菌落数（计数时，对那些看来相似、距离很近但不相触的菌落，应一一计数。那些紧密接触而外观相异的菌落，也一一计数）。

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