本实验来源「实用流式细胞术彩色图谱」 王书奎、周振英主编。

操作方法

细胞蛋白质总量样品的制备及分析

步骤

取 20 mg 异硫氰酸荧光素，加 20 ml 无水乙醇，使 FITC 充分溶解，即为染色液的原液，保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下：

1. FITC 贮存液的稀释：用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓度的工作液，备用。

2. 被染色细胞首先用 70% 酒精破膜，作用 10 min，使 FITC 染料能进入到细胞中。

3. 用离心法以 PBS 液洗去破膜剂，离心收集细胞。

4. 再取 FITC 工作液 2 ml 加入样品中，混匀，置 4℃ 冰箱中反应 30 min。

5. 用 PBS 液以 1500 r/min 离心 5 min，洗去染色液，再离心去上清。

6. 再加 0.5 ml PBS，混匀，上机检测。

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