要得到合适的信号强度，可根据 DNA 片段的大小调节 DNA 的用量。适用于 ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 和 GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems) 热循环仪。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

操作方法

测序反应实验

材料与仪器

循环测序试剂盒 引物和模板
薄壁 PCR 管 热循环仪 GeneAmpPCRSystem9700 仪

步骤

一、材料

1. 缓冲液和溶液

ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 或其他循环测序试剂盒

2. 核酸和寡核苷酸

引物和模板

3. 特殊设备

DNA 扩增用薄壁 PCR 管

热循环仪，GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems) 仪或相当产品

二、方法

1. 将适量（如上所述）的引物和模板加入到 PCR 管中。

2. 每管加入 4ul Terminator Ready Reaction mix。

这是说明书中推荐用董的一半，这一用董已经足够，而且节省试剂。

3. 用去离子水补至 20ul, 混匀，稍离心。

4. 在 GeneAmp PCR System 9700(Applied Biosystems) 或相当产品的仪器上，执行下列程序。

5. 上步反应结束后，反应产物可立即纯化或-20°C 保存以备将来纯化。

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