实验方案(Protocols)

质粒提取

简介

从细菌中提纯质粒DNA

原理

强碱性条件下,质粒DNA和基因组DNA同时从细胞中释放出来,并发生变性。在pH中性,并有高盐浓度存在的条件下,质粒DNA会迅速发生复性,仍为可溶性状态,染色体DNA之间交联形成不溶性网状结构,在去垢剂SDS作用下,染色体DNA与变性蛋白质和细胞碎片结合形成沉淀,通过高心去除沉淀后,再用酚氯仿抽提进一步纯化质粒 DNA,用异丙醇或乙醇沉淀可将之纯化出来。

应用

质粒提取

操作方法

碱裂解法(质粒提取)

材料与仪器

溶液I 50mmol/L葡萄糖 25mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 10mmol/LEDTA(pH8.0)

步骤

(一)细菌培养物的生长;(二)细菌的收获和裂解;( 三) 质粒DNA 的纯化

注意事项

溶液I可成批配制,每瓶约100ml,在10lbf/in2(6.895×104Pa)高压下蒸气灭菌15分钟,贮存于4℃。须确使细菌沉淀在溶液I中完全分散,将两个微量离心管的管底部互相接触震荡,可使沉淀迅速分散。


如需了解更多产品详情,请前往阿拉丁官网查询。

https://www.aladdin-e.com

目录: 实验方案(Protocols)
探索主题: DNA 实验

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《质粒提取》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/plasmid-extraction.html
这篇文章对您有帮助吗? Yes No 有 0 人觉得有帮助