Sheen 和 Seed(1980) 创造了一种既聪明又简单的改进方法，利用顶部和底部不同浓度的电泳缓冲液在胶中产生离子梯度，而胶本身的浓度是一定的。利用此法，从单块凝胶上可以读取的核苷酸总数可增加约 30%。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

操作方法

配制电解质梯度胶实验

材料与仪器

本方法包括方案 8 中所有物品 加上： 甲酰胺（100%) 离子梯度胶 醋酸钠

步骤

材料

本方法包括方案 8 中所有物品，加上：
甲酰胺（100%)

离子梯度胶用 1XTBE 配制，有无甲酰胺均可。关于含甲酰胺的聚丙烯酰胺凝胶，请见方案 9。

醋酸钠（3mol/L,PH7.0)

方法

1. 依方案 8 步骤 1~8。

2. 在实验桌的工作区上铺上衬塑料的保护纸。

3. 参照方案 8 或 9 配制变性聚丙烯酰胺凝胶。

4. 将胶放在电泳装置中。在上槽中加入 0.5XTBE 缓冲液，在下槽中加入 1 份 3mol/L 醋酸钠和 2 份 1XTBE。按照方案 11 操作。
电泳时，指示染料的移动逐渐变慢，当溴酚蓝到达底部时，移动几乎停止。一般，继续电泳直到二甲苯蓝离底部只有 5~10 cm 而溴酚蓝到了底部。
推迟加入 3mol/L 醋酸钠可以调整压缩 DNA 条带的时间。电泳开始时，上下槽都用 1XTBE; 在适当时候，在下槽加入一半体积的 3 醋酸钠。根据经验，这样可以压缩条带的不同区域，读出最多的条带。

如需了解更多产品详情，请前往阿拉丁官网查询。

https://www.aladdin-e.com