本实验来源于：动物细胞培养--基本技术指南（第五版）

操作方法

方案11.14用大型串联式过滤器灭菌过滤

材料与仪器

串联式过滤器 培养基瓶 盖子 容器 蠕动泵 硅树脂管 架子

步骤

1. 安放好过滤架（保护滤器的夹子和夹子架（除非滤器架子有腿））。

2. 将出口与接受瓶（底部有出口的过滤接受容器）相连。

3. 将过滤器（如 90 mm 膜和可重复使用的过滤器支架，或一次性碟式过滤器或筒式过滤器）的出口放到合适的高度，使收集培养基的瓶子（培养基瓶，铝箔包裹，干热法灭菌）正好位于过滤器下方，瓶口可被钟罩盖住，并且当装满的时候可以很容易地将瓶子取出。如果需要，可先用一个无菌培养瓶进行调试，但最后不要用这个瓶子收集无菌液。

4. 将压力瓶与过滤器的入口连接起来。

5. 将培养基缓慢地倒入压力瓶（5〜50L）中。

6. 对于可重复使用的过滤器，要将泵（100 kPa (1 bar，15 p. s. i.)）打开足够长的时间，使滤器湿润。然后将泵关闭并拧紧过滤架。

7. 将泵打开调到 100 kPa (15 lb/in² )。当接受容器（底部有出口的过滤接受容器）快装满时，打开管子（硅树脂耐压管）接到培养基储存瓶中。

8. 从过滤钟罩下取出瓶子盖好。

9. 将铝箔重新包在盖子（培养基瓶的盖子，高温高压灭菌）上，包到瓶颈处以保证保存时无尘。

10. 在瓶子上贴标签，标注日期，签名。

11. 根据过滤后收集瓶子的大小及数量，在过滤的开始阶段、中段、末段分别从瓶中取样品置于 37°C 孵育一周做污染检测。

12. 4°C 保存备用。质量控制完成前不要使用。

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