大多数细胞系在pH7.4生长最好,不同细胞株之间差别不大;但一些正常成纤维细胞系在pH7.4~7.7生长最好.而一些转化细胞可能在pH7.O~7.4生长得会更好些「Eagle1973].据报道上皮细胞可以维持在pHS.5〔Eisinger et al.,1979〕,但这一标准尚未得到普遍认可.对于一些特殊悄况,可通过简单的生长试验、接种率分析或特异性功能分析来确定适宜的pH，这对特殊细胞的生长可能更为有利。

操作方法

pH标准色阶的制备实验

原理

酚红是常用的一种指示剂。在pH7.4时，它呈红色；pH7.0时，变成橘红色；pH6.5呈黄色；低于pH6.5时，呈柠檬黄；pH7.6呈桃红色；pH7.8呈紫红色。由于颜色的判断有较高的主观性，制作一个标准色阶是很有用的：可以用灭 菌的平衡盐溶液（BSS）及酚红按常规浓度配制，装在相同的瓶子里，上端剩余的空间也相同，一般在配制培养基时可以使用它。以下方案是以使用25。耐的培养瓶为例。

步骤

材料

无菌的

Hank's平衡盐溶液(HBSS),或Eagle's MEM 10倍浓缩液,不含碳酸盐或葡萄精.含有20mmol/LHEPES 10ml

超纯水(UPw)90ml

1mol/L NaOH 10ml

常用容器,30ml

培养瓶.25cm2

加样器吸头,100闪

非无菌物品

PH计

加样器吸头,10~100ul

操作步骤

1.配制H冷汽或培养基,pH6.5或稍低于6.5,分装至7个标记好的常用容器中.

2.使之在空气中平衡30min.

3.用lmol/LNaOH H将各容器中的液体分别调节至pH6.5、6.8、7.0、7.2、7.4、7.6、7.5,以pH计侧试.

4.取每种HBSS过滤除菌,收集 5m!分装至标记好的培养瓶内,收集之前先用 5ml冲洗滤器.

5.将培养瓶盖好.

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