本实验来源于：动物细胞培养--基本技术指南（第五版）

操作方法

方案11.4过滤装置的灭菌

材料与仪器

过滤器外壳 架子 预过滤器 玻璃纤维 尼龙袋 高压灭菌无菌指示胶带 消毒锅

步骤

1. 用清洁剂完全淸洗后，用水冲洗过滤装置，然后用去离子水冲洗，并晾干。

2. 在过滤器中插入滤板，然后将过滤膜放到滤板上，如果过滤膜是由多聚碳酸盐制成的，要弄湿以消除静电。

3. 将预过滤器（玻璃纤维和其他需要的物质）放在过滤器的顶端。

4 . 安装过滤器支架，不要完全拧紧（可以留一个螺圈）。

5. 过滤器的进口与出口均用铝箔封住。

6. 用消毒纸或蒸汽可渗透的尼龙膜将过滤装置包好，贴上无菌指示胶带。

7. 在 121°C ，100kPa (1 bar，15 lb/in²) 髙压灭菌 20 min ，不进行前真空和后真空的循环步骤（使用自动高压灭菌器时，要用“液体循环”这个程序）。

8. 将滤器取出，然后冷却。

9. 在过滤开始，过滤膜已经湿了的时候，才能将过滤器架子完全拧紧。

注意事项

1. 灭菌方法的选择许多塑料器皿不能高压灭菌或干热灭菌，因为温度太髙。这类器皿灭菌时，要先在 70 % 的乙醇中浸泡 30 min ，然后放在层流罩内，在紫外灯照射下晾干。在处理一些塑料器皿（比如，树脂玻璃、塑胶玻璃、透明合成树脂）时要特别小心，因为它们在乙醇中或暴露在紫外灯下时会解聚。乙烯氧化物可用于塑料器皿的灭菌，但是灭菌后需要二~三周才能将其从塑料表面全部清洗掉。塑料器皿最好的灭菌方法为 y-射线照射，标准为 25 kGy。器皿应包装和密封，可用聚乙烯塑料包装，热焊接封口。

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