文库一旦包装就应该尽快进行扩增，它可以大大增加文库的拷贝数，但在扩增时由于克隆的生长速率不同，文库的组成可能会出现某种潜在的改变。这种文库克隆组成比率的变化可以通过把文库克隆预吸附到细菌上并使用一种高密度铺平板和短期培养的方法而尽量减少。

操作方法

基本方案

材料与仪器

质粒
LB 抗生素
涂布棒 硝酸纤维滤膜

步骤

1.  通过原位杂交检测硝酸纤维索滤膜上影印菌落。

2.  用无菌的牙签挑出阳性克隆，接种到含适当抗生素的1 ml 冷的LB培养基中，保存在4℃抑制细菌生长。

3.  取1~25 μl 菌悬液涂布在含有相同抗生素的平板上，37℃培养过夜，在直径100 平板上长出25~250个菌落为宜。

4.  将菌落影印在硝酸纤维素滤膜上，变性、复性、烤膜和杂交化。   5.  对照次级平板的放射自显影结果，挑选独立的阳性克隆，培养扩增后分离质粒或粘粒的DNA。

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