实验方案(Protocols)

台盼蓝(trypan blue)排斥实验

简介

台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。

操作方法

台盼蓝排斥法

原理

台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。

材料与仪器

细胞
台盼蓝 生理盐水
显微镜 玻片 盖玻片 滴管

步骤

1.  将待染色细胞稀释至所需浓度。(方法及浓度范围与细胞计数相同) 
2.  每0.1 ml 细胞悬夜约加新鲜配置的染液一小滴,室温下染3~5 min 。
3.  染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放在高倍镜下观察。
4.  死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。计数100~200个白细胞。
5.  统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活力。 细胞活力(%)=未染色的细胞数/观察的细胞总数 × 100。

注意事项

1.  染色时间不能太长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。

2.  另可结合细胞计数方法,同时进行细胞计数和活力检测。


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Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《台盼蓝(trypan blue)排斥实验》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/trypan-blue-rejection-assay.html
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