本试剂盒采用超顺磁性的磁性粒子纯化技术和独特的缓冲系统,可以有效去除多糖多酚植物样本中的蛋白质、多糖以及酚类等杂质,从多种植物组织中分离纯化高质量基因组DNA,提取的基因组DNA纯度高,质量稳定可靠。本试剂盒纯化的基因组DNA适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交、芯片检测、高通量测序等实验。若客户需提取更多复杂植物样本,可与厂家技术人员联系,公司可根据客户样本定制提取方案。其处理后的产物用于科研检测使用。
产品组分表：
| M1373546 | Component | 48 T | Storage |
| M1373546A | RNase A | 6mg | 2-8 ℃ |
| M1373546B | 酶溶解液ESB | 1ml | RT |
| M1373546C | 裂解液CTAB | 40ml | RT |
| M1373546D | 分层液SF | 30ml | 2-8 ℃ |
| M1373546E | 磁珠 MBVB | 1.1ml | 2-8 ℃. Store in the dark. |
| M1373546F | 洗涤液 PW1 | 40ml | RT |
| M1373546G | 洗涤液 BW1 | 40ml | RT |
| M1373546H | 洗涤液 DW2 | 40ml | RT |
| M1373546I | 洗脱液 DE | 4ml | RT |
适配仪器：
手工提取
储存条件及有效期
室温(15~30℃)保存,有效期为12个月。RNase A干粉室温运输和保存,长期保存(>3个月)放置于-20~8℃。分层液SF需2~8℃避光保存。磁珠MBVB长期保存(>7天)放置于2~8℃。
注意事项
1. 使用前请仔细阅读本说明书。
2. 本试剂盒中的多种缓冲液含有刺激性的胍盐,务必戴上手套,并按照安全标准预防措施来处理。不要让缓冲液接触到皮肤、眼睛以及黏膜,如果确实发生,请立即用大量清水清洗并就医。
3. 如因气温较低,溶液出现沉淀,需要30℃水浴至沉淀完全溶解后方可使用。
4. 如因气温较低,裂解液CTAB出现沉淀,可60℃水浴至沉淀完全溶解后使用。
5. 如因气温较低,用力振荡后磁珠无法重悬,请勿使用。
6.本试剂盒中的多种缓冲液含胍盐,请勿用氧化性消毒剂如次氯酸钠进行处理,否则会释放有毒气体,须按医疗废物进行处理。
备注
1)本试剂盒需配套使用,不同批号试剂盒中各组分不可以互换或混用。
2)自备试验器材:
恒温水浴锅(当溶液出现沉淀时使用)、干式恒温仪、磁力架(1.5/2.0ml)、1.5/2.0ml无菌无核酸酶离心管、各种规格移液器及Tips(20、200、1000μl)
样本要求
1. 适用标本类型:植物样本(如荔枝叶、荔枝果肉、糖胶树、大豆、马铃薯块茎等)。
2. 标本保存和运输:标本可立即用于测试,也可以保存于-70℃或更低温度待测,保存期为6个月,应避免反复冻融。标本运输采用冷链运输。
使用方法
1. 试剂准备
1.1 实验前检查溶液是否有沉淀,磁珠是否能重悬。
1.2 溶解RNase A(10mg/ml):加入0.6ml酶溶解液ESB,溶解RNase A至终浓度为10mg/ml,颠倒混匀/轻柔涡旋让RNase A充分溶解,溶解后的RNase A须保存于-20~8℃。
2. 操作步骤
分离操作建议(步骤2.8开始):离心管置于磁力架后,轻轻地左右旋转,待磁珠聚集于贴近磁力架的管壁后,轻轻地颠倒磁力架数次,使管盖上的磁珠也聚集到管壁,静置数分钟至溶液澄清即可(静置时长视磁力架磁性而定)。
2.1 用液氮将植物研磨成粉末,称取50~100mg粉末至2.0ml离心管中。
2.2 加入700μl裂解液CTAB和10μl RNase A,涡旋混匀样本,使样本与裂解液充分混合。
2.3 65℃裂解20分钟,期间可涡旋混匀数次促进裂解。
2.4 待溶液冷却到室温后,加入550μl分层液SF,手动振荡混匀。
2.5 13,000×g离心5分钟。
2.6 吸取500μl上清水相至新的离心管中,加入500μl无水乙醇,高速涡旋混匀10秒。
2.7 加入20μl磁珠MBVB,振荡或涡旋5~7分钟使磁珠吸附DNA。
2.8 转移至磁力架上进行磁分离至溶液澄清,吸弃溶液。
2.9 加入700μl洗涤液PW1,涡旋30秒打散磁珠后转至磁力架进行磁分离至溶液澄清,吸弃溶液。
2.10 加入700μl洗涤液BW1,涡旋30秒打散磁珠后转至磁力架进行磁分离至溶液澄清,吸弃溶液。
2.11 加入700μl洗涤液DW2,涡旋30秒打散磁珠后转至磁力架进行磁分离至溶液澄清,吸弃溶液。
2.12 掌上离心机瞬时离心后,转至磁力架上吸附至溶液澄清,充分吸弃所有溶液,打开管盖,空气干燥3~5分钟。
注意:乙醇残留会抑制后续的酶反应,所以晾干时要确保乙醇挥发干净。切勿干燥过久,以免影响后续洗脱效果。
2.13 加入30~60μl洗脱液DE,高速涡旋2~3分钟打散磁珠。
2.14 60℃温浴5分钟,然后高速涡旋30秒。
2.15 瞬时离心收集管盖液滴至管中,转移至磁力架上进行磁分离。
2.16 把基因组DNA溶液转移至新的离心管中待用。如果不立即使用,请存储于-15 ~- 25℃,长期保存请放置于-70℃或更低的温度。
方法的局限性
1. 对于某些取样不佳的样本,提取产物中可能存在少量杂质抑制PCR扩增。
2. 样本核酸的提取效果与样本收集、处理、运输和保存质量密切相关,其中任何失误都将会导致结果不准确。
G2628434
危险品化学品经营许可证（带存储）