常见问题(FAQs)

总抗氧化能力快速检测试剂盒（ABTS，微量法）常见问题

· · 发布于 2026年10月22日 · 更新于 2026年10月22日 ·

Total Antioxidant Capacity Rapid Detection Kit (ABTS, Micro Method) 是一种灵敏的微量比色法检测试剂盒，专为在微孔板格式中通过测量ABTS自由基清除活性来定量生物及食品样品的总抗氧化能力而设计。

货号: T1508390
检测方法: ABTS自由基清除比色法
检测格式: 微孔板（微量法）
应用范围: 血清、血浆、组织、细胞裂解液及食品/植物提取物中总抗氧化能力的定量检测
检测波长: 734 nm（ABTS法典型检测波长）
供应商: Aladdin Scientific

检测原理与概述

总抗氧化能力快速检测试剂盒（ABTS，微量法）基于ABTS（2,2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)）自由基清除法原理。在该检测中，ABTS被氧化生成稳定的蓝绿色ABTS自由基阳离子（ABTS•⁺）。样品中的抗氧化物质能够还原并使ABTS•⁺脱色，脱色程度与抗氧化物的浓度和抗氧化能力成正比。通过分光光度法（通常在734 nm处）测定脱色程度，并以标准品（通常为水溶性维生素E类似物Trolox）为参照，将总抗氧化能力表示为Trolox当量抗氧化能力（TEAC）。

微量法格式将检测体系缩小至96孔微孔板规格，在减少试剂和样品用量的同时实现高通量检测，特别适合样品量有限或珍贵的实验室使用。

适用样品类型与制备

本试剂盒适用于多种生物及非生物样品基质，包括：

血清和血浆
尿液
组织匀浆
细胞裂解液
植物和食品提取物
饮料及其他水溶液

准确的样品制备对获得可靠结果至关重要，主要建议如下：

避免溶血：血液来源样品中红细胞成分会干扰吸光度读数。
去蛋白处理：高蛋白含量样品可能需要去蛋白以降低背景干扰。
稀释：总抗氧化能力极高的样品应在标准曲线线性范围内适当稀释后再进行检测。
新鲜样品为最佳选择；应尽量减少冻融循环次数。如需储存，应在液氮中速冻后置于−80 °C保存。
富含脂质的样品可能需要额外处理步骤以确保完全溶解并获得准确检测结果。

操作流程概述

以下为ABTS微量法检测的一般操作流程概述。请始终参照试剂盒说明书（货号T1508390）中关于具体用量、孵育时间及试剂配制的官方指导。

试剂准备：将所有试剂盒组分恢复至室温。按说明书配制ABTS工作液（通常将ABTS储备液与氧化剂（如过硫酸钾）混合，避光反应至稳定）。
标准曲线制备：配制一系列Trolox标准稀释液，在预期样品抗氧化能力范围内建立标准曲线。
加样：按说明书规定体积，将标准品、空白对照及样品分别加入微孔板对应孔中。
加入工作液：向各孔加入ABTS工作液，轻轻混匀。
孵育：按规定温度和时间孵育（通常为室温，避光）。
吸光度检测：使用酶标仪在734 nm处读取吸光度值。
结果计算：根据Trolox标准曲线计算样品抗氧化能力，并以mmol Trolox当量/升（或每克组织/蛋白，视样品类型而定）表示结果。

储存、稳定性及操作注意事项

正确储存和操作试剂盒组分对于维持试剂性能和检测可靠性至关重要。

储存温度：请参照说明书中各组分的具体储存要求。通常ABTS试剂应在2–8 °C或−20 °C（按各组分规定）避光保存。
稳定性：请勿使用超过试剂盒标签上有效期的试剂。ABTS自由基溶液在长时间暴露于光、热或潮湿环境中会发生降解。
避免污染：每种试剂使用独立的移液器吸头，不得将未使用的工作液返回储备液瓶中。
光敏感性：ABTS自由基阳离子对光敏感，工作液应在使用前临时配制，孵育过程中应遮光处理。
安全性：按照标准实验室安全规程操作所有试剂。使用前请查阅各组分的安全数据表（SDS）。

常见问题排除

如果出现异常结果，请参考以下故障排除建议：

问题现象	可能原因	建议措施
信号低或无信号	ABTS工作液配制不当或已降解	重新配制ABTS工作液；使用前确认其呈蓝绿色
背景/空白吸光度偏高	试剂或器皿污染；ABTS溶液暴露于光照	使用新鲜试剂；全程避光操作
标准曲线非线性	Trolox稀释错误；加样误差	使用校准移液器重新配制标准品；确保稀释准确
复孔间变异大	混匀不充分；孵育时间不一致	每次加样后充分混匀；各孔在相同时间窗口内完成操作
样品读数超出标准曲线范围	样品抗氧化能力过高	稀释样品后重新检测；计算时乘以相应稀释因子
样品基质本身有颜色干扰	样品固有颜色（如植物提取物）	设置样品空白（不加ABTS试剂的样品孔）并扣除背景吸光度

常见问题

ABTS微量法总抗氧化能力检测试剂盒的检测原理是什么？

本试剂盒基于ABTS自由基清除原理：ABTS被氧化生成稳定的蓝绿色ABTS自由基阳离子（ABTS•⁺），样品中的抗氧化物质可使其脱色。在734 nm处测定脱色程度，该值与总抗氧化能力成正比，结果以Trolox当量抗氧化能力（TEAC）表示。

本试剂盒适用于哪些样品类型？

本试剂盒适用于血清、血浆、尿液、组织匀浆、细胞裂解液、植物提取物、食品提取物及饮料等样品。样品应新鲜或妥善冷冻保存，颜色较深或高蛋白含量的样品在检测前可能需要稀释或去蛋白处理。

为什么我配制的ABTS工作液不呈蓝绿色或迅速褪色？

ABTS工作液褪色通常表明其因光照、受到抗氧化物污染或配制不当而降解。请严格按照说明书配制ABTS自由基溶液，全程避光操作，并在规定时间内使用。如确认已降解，请重新配制工作液。

总抗氧化能力结果应如何计算和表示？

总抗氧化能力通过将样品吸光度值代入Trolox标准曲线进行计算。液体样品结果通常以mmol Trolox当量/升（mmol TE/L）表示，固体样品则以每克组织或每毫克蛋白为单位表示。最终计算值需乘以相应的样品稀释因子。

试剂盒各组分的推荐储存条件是什么？

各组分的储存条件不同，请参照说明书中的具体说明。一般而言，ABTS相关试剂应按规定在2–8 °C或−20 °C避光保存，且不得超过有效期使用。冷冻组分应避免反复冻融。

参考文献

Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang M, Rice-Evans C. Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay. Free Radical Biology and Medicine. 1999;26(9-10):1231–1237. doi:10.1016/S0891-5849(98)00315-3
Aladdin Scientific. Product Insert: Total Antioxidant Capacity Rapid Detection Kit (ABTS, Micro Method), SKU T1508390.

产品仅供科研与开发使用，不用于人体、动物、诊断或治疗。

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探索主题：检测试剂盒微量法氧化应激抗氧化检测 ABTS法总抗氧化能力

Da — 若无特别说明，分子量单位默认为道尔顿。 Mw — 重均分子量。 Mn — 数均分子量。