简介

         三(3-羟基丙基三唑甲基)胺（THPTA）是一种水溶性配体，被广泛用于促进铜催化的炔吖啶环化反应（CuAAC），这是一种典型的生物正交反应，对生命系统无干扰。

​

         从机理上看，是 THPTA 铜（I）复合物加速了 CuAAC 过程。使用 THPTA 的 CuAAC 不仅适用于亲水性聚合物的改性和含有叠氮基团的肽的生物连接，还适用于在活细胞表面快速标记代谢融入的叠氮或炔标签。

​

表 1. 寡聚物合成反应速率比较

样本方案​
         1. 制备以下点击溶液
         - 0.2M THPTA 配体水溶液
         - 0.1M CuSO4 水溶液
         - 水中的炔基标记寡聚物
         - 0.1M 抗坏血酸钠水
         - 10mM 叠氮化物，溶于 DMSO/tBuOH 或水中

         2. 在反应前几分钟，以 1:1 的比例将 CuSO4 与 THPTA 配体预螯合。该溶液冷冻后可稳定数周。

         3. 在寡聚物溶液中加入过量叠氮化物（4-50 eq）。
         4. 加入 25 当量的 THPTA/CuSO4。
         5. 加入 40 当量的抗坏血酸钠。
         6. 用惰性气体对溶液进行短暂脱气。
         7. 将反应物在室温下放置 15-60 分钟。
         8. 乙醇沉淀寡聚物或使用 Glen Gel-Pak 进行纯化。

​

参考文献

1. Polytriazoles as Copper(I)-Stabilizing Ligands in Catalysis T. R. Chan, R. Hilgraf, K. B. Sharpless, V. V. Fokin, Org. Lett. 2004, 6, 2858.

2. Analysis and Optimization of Copper-Catalyzed Azide–Alkyne Cycloaddition for Bioconjugation V. Hong, S. I. Presolski, C. Ma, M. G. Finn, Angew. Chem. Int. Ed. 2009, 48, 9879.

3. Stabilization of Virus-like Particles with Poly(2-oxazoline)s F. Manzenrieder, R. Luxenhofer, M. Retzlaff, R. Jordan, M. G. Finn, Angew. Chem. Int. Ed. 2011, 50, 2601.

4. Synthesis of Cyclic Peptide Disulfide–PHPMA Conjugates via Sequential Active Ester Aminolysis and CuAAC Coupling; K. A. Günay, H. Klok, Polym. Chem. 2016, 7, 970. 

5. a) Cellular Consequences of Copper Complexes used to Catalyze Bioorthogonal Click Reactions D. C. Kennedy, C. S. McKay, M. C. B. Legault, D. C. Danielson, J. A. Blake, A. F. Pegoraro, A. Stolow, Z. Mester, J. P. Pezacki, J. Am. Chem. Soc. 2011, 133, 17993.

b) Labeling Live Cells by Copper-Catalyzed Alkyne−Azide Click Chemistry;V. Hong, N. F. Steinmetz, M. Manchester, M. G. Finn, Bioconjugate Chem. 2010, 21, 1912.

阿拉丁官网：https://www.aladdin-e.com