杆状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒，病毒粒子呈杆状，基因组为双链环状DNA分子，DNA以超螺旋形式压缩包装在杆状衣壳内，大小在90~180 Kb 之间。目前杆状病毒作为高效、安全的无公害生物虫剂广泛应用于害虫防治。

操作方法

基本方案

材料与仪器

杆状病毒
琼脂糖
解剖显微镜 倒置显微镜

步骤

解剖显微镜下筛选   1.  倒转蚀斑平皿，使其处于显微镜的黑色背景下，以锐角向平皿照射一束亮光。

2.  检查野生型病毒感染的细胞中含有包涵体的蚀斑，这种蚀斑看上去折光性强，带有轻微的黄色。

3.  检查β-gal 重组病毒感染的细胞中不含包涵体的蚀斑，其颜色呈灰色。

4.  圈出平皿中覆盖蚀斑的区域，以400x的倍数在倒置显微镜下检查圈出的蚀斑，以锻炼用裸眼分辨出每一蚀斑形态上的细微之处。 

用倒置光学显微镜筛选   1.  将蚀斑平皿右侧稍抬起向上，以30x和40x的倍数检查每一类型的蚀斑。

2.  重组蚀斑带有桔红色，而野生型蚀斑由于包涵体的聚集而具有暗褐色外现。

3.  在显微镜下见到蚀斑时， 在平皿上蚀斑下的区域点一点，从显微镜下移去平皿，围出蚀斑。

4.  将平皿倒转放在显微镜载物台上并以400x的倍数观察蚀斑。   直接用裸眼筛选   1.  如果蚀斑形成较好，将平皿举过头顶，直接观察平皿底部，有可能从重组蚀斑中辨别出野生型蚀斑。

2.  野生型蚀斑周围的区域看上去呈灰白色，而重组的蚀斑则不会。   3.  用任一种上述方法鉴定出假定的重组病毒蚀斑后，挑取几个蚀斑，将琼脂糖块置于1 ml 无血清培养基中，在旋涡混合器上振荡混匀，病毒液可于4℃贮存数月备用。

如需了解更多产品详情，请前往阿拉丁官网查询。

https://www.aladdin-e.com