本实验方法来源于第四军医大官方网站

操作方法

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

步骤

根据实验方案诱导细胞凋亡，制备单细胞悬液，使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒，通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸（PS）的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。

1． 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×，冰育。

2． 悬浮细胞在低温环境中，用PBS洗涤细胞2次（800～1000rpm离心，5min）。

3． 弃上清，加入490μl预冷的结合缓冲液重悬细胞（细胞浓度为105～106／ml）。

4． 加入5μl Annexin V-FITC和5μl PI于细胞悬浮液中，轻轻混匀。

5． 将试管置于冰上，避光孵育10分钟。

6． 上FCM检测。

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