RTCA实时检测活细胞的活性

原理

应用

增殖及细胞毒性
迁移及浸润
肿瘤与微环境-共培养
信号通路
肿瘤免疫-细胞免疫

操作方法

实时无标记动态细胞分析技术

材料与仪器

【仪器】xCELLigence或iCELLigence 细胞功能分析仪及对应的E-Plate检测板、超净工作台、CO2培养箱、低速离心机、移液器、细胞计数板、光学显微镜。

步骤

1、向E-Plate检测板中加入培养基并测定背景阻抗值。2、收集对数期细胞并计数，调整细胞悬液浓度，向E-Plate检测板中加入一定 体积的细胞，室温超净台内放置30min。3、将加入细胞的E-Plate检测板放入检测台上（检测台预先放入培养箱中）， 进行实时动态的细胞增殖检测。4、过夜检测后，向各培养孔中加入配制好的梯度药物并继续进行实时动态检测， 即可获得化合物介导的细胞效应曲线及不同时间段IC50值。

注意事项

可通过对细胞增殖及毒性的实时检测，确定细胞变化的关键时间点，检测后的细胞样品可用于细胞形态学观察、Western blot、Elisa、细胞凋亡及免疫荧光等细胞检测实验。

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